Cirkularna RNA, ili circRNA, je poseban vrsta RNA-a koja ima drugačiju oblik. Dok normalna RNA ima linerni izgled, circRNA je zakrivljena u petlju. Struktura circRNA-ova je ključna jer se obično pojavljuju u velikom broju i sudjeluju u mnogim važnim ćelijskim procesima. Na primjer, one reguliraju kako se naši gene izražavaju, što može utjecati na sve od uzrasta našeg tijela do našeg odgovora na bolesti. CircRNA-ovi su zanimljivi za naučnike; bolje razumijevanje njih može otkriti kako se razvijaju bolesti i identificirati nove pristupe liječenju. Međutim, postoji problem: circRNA-ovi su vrlo mali i obično prisutni u vrlo malim količinama u uzorcima koje naučnici proučavaju. To čini teško skupiti dovoljno circRNA-a za istraživanje.
Pre nego što je osnovana definitivna metoda za prikupljanje circRNA, koristila se dobro poznata metoda nazvana Visoko performantna tečna kromatografija, ili skraćeno HPLC. HPLC je fleksibilna tehnika koja se koristi za razdvajanje različitih molekula prema njihovim fizičkim i hemijskim karakteristikama. Radi tako što razdvaja molekule na osnovu veličine i oblika. Budući da su circRNA-ovi vrlo mali, lako mogu biti izgubljeni među hiljadama drugih molekula u uzorku. To znači da se circRNA-ovi mogu razdvojiti od drugih RNA-ova, proteina i vanjskih ometanja koji bi mogli biti uključeni u uzorak koristeći efektivne metode kao što je kromatografija po veličini (SEC), tehnika HPLC. To je važno razdvajanje za naučnike koji trebaju izdvojiti circRNA za svoje istraživanje.
Kada HPLC pomaže u čišćenju circRNA, ono mora biti detaljno analizirano od strane naučnika kako bi se razumelo njegovo delovanje u nama. CircRNA se pojavila kao važne molekule uključene u više bioloških funkcija, što čini detaljno razumevanje različitih vrsta i uloga circRNA kritičnim za dešifrovanje njihovog učešća u različitim bolestima. Naučnici ne znaju niz purifikovane circRNA i trebalo bi da to zave šta bi otkrili funkcije ovih uloga. Za to koriste tehnike poput reverzne transkripcije PCR (RT-PCR). Koristeći RT-PCR, naučnici prave dodatne kopije circRNA kako bi mogli da je proučavaju specifičnije. Često su informativni, pružajući informacije o tome kako ove molekule funkcionišu i šta rade u našim ćelijama, analizirajući nizove circRNA.
Istraživači moraju da oporavite sve circRNA koje mogu da dobiju. CircRNA-ovi su dostupni u malim količinama u biološkim uzorcima, a HPLC može biti koristan za odvajanje i sakupljanje veće količine ovih ključnih molekula. Time istraživači imaju veću verovatnoću da dobiju dovoljno circRNA-a za svoje eksperimente i da generišu korisna otkrića. Što više circRNA-a mogu da sakupljaju, to više funkcija i uloga mogu da saznaju u vezi sa zdravljem i bolestima.
Metode za izdvajanje circRNA-ja iz složenih bioloških materijala često su skuplje (npr., ultrafiltracija), teže u izvršavanju i podložne kontaminaciji. Izvlačenje circRNA-a bez gubitaka često zahteva pažljivo rukovanje i više koraka. Tu upravo HPLC postaje vrlo koristan. HPLC metode mogu da učine proces izvlačenja bržim i efikasnijim. Smanjenjem broja koraka prilikom izvlačenja, HPLC takođe smanjuje potencijalne gubove vrednih uzoraka. Ovaj pažljiv pristup daje pouzdanije podatke i pomaga da se osigura da je izdvojeni circRNA što čišći moguće.
CircRNA-ovi su veoma teški za proučavanje, a zavise od ekstra preciznosti naučnika u njihovoj identifikaciji i merenju. Na osnovu ovog čimbenika, HPLC nije samo ključan korak za uklanjanje drugih zabrzaja, već takođe osigurava da se izoluju samo molekuli circRNA-a, šta povećava specifičnost i osetljivost detekcije circRNA-a. To rezultira čišćim uzorkom, što je važno za tačnost istraživanja. Čišći uzorak circRNA-a pomaga naučnicima da imaju više poverenja u svoje rezultate i manju verovatnoću da naprave greške u svojim istraživanjima.
Yaohai Bio-Pharma je jedna od deset vodećih bioloških kompanija koja se bavi specijalizovanim očišćivanjem circRNA na osnovu HPLC-a. Izgradili smo savremenu proizvodnju sa jakim mogućnostima istraživanja i razvoja, kao i savremenom proizvodnom opremom. Postoji pet proizvodnih linija aktivne supstance koje odgovaraju standardima GMP za mikrobiološku fermentaciju i očišćivanje, uz dve linije za ispunjavanje flašica i kartuza, kao i prenapunjene jake. Kapacitet fermentacije varira između 100L i 2000L. Zapremina ispuna se kreće od 1ml do 25ml. Prenapunjene šprice ili kartuze imaju zapreminu od 3 do 3.5ml. Naš radionica koja odgovara cGMP standardima osigurava stalnu dostavu kliničkih uzoraka i trgovinskih proizvoda. Naše proizvodnje velikih molekula izvoze se širom sveta.
Yaohai Bio-Pharma, vodeći u oblasti HPLC baziranog čišćenja circRNA iz mikrobioloških biologija, nalazi se u provinciji Jiangsu. Fokusiramo se na mikrobiološki proizvedene lekove i vakcine koje su prilagođene upravljanju zdravljem kod ljudi, veterinarstva i ljubimaca. Imamo moderne R i D tehnološke platforme kao i proizvodnje koje obuhvataju celokupan proces, od inženjeringa mikrobioloških štrika, bankovanja ćelija, razvoja procesa i metoda do komercijalne i kliničke proizvodnje, osiguravajući da možemo da osiguramo uspešno dostavljanje najnovije rešenja. Stekli smo veliki iskustva u oblasti mikrobiološke biotehnologije. Uspešno je završeno više od 200 projekata i podržavamo naše klijente da pređu regulacije poput one američke FDA i europske EMA. Takođe ih podržavamo sa australijskom TGA i kineskom NMPA. Možemo brzo da reagujemo na tržišne zahteve i da nudimo prilagođene CDMO usluge zbog našeg iskustva i stručnjaka.
Yaohai Bio-Pharma je HPLC bazirano čišćenje circRNA u biološkim sredstvima od izvora mikroorganizama. Ponudili smo prilagođene RD rešenja kao i rešenja za proizvodnju, minimizujući rizike. Bili smo uključeni u brojne modalitete poput rekombinantnih podjediničnih vakcina, peptidskih hormona, ciklinske rasta faktore, jednodomenskih antitela, enzima, plazmid DNA, mRNA i drugih. Stručnjaci smo u nekoliko mikrobioloških domaćinstava, kao što su kvasac izvanćelijarni i unutraćelijarni (rezultat do 15 grama po litru), bakterijska periplazmatska sekretija te rastvorivi unutraćelijarni inkluzioni tijela (rezultat do 10 grama/L). Takođe smo razvili BSL-2 mikrobiološku fermentacionu platformu za razvoj bakterijskih vakcina. Imamo iskustvo u poboljšanju proizvodnih procesa, time povećavajući rezultate i smanjujući troškove. S vrlo efikasnom tehničkom ekipom, osiguravamo brzu i pouzdanu dostavu projekata i donošanje vaših proizvoda na tržište brže.
Yaohai BioPharma, jedan od deset najboljih mikrobioloških CDMO-ova koji integrira upravljanje kvalitetom i regulatorne poslove. Naš sistem kvaliteta je u skladu sa trenutnim GMP standardima kao i međunarodnim propisima. Naš tim regulatornih stručnjaka je vješti u globalnim regulatornim okvirima kako bi se ubrzali lansiranja bioloških proizvoda. Osiguravamo praćenje postupaka proizvodnje, kvalitetne proizvode, kao i skladnost sa zahtevima HPLC bazirane circRNA čišćenja i EU EMA. Zahtevi Australijske TGA i Kine NMPA su takođe ispunjeni. Yaohai BioPharma uspešno je prošla ličnu reviziju provedenu od strane Kvalifikovane Osobe Europske Unije (QP) da bi se ispitala naša GMP sistema i proizvodni objekat. Takodėx smo završili početne certifikacione revizije Sistema Upravljanja Kvalitetom ISO9001 i Sistema Upravljanja Okolišem ISO14001.