mRNA به طور گسترده در مطالعه عملکرد ژنها یا پروتئینها استفاده میشود. همچنین، در توسعه بیولوژیکهای پیشگیرانه و درمانی نیز معمول است. به عنوان یک استراتژی متداول برای سنتز مولکولهای RNA، ترانسکریپسیون در محیط بیرونی (IVT) به ما اجازه میدهد ترانسکریپتهای سفارشی را به طور کارآمد به دست آوریم.
شرکت Yaohai Bio-Pharma مجموعهای از فناوریهای سنتز mRNA را برای ارائه RNA با کیفیت بالا، مانند طراحی و بهینهسازی دنباله، IVT، تصفیه، خشک کردن و بستهبندی در ذرات نانو لیپیدی (LNP) ایجاد کرده است. تمام محصولات تحت استانداردهای کنترل کیفیت (QC) صریح منتشر میشوند.
با شیوع دنیاگیری کووید-۱۹ در سال ۲۰۲۰، فناوری mRNA به طور قابل توجهی پیش رفته است و تحقیقات و کاربردهای مرتبط با آن توسعه بی سابقهای یافته است، شامل واکسنهای پیشگیرانه برای جلوگیری از بیماریهای عفونی، واکسنها و داروهای درمانی سرطان، درمان تومور، درمان جایگزین پروتئین، پزشکی بازسازی، و درمان سلولی و ژنتیکی (CGT).
واکسن mRNA | درمانهای mRNA |
|
فرآیند | سرویس اختیاری | جزئیات خدمات | دوره تحویل (روز کاری) | محصول تحویلی |
طراحی و بهینهسازی دنباله mRNA | طراحی و بهینهسازی دنبالههای کدگذاری | طراحی دنباله CDS و بهینهسازی کدون | 1-3 | فایل توالی |
طراحی و بهینهسازی توالیهای غیر کدگذار | طراحی و بهینهسازی UTR، توالیهای polyA | |||
آمادهسازی الیاف پلاسمیدی الگوی نگارش | آمادهسازی پلاسمید بازتولیدی | 합성 ژن | ۷-۱۰ | |
افزایش و استخراج پلاسمید | 4 | |||
خطیسازی و پاککردن پلاسمید | ||||
نگارش درون زیستی mRNA | قفلدهی همزمان (روش یک مرحلهای) | ترانسکریپسیون در محیط غیر زنده (IVT) / آناлог کاپ | ۱-۲ | نامشخص |
تغییرات نوکلئوتیدی (تغییرات UTP/CTP) | ||||
حذف الگوی DNA (دناز I) | ||||
قفلبندی انزیمی (فرآیند دو مرحلهای) | IVT | 2-3 | ||
تغییرات نوکلئوتیدی (تغییرات UTP/CTP) | ||||
حذف الگوی DNA (دناز I) | ||||
پاکسازی mRNA (رسوبزنی کلرید لیتیوم / ذرات مغناطیسی) | ||||
قفلبندی انزیمی | ||||
پاکسازی mRNA | طرح پاکسازی معمولی | رسوبزنی کلرید لیتیوم | 1 | ماده فعال دارویی mRNA |
پاکسازی ذرات مغناطیسی | ||||
طرح پاکسازی ستون کروماتوگرافی | ترکیب روشهای چندگانه کروماتوگرافی | ۱-۲ | ||
تعویض بافر | فراتفلتراسیون | 1 | ||
لیوفیلیزاسیون mRNA | لیوفیلیزاسیون | یخ زدن پیش از لیو | 2-3 | باروی خشک شده mRNA |
خشک شدن اولیه (زیرنما) | ||||
خشک شدن ثانویه (جذب معکوس) | ||||
حباببندی mRNA | حباببندی LNP | حباببندی LNP | 2-3 | محصول دارویی mRNA-LNP |
تمرکز و تبادل بافر | ||||
تحلیل کیفیت mRNA | مادهٔ فعال دارویی mRNA / پودر خشککردن مایع | تمرکز، خالصی | 1 | گزارش تست |
سالمانی، کارایی سرپوشی، توزیع دنبالهٔ polyA | 2 تا 5 | |||
محصول دارویی mRNA-LNP | کارایی بستهبندی | 1 | ||
اندازه ذرات و توزیع آن | ||||
بار سطحی | ||||
اعتبارسنجی بیان mRNA | ارزیابی سلول 293T | قرار دادن سلول | 4 | |
ترانسفکسیون موقت سلول ها | ||||
مشاهده سیگنال فلوئورسانس | 1-3 | |||
بلوت غربی (WB) / آزمایش انzyme-لینکد immunosorbent (ELISA) |
پوشش 5' |
▪ بدون پوشش ▪ Cap0، همپوشش ▪ کپ1، با کپ مشترک ▪ کپ1، کپگذاری انزیمی |
نواحی 5' UTR/3' UTR |
▪ دنبالهٔ طبیعی UTR ▪ دنبالهٔ مутانس/طراحیشده UTR |
دنبالهٔ PolyA 3' |
▪ دنبالهٔ 100A تا 120A (توصیهشده) ▪ دنبالهٔ پلی A قطعهای ▪ دنبالههای سفارشی دیگر |
核苷 اصلاحشده |
▪ پایههای بدون تغییر ▪ پسدوئوریدین (Ψ) ▪ ن-1 متیلپسدوئوریدین (N1Ψ) ▪ سیتوزین 5-متیل (m5C) ▪ اوریدین 5-متیل (m5U) ▪ اوریدین 5-متاکسی (5moU) ▪ اوریدین 2-تیو (s2U) ▪ 2′-O-متیل-U ▪ تغییرات دیگر |
جریان خدمات مجتمع
سرویسهای مختلفی از طراحی دنباله جلوگیری تا آمادهسازی mRNA در مرحله پشتیبان، کنترل کیفیت و اعتبارسنجی بیان را فراهم میکند.
طراحی و بهینهسازی دنباله سطح بینالمللی
طراحی و بهینهسازی حرفهای دنباله mRNA، بیان کارآمد mRNA را تسهیل میکند.
اصلاحات گوناگون نوکلئوتیدی
بیان mRNA را به طور مؤثر افزایش میدهد و واکنشهای ایمنی منفی mRNA را کاهش میدهد.
پلتفرم تصفیه شده
با ترکیب روشهای معمولی و طراحی خودکار، نمونههای mRNA با کیفیت بالا به دست میآید.
پلتفرم کنترل کیفیت کامل
گزینههای کنترل کیفیت گستردهای را ارائه میدهد تا نیازهای تستهای روزمره، مانند غلظت، صافی A260/280 و سالمی، و همچنین نیازهای کنترل کیفیت بالا، مانند کارایی قابگذاری/توزیع polyA را برآورده کند.
تحویل سریع
MRNA سفارشی میتواند در حداقل 7 روز، به استثنای سنتز دنباله سفارشی، تحویل داده شود.