Apvalus RNA, arba circRNA, yra specialus RNA rūšis, turinti kitokį formą. Kol paprastas RNA turi tiesinę išvaizdą, circRNA yra sujungta į rinkelį. CircRNAs – tai tipas, kurio struktūra yra svarbi, nes jie dažnai yra gana skaitomi ir dalyvauja daugelyje svarbių ląstelių procesų. Pirmiausia, jie reguliuoja, kaip mūsų genai yra išreikšti, kas gali paveikti viską nuo kūno augimo šablonų iki mūsų reakcijos į ligas. CircRNAs labai domina mokslininkus; jų geresnis supratimas gali atskleisti, kaip kyla ligos, bei nurodyti naujas terapijos galimybes. Tačiau yra problema: circRNAs yra labai maži ir kartais jų yra labai mažai mokslininkų tyrinėjamose imtyse. Tai daro sunkumų gauti pakankamai circRNA tyrimui.
Prieš buvo įkurta galutinė fundamentacinė sistema circRNA rinkimui, buvo naudojamas gerai įsakytas metodas, vadinamas Aukštos našumo skilties chromatografija, arba trumpiau HPLC. HPLC yra daugialypus technologijos metodas, naudojamas atskirti įvairias molekulų rūšis pagal jų fizines ir chemines savybes. Jis veikia atskiriant molekulą pagal jų dydį ir formą. Kadangi circRNA yra labai mažos, jos gali būti lengvai prarastos tarp kelių tūkstančių kitų molekulų imone. Tai reiškia, kad circRNA gali būti atskirta nuo kitų RNA, baltymų ir išorinių terpų, kurie gali būti įtraukti į imtį, naudojant veiksmingus metodus, tokious kaip dydžio atskyrimo chromatografija (angl. size exclusion chromatography - SEC), HPLC technika. Tai yra svarbus atskyrimas mokslininkams, kurie nori atskirti circRNA savo tyrimams.
Kai HPLC padeda circRNA šalinimui, ją privalo išsamiai analizuoti mokslininkai, kad suprastų jos funkcijas mūsų organizme. CircRNA pasirodė kaip svarbios dalelės, įsitraukusios į daugybę biologinių procesų, todėl išsamus supratimas apie įvairius circRNA tipus ir jų vaidmenis yra kritiškai svarbus norint aiškiai suprasti jų įtaką įvairioms ligoms. Mokslininkai nežino purifikuotos circRNA sekos ir tam turės sužinoti, kad atskleistų šių vaidmenų funkcijas. Šiam tikslui jie naudoja technikas, pvz., reversine transkripcijos PCR (RT-PCR). Naudojant RT-PCR, mokslininkai gali sukurti daugiau circRNA kopijų, kad galėtų ją tyrinėti konkrečiau. Jos dažnai yra informatyvios, teikiant informaciją apie tai, kaip veikia šios molekulės ir kokią funkciją atlieka mūsų ląstelėse, analizuojant circRNA sekuose.
Tyrimininkams reikia atkurti visą galimą gauti circRNA. CircRNA biologiniuose specimenuose yra tik mažais kiekyiais, ir HPLC gali būti naudinga jų atskyrimui ir surinkimui didesniu kiekiu. Taigi tyrimininkai turi didesnę galimybę gauti pakankamai circRNA savo eksperimentams ir gauti naudingus rezultatus. Kuo daugiau circRNA jie gali surinkti, tuo daugiau funkcijų ir vaidmenų jie galės išmokti apie sveikatą ir ligas.
Metodai ištraukti circRNA iš sudėtingų biologinių medžiagų dažnai yra brangūs (pvz., ultrafiltras), užtruktiniai ir lengvai gali būti taršyti. Ištraukti circRNA be jokios nuostolį dažnai reikalauja atsargaus poelgio ir keliojų žingsnių. Čia HPLC yra labai naudinga. HPLC metodu galima padaryti ištraukimą greitesnį ir efektyvesnį procesą. Sumažinus ištraukimo žingsnius, HPLC taip pat sumažina vertingų imčių galimą nuostolį. Šis atsargus metodas generuoja patikimesnius duomenis ir padeda užtikrinti, kad izoliuota circRNA būtų kaip galima švari.
CircRNA yra labai sunku tyrinėti, ir tai priklauso nuo mokslininkų tikslumo jų identifikavime ir matavime. Atsižvelgiant į šį veiksnią, HPLC ne tik yra svarbus žingsnis kitų taršos elementų pašalinimui, bet ir garantuoja, kad galima izoliuoti tik circRNA molekulės, taip pagerindami circRNA aptikimo specifiškumą ir jautrumą. Tai rezultuoja geresne pritaikymo gebėjumu imune, kas yra svarbu tyrimų tikslumui. Išvalyta circRNA imutė leidžia mokslininkams būti pasitikimesniems savo rezultatais ir mažina klaidų riziką jų studijose.
Yaohai Bio-Pharma yra viena iš 10 geriausių biologinių įmonių, specializuojančiųся в HPLC pagrįstame circRNA šalinime. Mes sukūrėme modernią gamybos įrangą su galingais tyrimo ir vystymo gebėjimais bei moderniais gamybos objektais. Galimos penkios medžiagos gamybos linijos, atitinkančios GMP standartus mikroorganizmų fermentacijai ir šalinimui kartu su dviem butelių ir kartridžių užpildymo linijomis bei iš anksto užpildytų jūklų. Fermentacijos mastai kinta nuo 100 l iki 2000 l. Užpildymo tūris kinta nuo 1 ml iki 25 ml. Iš anksto užpildytos švirkštės arba kartridžiai užpildo 3 iki 3,5 ml. Mūsų cGMP atitinkanti gamybos daržas užtikrina klinikinių imčių ir komercinių produktų nuolatinę tiekimą. Mūsų objektas gamina didelius molekulės, kurie eksportuojami visur pasaulyje.
Yaohai Bio-Pharma, lyderis HPLC pagrįstame circRNA mokslinių sandarų ištraukimo srityje iš mikroorganizmų, yra įsikūrusi Jiangsu provincijoje. Mes koncentruojamės ant mikrobiškai gamintų terapijų ir vakcinų, kurios tinka žmonių, gyvulių ir šunų sveikatos valdymui. Mes turime modernias tyrimo ir plėtros (RD), taip pat gamybos technologijas, kurios apima visą procesą – nuo mikroorganizmų širasčių inžinerinio modeliavimo, ląstelių banko, procesų ir metodų kūrimo iki komercinės ir klinikinės gamybos, užtikrinant sėkmingiausius reikalingų sprendimų tiekimą. Mes surinkome daug patirties mikrobiologijos apdorojimo srityje. Sėkmingai baigta daugiau nei 200 projektų ir mes padėsime savo klientams įveikti reguliavimus, tokiais kaip JAV FDA ir ES EMA. Taip pat jiegiame prieš Australijos TGA ir Kinijos NMPA. Dėka mūsų patirties ir specialistų galimybių, galime greitai atsakyti į rinkos reikalavimus ir siūlyti individualizuotus CDMO paslaugas.
Yaohai Bio-Pharma yra HPLC pagrinduojama circRNA šalinimo iš mikroorganizmų rūšių biologinių junginių technologija. Siūlome pritaikytus tyrimo ir plėtros (RD) bei gamybos sprendimus, mažindami riziką. Esame įsitraukę į daugybę modalumų, pvz., rekombinantinius subvienio vakcinos, peptidusormonas, citokinus augimo veiksnius, vienaplinkius antikorpuses, enzymus, plazmidinę DNA, mRNA ir kitus. Mes esame ekspertai keliose mikroorganizmų serijose, tokiais kaip gėlių išorinė ir vidaus (gamtinis iki 15 gramų per litrą), baktirijų periplazminė sekretacija bei tirpaliojo vidaus inkluzinės dalių (gamtinis iki 10 gramų/L). Be to, sukūrėme BSL-2 mikroorganizmų fermentacijos platformą bakterinių vakcinų kūrimui. Turime patirties gerinančiant gamybos procesus, padidindami gamtus ir mažindami išlaidas. Su aukščiai efektyviu technologijos komanda užtikriname greitą ir patikimą projektų įgyvendinimą, pristatydami jūsų produktus į rinką greičiau.
Yaohai BioPharma, vienas iš pirmaujančių 10 mikrobiologinių CDMO, integruojantis kokybės valdymą ir reguliavimo reikalavimus. Mūsų kokybės sistema atitinka dabartiniaus GMP standarto reikalavimus bei tarptautinius įstatymus. Mūsų reguliavimo ekspertų komanda yra patyrusi globaliose reguliavimo sistemoje, kad przispartintų biologinių gaminių paleidimą. Mes užtikriname sekamą gamybos procedūrą, kokybiškus produktus bei sutapimą su HPLC pagrindu esančių circRNA šalinimo ir EDS EMA reikalavimais. Taip pat tenkinami Australijos TGA ir Kinijos NMPA reikalavimai. Yaohai BioPharma sėkmingai praeitokvartalį vykdytą tiesioginę inspekciją, atlikusią Europos Sąjungos Kvalifikuotas Asmens (QP) mūsų GMP sistemos ir gamybos įrenginių tyrimui. Taip pat baigėme pradinį ISO9001 kokybės valdymo sistemos ir ISO14001 aplinkosaugos valdymo sistemos sertifikavimo audito.