الRNA الدائري، أو circRNA، هو نوع محدد من RNA له شكل مختلف. في حين أن RNA العادي يظهر بشكل خط مستقيم خطي، فإن circRNA دائري. تعتبر CircRNAs نوعًا مهمًا بسبب بنيته لأنها غالبًا ما تكون وفيرة وتشارك في العديد من العمليات الخلوية المهمة. فعلى سبيل المثال، تنظم كيفية تعبير الجينات لدينا، مما يمكن أن يؤثر على كل شيء من أنماط نمو الجسم إلى كيفية استجابتنا للأمراض. تحظى CircRNAs باهتمام كبير من العلماء؛ حيث يمكن أن يؤدي فهم أفضل لها إلى كشف كيفية تطور الأمراض وتحديد طرق علاجية جديدة. لكن هناك مشكلة: circRNAs صغيرة جدًا وتكون موجودة بكميات قليلة جدًا في العينات التي يدرسها العلماء. وهذا يجعل من الصعب الحصول على كمية كافية من circRNA لأغراض البحث.
قبل إنشاء الأساس النهائي لجمع circRNA، تم استخدام طريقة معروفة تُسمى كروماتوجרפيا السائل عالي الأداء، أو اختصارًا HPLC. تعد كروماتوجرافيا السائل عالي الأداء تقنية متعددة الاستخدام تُستخدم لفصل جزيئات مختلفة بناءً على خصائصها الفيزيائية والكيميائية. تعمل عن طريق فصل الجزيئات بناءً على الحجم والشكل. نظرًا لأن circRNAs صغيرة جدًا، يمكن أن تضيع بسهولة بين آلاف الجزيئات الأخرى الموجودة في العينة. يعني ذلك أنه يمكن فصل circRNAs عن الـ RNAs الأخرى والبروتينات والنفايات الخارجية التي قد تكون موجودة في العينة باستخدام طرق فعالة مثل كروماتوجرافيا استبعاد الحجم (SEC)، وهي تقنية من تقنيات HPLC. يعتبر هذا الفصل مهمًا للعلماء الذين يحتاجون إلى عزل circRNA لاستخدامها في أبحاثهم.
بمجرد أن تساعد HPLC في تنقية circRNA، يجب تحليلها بعناية من قبل العلماء لفهم وظائفها في أجسامنا. ظهرت CircRNAs كجزيئات مهمة متورطة في العديد من الوظائف البيولوجية، مما يجعل فهمًا شاملًا لأنواع وأدوار circRNA المختلفة أمرًا حاسمًا لفك شفرة تورطها في الأمراض المتنوعة. لا يعرف العلماء تسلسل circRNA المُنقاة وسيحتاجون إلى ذلك لاكتشاف وظائف هذه الأدوار. لهذه الغاية، يستخدمون تقنيات مثل التفاعل المتسلسل بالنسخ العكسي (RT-PCR). باستخدام RT-PCR، يقوم العلماء بصنع نسخ إضافية من circRNA حتى يتمكنوا من دراستها بشكل أكثر تحديدًا. غالبًا ما تكون هذه الدراسات مفيدة، حيث توفر معلومات حول كيفية عمل هذه الجزيئات وماذا تفعل في خلايانا من خلال تحليل تسلسلات circRNA.
يحتاج الباحثون إلى استعادة كل الدائريات RNA التي يمكنهم الحصول عليها. الدائريات RNA متاحة بكميات صغيرة فقط في العينات البيولوجية، ويمكن أن تكون تقنية HPLC مفيدة في فصل وجمع كمية أكبر من هذه الجزيئات الحرجة. وبالتالي يكون لدى الباحثين فرصة أكبر للحصول على كمية كافية من الدائريات RNA لإجراء تجاربهم وإنتاج نتائج قابلة للتنفيذ. كلما تمكّنوا من جمع المزيد من الدائريات RNA، زادت معرفتهم بوظائفها وأدوارها في الصحة والمرض.
تُعتبر طرق استخراج الحمض النووي الدائري (circRNA) من المواد البيولوجية المعقدة غالبًا مرتفعة التكلفة (على سبيل المثال، الترشيح الفائق)، مرهقة وعرضة للتلوث. إخراج circRNA دون فقدان أي منها يتطلب التعامل بحذر شديد وإجراء عدة خطوات. هنا تكمن فائدة كروماتوغرافيا الطور السائل عالي الأداء (HPLC). يمكن أن تجعل طرق HPLC عملية الاستخراج أكثر سرعة وفعالية. عن طريق تقليل الخطوات في عملية الاستخراج، تقلل HPLC أيضًا من فقدان العينات القيمة المحتمل. هذه الطريقة الدقيقة تنتج بيانات أكثر موثوقية وتضمن أن يكون الحمض النووي الدائري المستخلص نقيًا قدر الإمكان.
من الصعب جدًا دراسة الدائريات RNA، ويعتمد ذلك على دقة العلماء بشكل إضافي في تحديد وقياس هذه الجزيئات. بناءً على هذا العامل، فإن تقنية HPLC ليست فقط خطوة أساسية لإزالة الشوائب الأخرى، ولكنها أيضًا تضمن عزل جزيئات circRNA فقط، مما يحسن من الحساسية والدقة في اكتشاف circRNA. وهذا يؤدي إلى الحصول على عينة أنقى، وهو أمر مهم لدقة البحث. وجود عينة نقية من circRNA يساعد العلماء على الثقة أكثر في نتائجهم وتقليل فرص ارتكاب الأخطاء في أبحاثهم.
ياوهاي بيولوجي فارما هي واحدة من أفضل 10 شركات بيولوجية متخصصة في تنقية circRNA باستخدام تقنية HPLC. لقد أنشأنا منشأة تصنيع حديثة ذات قدرات بحث وتطوير قوية ومنشآت تصنيع حديثة. هناك خمس خطوط إنتاج مواد دوائية تتوافق مع معايير GMP لتخمير وتنقية الميكروبات، بالإضافة إلى خطين لتعبئة الزجاجات والكرايتات وأيضًا الإبر المسبقة التعبئة. تتراوح أحجام التخمير المتاحة بين 100 لتر و2000 لتر. يتراوح حجم التعبئة بين 1 مل و25 مل. يتم تعبئة الإبر أو الكرايتات المسبقة التعبئة بحجم يتراوح بين 3 إلى 3.5 مل. يضمن ورشة عمل الإنتاج الخاصة بنا التي تتوافق مع معايير cGMP توفير إمداد مستمر للعينات السريرية والمنتجات التجارية. تقوم منشأتنا بإنتاج الجزيئات الكبيرة التي يتم تصديرها إلى جميع أنحاء العالم.
ياوهاي بيو-فارما، وهي شركة رائدة في تنقية circRNA المستندة إلى تقنية HPLC لأدوية الميكروبات، تقع في جيانغسو. نحن نركز على العلاجات واللقاحات التي تنتجها الكائنات الدقيقة والتي تتناسب مع إدارة الصحة البشرية والبيطرية وصحة الحيوانات الأليفة. لدينا منصات تقنية حديثة للبحث والتطوير والإنتاج تغطي العملية بأكملها، من هندسة سلالات الكائنات الدقيقة، وبنوك الخلايا، وتطوير العمليات والطرق، وحتى الإنتاج التجاري والسريري، مما يضمن لنا توفير الحلول الأكثر تقدمًا بنجاح. لقد اكتسبنا خبرة كبيرة في مجال معالجة الكائنات الحية الدقيقة البيولوجية. تم إكمال أكثر من 200 مشروع بنجاح، وندعم عملاءنا للتغلب على اللوائح مثل لوائح FDA الأمريكية وEMA الأوروبية. كما نساعد العملاء مع TGA الأسترالية وNMPA الصينية. نحن قادرون على الاستجابة بسرعة لاحتياجات السوق وتقديم خدمات CDMO مخصصة بفضل خبرتنا ومهارتنا.
تقوم Yaohai Bio-Pharma بالتنقية circRNA المستندة إلى HPLC في البيولوجيات المستمدة من الجراثيم. نقدم حلول تطوير وتصنيع مخصصة مع تقليل المخاطر. لقد شاركنا في العديد من الأنواع مثل لقاحات الوحدة المركبة، هرمونات الببتيد، عوامل النمو السيتوكين، مضادات جسم ذات نطاق واحد، الإنزيمات، الحمض النووي الرباعي، الرنا المرسال والمزيد. نحن خبراء في عدة مستضيفات جرثومية مثل الخميرة داخل الخلايا وخارجها (إنتاج يصل إلى 15 غرامًا لكل لتر)، إفراز بروتينات البكتيريا في الفضاء بين الخلايا وكذلك الأجسام الشاملة القابلة للذوبان داخل الخلية (إنتاج يصل إلى 10 غرامات/لتر). بالإضافة إلى ذلك، طورنا منصة تخمير جرثومي BSL-2 لتطوير لقاحات بكتيرية. لدينا سجل حافل في تحسين عمليات الإنتاج، مما يؤدي إلى زيادة الإنتاج وتقليل التكاليف. ومع فريق تقني كفؤ للغاية، نضمن تسليم المشاريع بشكل سريع وموثوق ونجلب منتجاتكم إلى السوق بشكل أسرع.
ياوهاي بيوفارما، واحدة من أكبر 10 شركات CDMO الميكروبية التي تدمج إدارة الجودة والشؤون التنظيمية. نظام جودتنا متوافق مع معايير GMP الحالية واللوائح الدولية. فريق خبراء تنظيميين لدينا على دراية بالأنظمة التنظيمية العالمية لتسريع إطلاق المنتجات البيولوجية. نحن نضمن إجراءات إنتاج قابلة للتعقب، ومنتجات ذات جودة عالية، وكذلك الامتثال لمتطلبات تنقية circRNA المستندة إلى HPLC والEMA الأوروبية. كما يتم الالتزام بمتطلبات TGA الأسترالية وNMPA الصينية. لقد نجحت ياوهاي بيوفارما في اجتياز التدقيق الشخصي الذي أجرته شخصية مؤهلة من الاتحاد الأوروبي (QP) لفحص نظام GMP ومرافق الإنتاج لدينا. كما أكملنا عمليات التدقيق الأولية لنظام إدارة الجودة ISO9001 ونظام إدارة البيئة ISO14001.