mRNA ได้ถูกใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาเกี่ยวกับฟังก์ชันของยีนหรือโปรตีน นอกจากนี้ยังเป็นที่นิยมในกระบวนการพัฒนาชีวเภสัชภัณฑ์เพื่อการป้องกันและการรักษา การสังเคราะห์ RNA โดยวิธีการทรานสคริปชันในหลอดทดลอง (IVT) เป็นกลยุทธ์ทั่วไปที่ทำให้เราสามารถได้รับลำดับทรานสคริปต์ตามที่กำหนดอย่างมีประสิทธิภาพ
Yaohai Bio-Pharma ได้พัฒนาเทคโนโลยีการสังเคราะห์ mRNA ชุดหนึ่งเพื่อให้ได้ RNA คุณภาพสูง เช่น การออกแบบและปรับแต่งลำดับ IVT การกรอง การอบแห้ง และการห่อหุ้มด้วยอนุภาคไขมันขนาดเล็ก (LNP) ทั้งหมดนี้จะถูกควบคุมภายใต้มาตรฐานคุณภาพ (QC) ที่เข้มงวด
ด้วยการระบาดของโรคโควิด-19 ในปี 2020 เทคโนโลยี mRNA ได้พัฒนาไปอย่างรวดเร็ว และการวิจัยและประยุกต์ใช้งานที่เกี่ยวข้องก็ได้รับการพัฒนาอย่างไม่เคยมีมาก่อน รวมถึงวัคซีนป้องกันสำหรับการป้องกันโรคติดเชื้อ วัคซีนบำบัดและการรักษาโรคมะเร็ง ยาบำบัดมะเร็ง การบำบัดแทนโปรตีน การแพทย์ฟื้นฟู และการบำบัดเซลล์และการบำบัดยีน (CGT)
วัคซีน mRNA | mRNA เทอร์โมพิวติกส์ |
|
กระบวนการ | บริการเพิ่มเติม | รายละเอียดบริการ | ระยะเวลาส่งมอบ (วันทำงาน) | ผลงานที่ได้รับ |
การออกแบบและปรับแต่งลำดับ mRNA | การออกแบบและปรับแต่งลำดับรหัสพันธุกรรม | การออกแบบลำดับ CDS และการปรับแต่งโคดอน | 1-3 | ไฟล์ลำดับ |
การออกแบบและปรับแต่งลำดับที่ไม่ใช้รหัสพันธุกรรม | การออกแบบและปรับแต่งลำดับ UTR, polyA | |||
การเตรียมพลาสมิดเทมเพลตสำหรับการถอดแบบ | การเตรียมพลาสมิด рекомบินันต์ | การสังเคราะห์ยีน | 7-10 | |
การขยายพันธุ์และการสกัดพลาสมิด | 4 | |||
การทำให้พลาสมิดเป็นเส้นตรงและการฟอกแยก | ||||
การถอดแบบ mRNA ในหลอดทดลอง | การปิดห่วงในกระบวนการถอดแบบ (วิธีเดียวขั้นตอน) | การถอดแบบในหลอดทดลอง (IVT) / อะนาล็อกแคป | 1-2 | ไม่มีข้อมูล |
การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ (การดัดแปลง UTP/CTP) | ||||
การกำจัดเทมเพลต DNA (DNase I) | ||||
การปิดห่วงด้วยเอนไซม์ (กระบวนการสองขั้นตอน) | IVT | 2-3 | ||
การดัดแปลงนิวคลีโอไทด์ (การดัดแปลง UTP/CTP) | ||||
การกำจัดเทมเพลต DNA (DNase I) | ||||
การ提纯 mRNA (ลิเธียมคลอไรด์/เม็ดแม่เหล็ก) | ||||
การปิดห่วงด้วยเอนไซม์ | ||||
การกรอง mRNA | แผนการแยกสารแบบเดิม | การตกตะกอนด้วยลิเธียมคลอไรด์ | 1 | สารยา mRNA |
การแยกด้วยเม็ดแม่เหล็ก | ||||
แผนการแยกด้วยคอลัมน์โครมาโตกราฟี | การรวมกันของหลายวิธีโครมาโทกราฟี | 1-2 | ||
การเปลี่ยนบัฟเฟอร์ | การกรองสูง | 1 | ||
การ Freeze-dry mRNA | การไลโอไฟล์ | การแช่แข็งล่วงหน้า | 2-3 | ผง mRNA ที่ถูกไลโอไฟล์ |
การอบแห้งขั้นแรก (การ sublime) | ||||
การอบแห้งขั้นที่สอง (การดูดซับ) | ||||
การห่อหุ้ม mRNA | การห่อหุ้มด้วย LNP | การห่อหุ้มด้วย LNP | 2-3 | ผลิตภัณฑ์ยา mRNA-LNP |
การเข้มข้นและการเปลี่ยนบัฟเฟอร์ | ||||
การวิเคราะห์คุณภาพ mRNA | สารออกฤทธิ์ mRNA / ผงไลโอฟายล์ | ความเข้มข้น ความบริสุทธิ์ | 1 | รายงานผลการทดสอบ |
ความสมบูรณ์ ประสิทธิภาพการปิดจ๊าด polyA tail distribution | 2-5 | |||
ผลิตภัณฑ์ยา mRNA-LNP | ประสิทธิภาพการห่อหุ้ม | 1 | ||
ขนาดอนุภาคและความกระจายตัว | ||||
ประจุผิว | ||||
การตรวจสอบการแสดงออกของ mRNA | การประเมินเซลล์ 293T | การวางเซลล์ลงบนจาน | 4 | |
การ transfect เซลล์ชั่วคราว | ||||
การสังเกตสัญญาณฟลูออเรสเซนซ์ | 1-3 | |||
Western blot (WB) / การตรวจวิเคราะห์ด้วย ELISA |
5' แคป |
▪ ไม่มีแคป ▪ Cap0, ร่วมแคป ▪ Cap1, ร่วมแคป ▪ Cap1, การใส่แคปด้วยเอนไซม์ |
5' UTR/3' UTR |
▪ ลำดับนิวคลีโอไทด์ UTR ตามธรรมชาติ ▪ ลำดับนิวคลีโอไทด์ UTR ที่เกิดการกลายพันธุ์/ถูกออกแบบใหม่ |
หาง PolyA 3' |
▪ หาง 100A ~120A (แนะนำ) ▪ หาง polyA แบบแบ่งส่วน ▪ หางแบบกำหนดเองอื่น ๆ |
นิวคลีโอไซด์ที่ถูกดัดแปลง |
▪ ฐานที่ไม่ถูกดัดแปลง ▪ พิวโดยูรีซิน (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosine (m5C) ▪ 5-methyluridine (m5U) ▪ 5-methoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ การดัดแปลงอื่น ๆ |
กระบวนการทำงานแบบบูรณาการ
ให้บริการชุดหนึ่งตั้งแต่การออกแบบลำดับในขั้นตอนแรกไปจนถึงการเตรียม mRNA การควบคุมคุณภาพ และการตรวจสอบการแสดงออกในขั้นตอนหลังสุด
การออกแบบและปรับปรุงลำดับที่อยู่ในระดับแนวหน้าของโลก
การออกแบบและปรับแต่งลำดับ mRNA อย่างมืออาชีพช่วยส่งเสริมการแสดงออกของ mRNA ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
การแก้ไขนิวคลีโอไทด์หลากหลายรูปแบบ
เพิ่มการแสดงออกของ mRNA อย่างมีประสิทธิภาพและลดผลกระทบต่อระบบภูมิคุ้มกันที่ไม่พึงประสงค์จาก mRNA
แพลตฟอร์มการ提纯ที่ครบครัน
โดยการรวมวิธีการpurificationแบบเดิมและการออกแบบเอง ตัวอย่าง mRNA จะได้รับความบริสุทธิ์สูง
แพลตฟอร์ม QC ที่สมบูรณ์
เพิ่มตัวเลือก QC เพื่อตอบสนองความต้องการของการทดสอบประจำ เช่น ความเข้มข้น, ความบริสุทธิ์ A260/280 และความสมบูรณ์ รวมถึงความต้องการควบคุมคุณภาพในระดับสูง เช่น ประสิทธิภาพการ capped และการกระจาย polyA
การจัดส่งรวดเร็ว
MRNA ที่ปรับแต่งตามคำขอสามารถจัดส่งได้ภายใน 7 วัน โดยไม่นับเวลาในการสังเคราะห์ลำดับจากแหล่งภายนอก