Firefly luciferase (F-Luc) mRNA izraža proteин luciferaza, ki jo je bilo prvotno izolirano iz samca svetlikave, Photinus pyralis. Ta proteин emitira bioluminsko svetobo v prisotnosti substrata, luciferina.
MRNA luciferaze ogena je pogosto uporabljena kot pozitivna kontrola pri transfekciji mRNA in razvoju sistemov dostave. Luciferaza ogena se lahko uporablja tudi v kulturi mammalijevih celic za merjenje izražanja genov in življenjske sposobnosti celic.
Yaohai Bio-Pharma ponuja neposplošeno ali N1Ψ spremenjeno Firefly Luciferase mRNA , s strukturo Cap1, optimiziranimi kodonami, inženirskega UTR in 110nt poliA repom, da se poveča stabilnost mRNA in učinkovitost prevajanja.
Produkt
MRNA luciferaze ogena, Cap1, poli(A) rep, neposplošena ali spremenjena mRNA
Podrobnosti o izdelku
| Produkt |
Firefly Luciferase mRNA |
| Kataloška št. |
mP003 |
| Vsebina RNA |
100 µg~10 mg (OD260) |
| Čistota |
A260/A280 |
| Identifikacija in čistota |
Elektroforeza v agarosovem gelu (AGE) |
| 5’Kap |
Kapa1 |
| 3’ poli(A) rep |
110±5 nt |
| Bazna sprememba |
Neizmenjeno, N1Ψ |
| Amortizator |
Voda brez RNaze (tekoča) |
| Dostava |
Prevozi z suho ledom; ali pri okoljski temperaturi |
| SHRANJEVANJE |
Tekovina, na ali pod -20°C; Liofilizirana praščica, pri 4°C |
| Uporaba |
Reporter genski, pozitivna kontrola |
Druge prilagodljive možnosti
| 5' Kap |
● Nezaklenjeno
● Cap0, skupaj zaklenjeno
● Cap1, skupaj zaklenjeno
● Zapiranje z enzimom, enzymatic capping
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Naravna UTR sekvenca
● Mutirana/inženirska UTR sekvenca
|
| 3' PolyA rep |
● 100A ~120A rep (priporočeno)
● Segmentiran polyA rep
● Drugi prilagojeni rep
|
| Spremenjene nukleozide |
● Neizmenjene baze,
● Pseudouridin (Ψ),
● N1-Metilpseudouridin (N1Ψ),
● 5-metilcitozin (m5C),
● 5-metiluridin (m5U),
● 5-metoksipuridin (5moU),
● 2-tioruridin (s2U),
● 2′-O-metil-U
● Drugo
|
priprava mRNA in izraz v celicah
Vzeli smo linearno plazmidno DNS (pDNA) z vgrajenim F-Luc mRNA kodirajočimi geni kot predlog za IVT, s katerim smo dobili čiste F-Luc mRNA transkripte s skupno zaključitvijo in počistitvijo, z cap1 strukturo in N1Ψ spremembo.
Čista F-Luc mRNA (1 μg) je bila mešana z komercialnim transfekcionskim sredstvom in transficirana v 293T celice v plošči s 96 lužami. Luciferaza analiza je bila izvedena po 24 urah.
Izraz Firefly luciferaze mRNA v 293T celicah
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
