Vse kategorije
ENEN

Protokol transkripcije in vitro

Pozdravljeni. Ste se kdaj spraševali, kako znanstveniki morejo klonirati RNA? RNA je ta posebna molekula, ki jo najdemo v naših celicah in ki izvaja številne funkcije pri proizvodnji beljakovin, ki jih potrebujemo za pravilno delovanje telesa. V tem oddelku bomo pregledali zelo zanimivo protokolo, ki jo uporabljajo raziskovalci: transkripcijo v vitro. To pomeni, da znanstveniki v laboratoriju (v testnih cevkah) proizvajajo večje količine RNA, zato pa pojdimo čez posamezne korake.

Po zaključitvi mojega prejšnjega prispevka sem uvedomil, da je morda bil malo odpravljen – zdaj pa pride čas, da se pridružite zabavi v mokri laboratorij; tako da, saj ste sedaj popolnoma na vlaku za zabavo (sicer proizvodnja RNA): Kateri sestavinke in reagenčne boste potrebovali za vaš EF?? Za to bomo potrebovali posebne proteine, imenovane enzimi, identične tistim iz Yaohaijevega produkta Proizvodnja rekombinantnega Midkine . On katalizira kemikalne reakcije, te enzime pomagajo v razgradnji. Zdaj nam je potreben le naš kos DNA. Ta funkcija je DNA, ki jo uporabimo kot predlog za kopiranje za naše RNA. Dodatne regulativne zapise v RNA, imenovane nukleotidi, so tudi potrebni. Ti nukleotidi so kot majhne gradnike, ki jih je treba sestaviti, da se izgradi RNA. Uporabljamo tudi kratke cevce malega premera, da vкусno ocenjevanje vgradimo v drugo. Nazadnje nam je še potreben stroj (termocikler), ki se prepriča, da so naše reakcije pri pravi temperaturi. Morda bomo potrebovali še nekaj orodij in izdelkov za določene poskuse.

Maksimiziranje izida in čistote pri postopkih in vitro transkripcije

Tukaj se stvari razvejo, imamo en cedenčni Štrank RNA in zdaj bi radi imeli več kopij tega. Tudi Proizvodnja konjugiranih cepiv VLP je razvil Yaohai. Način, kako doseči želeni rezultat, je uporaba drugega enzima; T7 RNA polimeraze. Ta edinstven enzim, na primer, prepozna določene območja znotraj RNA. Skočni stožec za izdelavo še več kopij RNA v nadaljevanju. V tem točki bo k T7 RNA polimerazi dodana še več cedilnih Štrank RNA, dokler ne boste ustvarili velikega transkripta ali dokler vas ne spomnite, da mora ustaviti.

Po tem, ko smo RNA kadar koli močno izolirali, se spustite še dalje, da boste ugotovili, kako jo je potrebno počistiti in shraniti za nadaljnjo uporabo. Rhoades: Nekatere te metode so malce ekstremnejše v smislu izolacije RNA — ne bi jih vedno uporabljali, vendar so občasno za določne vrste poskusov potrebne. Ko bo naša RNA prosta od vseh onesnaževal, jo lahko hraniš zamrznjeno. Na ta način je varno in jo lahko kasneje uporabimo v različnih poskusih.

Why choose Yaohai Protokol transkripcije in vitro?

Sorodne kategorije izdelkov

Ne najdete tistega, kar iščete?
Za več razpoložljivih izdelkov kontaktirajte naše svetovalce.

Zahtevaj ponudbo zdaj