Cirkularna RNA, ili circRNA, je određeni vrsta RNA-a koja ima drugačiju oblikovanju. Dok je normalna RNA linearna i izgleda kao prava crta, circRNA je zakrivljena u petlju. CircRNA-ovi — vrsta čija struktura je ključna jer se obično pojavljuju u velikom broju i sudjeluju u mnogim važnim stanovima ćelije. Među drugim stvarima, one reguliraju kako se naše gene izražavaju, što može utjecati na sve od uzrastašnjih šablonova rasta do našeg odgovora na bolesti. CircRNA-ovi su zanimljivi za znanstvenike; bolje razumijevanje njih može otkriti kako se razvijaju bolesti i identificirati nove terapeutske pristupe. Ali postoji problem: circRNA-ovi su vrlo mali i obično se pojavljuju u vrlo malim količinama u uzorcima koje znanstvenici proučavaju. To čini teškim skupiti dovoljno circRNA-a za istraživanje.
Prije nego što je uspostavljena konačna metoda za prikupljanje circRNA, koristila se dobro poznata metoda nazvana Visoko-učinkovita tekuća hromatografija, ili kratica HPLC. HPLC je fleksibilna tehnika koja se koristi za odvajanje različitih molekula prema njihovim fizičkim i kemikalnim karakteristikama. Radi tako da odvaja molekule na temelju veličine i oblika. Budući da su circRNA veoma male, mogu lako izgubiti među tisućama drugih molekula u uzorku. To znači da se circRNA mogu odvojiti od drugih RNA-ja, proteina i vanjskih otkaza koji su mogli biti uključeni u uzorak pomoću učinkovitih metoda poput hromatografije po veličini (SEC), tehnike HPLC. Važno je odvajanje za znanstvenike koji moraju izdvojiti circRNA za svoje istraživanje.
Kada HPLC pomaže u čišćenju cirkularne RNA, ona mora biti temeljito analizirana od strane znanstvenika kako bi se shvatilo njezine funkcije u nama. Cirkularne RNA-je izbjegle kao važni molekuli koji sudjeluju u više bioloških funkcija, što čini temeljito razumijevanje različitih vrsta i uloga cirkularne RNA kritičnim za dešifriranje njihove uloge u različitim bolestima. Znanstvenici ne znaju niz cirkularne RNA koju su očistili i trebali će to uočiti kako bi otkrili funkcije tih uloga. Za to koriste tehnike poput obrnutog transkripcije PCR (RT-PCR). S RT-PCR, znanstvenici prave dodatne kopije cirkularne RNA kako bi je mogli proučavati specifičnije. Često su informativne, pružajući informacije o tome kako ove molekule funkcioniraju i što rade u našim ćelijama, analizirajući nizove cirkularne RNA.
Istraživači moraju oporaviti sve circRNA koje mogu dobiti. CircRNA se nalaze samo u malim količinama u biološkim uzorcima, a HPLC može biti koristan za odvajanje i prikupljanje veće količine ovih ključnih molekula. Time istragači imaju veću vjerojatnost da dobiju dovoljno circRNA za svoje eksperimente i stvore korisne zaključke. Što više circRNA mogu prikupiti, to više funkcija i uloga mogu saznati o zdravlju i bolestima.
Metode za izdvajanje circRNA-a iz složenih bioloških materijala često su skupljih (npr., ultrafiltracija), težak u izvedbi i podložne kontaminaciji. Dobavljanje circRNA-a bez gubitaka često zahtjeva pažljivo rukovanje i više koraka. Ovdje je HPLC posebno koristan. Metode HPLC mogu učiniti proces izdvajanja bržim i učinkovitijim. Smanjujući broj koraka prilikom izdvajanja, HPLC također smanjuje moguće gubitke vrijednih uzoraka. Ovaj pažljivo izvedeni postupak proizvodi pouzdanije podatke i osigurava da izdvojeni circRNA bude što čišći.
CircRNA-ovi su vrlo teški za proučavanje, a zavise od izvanredne preciznosti znanstvenika u njihovoj identifikaciji i mjerenju. Na temelju ovog čimbenika, HPLC nije samo ključan korak za uklanjanje drugih onesčista, već također osigurava da se mogu izolirati samo molekuli circRNA-a, što poboljšava specifičnost i osjetljivost otkrivanja circRNA-a. To rezultira čišćim uzorkom, što je važno za točnost istraživanja. Čišći uzorak circRNA-a pomaže znanstvenicima da imaju više povjerenja u svoje rezultate i smanjuje rizik od grešaka u njihovim istraživanjima.
Yaohai Bio-Pharma je jedna od 10 najvećih bioloških tvrtki koja se bavi cirkularnim RNA čišćenjem temeljenim na HPLC-u. Izgradili smo savremenu proizvodnu jedinicu s jakim mogućnostima istraživanja i razvoja te savremenom proizvodnom opremom. Pet proizvodnih linija suštance za lijekove u skladu s GMP standardima za mikrobiološku fermentaciju i čišćenje, uz dvije linije za ispunjavanje flašica i kartuča te prenapunjene iglice, dostupne su odmah. Raspon fermentacijskih kapaciteta iznosi između 100L i 2000L. Kapacitet ispuna varira od 1ml do 25ml. Prenapunjene šprice ili kartuče ispune se s 3 do 3.5ml. Naš radionica u skladu s cGMP osigurava stalno dobavljanje kliničkih uzoraka i trgovinskih proizvoda. Naše djelatnosti proizvode velike molekule koje se izvoze širom svijeta.
Yaohai Bio-Pharma, vodeći u oblasti HPLC-baziranog očišćavanja circRNA iz mikrobioloških biologija, nalazi se u provinciji Jiangsu. Fokusiramo se na mikrobiološki proizvedene lijekove i cjepive koji su prilagođeni upravljanju zdravljem kod ljudi, životinja i ljubimaca. Posjedujemo moderne Razi i proizvodne tehnološke platforme koje obuhvataju cijeli proces, od inženjeringa mikrobioloških štrika, stanica banke, razvoja procesa i metoda, do komercijalnog i kliničkog proizvodnje, osiguravajući time uspješnu dostavu najnovije rješenja. Nabavili smo veliki broj iskustava u području mikrobiološke obrade. Uspešno smo dovršili više od 200 projekata i podržavamo naše klijente da preodoljedu propise poput onih američke FDA i europske EMA. Također ih pomažemo s australskom TGA i kineskom NMPA. Možemo brzo reagirati na potrepstine tržišta i nudeći prilagođene CDMO usluge zbog našeg iskustva i stručnosti.
Yaohai Bio-Pharma se bavi HPLC baziranim čišćenjem circRNA u biološkim sredstvima odvojenim iz mikroorganizama. Ponuditi prilagođena RD rješenja kao i proizvodnju, dok minimiziramo rizik. Bili smo angažirani u brojnim modalitetima poput rekombinantnih subjediničnih cjepiva, peptidskih hormona, citozina rasta faktora, jednodomenskih antigena, enzima, plazmidnog DNA, mRNA-a i drugih. Stručni smo u nekoliko mikrobioloških domaćinstava, poput kvasca izvanstanica i unutarstanica (dohodak do 15 grama po litru), bakterijsko periplazmatičko tajenje te rastvorljive unutarstanice sa inkluzijskim tijelima (dohodak do 10 grama/L). Također smo razvili BSL-2 mikrobiološku fermentacijsku platformu za razvoj bakterijskih cjepiva. Imamo iskustva u poboljšanju proizvodnje procesa, time povećavajući dohode i smanjujući troškove. S vrlo učinkovitim timom tehnologa, osiguravamo brzu i pouzdanu dostavu projekata i donošenje vaših proizvoda na tržište brže.
Yaohai BioPharma, jedan od deset najvećih CDMO-ova u području mikrobioloških procesa koji integrira upravljanje kvalitetom i propisne poslove. Naš sustav kvalitete je u skladu s trenutnim GMP standardima te međunarodnim propisima. Naš tim stručnjaka za propisne poslove vješto poznaje globalne propisne okvire kako bi ubrzali lansiranje bioloških proizvoda. Osiguravamo pratljive postupke proizvodnje, kvalitetne proizvode te pridržavanje zahtjevima HPLC-bazirane cirkularne RNA čišćenja i EU EMA. Također se zadovoljavaju zahtjevi Australijske TGA i Kineske NMPA. Yaohai BioPharma uspješno je prošao osobni auditan izvršen od strane Ovlašćene Osobe Europske Unije (QP) kako bi se ispitalo naš GMP sustav i proizvodni objekt. Također smo završili početne certifikacijske audite Sustava Upravljanja Kvalitetom ISO9001 i Sustava Upravljanja Okolišem ISO14001.