Alle Kategorieë
ENEN

In vitro Transkripsie Protokol

Haai daar. Het jy ooit wonder hoe wetenskappers 'n RNA kan kloon? RNA is hierdie spesiale molekul wat ons in onse selles vind wat 'n hoop dinge doen om proteïene te maak, en die proteïene is daar sodat ons liggaam al die regte dinge kan doen. In hierdie aflevering sal ons 'n deurloop van die baie meer interessante protokol doen wat navorsers gebruik: In vitro transkripsie. En alles wat dit beteken is dat wetenskappers RNA neem en baie daarvan in 'n proefbuis maak (wat een van dié klein potdinge is wat laboratoriums gebruik) so laat ons begin met elke stap hier.

Nádat ek my vorige pos voltooi het, besef ek dat dié laaste een moontlik 'n bietjie droog was - kom by die plezier in die natlab-plekke; so, terwyl ons nou vorm hou en jy regtig op die plezier (sic RNA-maak) trein is: Watter reagensies en sal jy vir jou EF nodig hê?? Om dit te bereik, sal ons spesiale proteïene genoemd ensiemeërs benodig, dieselfde as Yaohai se produk Herwinde Midkine Vervaardiging . Dit kataliseer die chemiese reaksies, hierdie ensieme help in die ontbinding. So nou moet ons net ons stukkie DNA hê. Hierdie funksie is die DNA wat ons as sjabloon gebruik om vir ons RNA te kopieer. Aanvullende regulatoriese volgorde in RNA, naamlik nukleotiede, word ook benodig. Hierdie nukleotiede is soos klein bouklere wat samengevoeg moet word om die RNA te maak. Ons gebruik ook kort buise van klein deursnee om die smaakontspanning in ander ooreen te voer. Laastens het ons 'n masjien (n thermocycler) nodig wat verseker dat ons reaksies by die regte temperatuur is. Daarnaast kan ons dalk 'n paar gereedskap en produkte vir sekere eksperimente benodig.

Maksimalisering van Opbrengs en Reinheid in In Vitro Transkripsieprosedures

So hier skei die dinge uit, ons het een RNA-streng en nou wil ons meer kopieë daarvan hê, ook die Konjugeerde VLP-vaksienvervaardiging ontwikkel deur Yaohai. Die manier om dit te bereik is om 'n ander enzym te gebruik; T7 RNA polimerase. Hierdie unieke enzym herken byvoorbeeld spesifieke areas binne die RNA. 'n Sprongpunt vir die vervaardiging van baie meer kopieë van RNA in die voortsetting. Op hierdie punt sal meer by die RNA-streng gevoeg word deur die T7 RNA polimerase totdat 'n massa transkripte geskep is, of tot ons dit sê om te stop.

Nadat ons die RNA sover moontlik geïsoleer het, rolg verder af om te sien hoe om dit te reinig en te stoor vir toekomstige gebruik. Rhoades: Sommige van daardie metodes is 'n bietjie meer ekstrem in terme van RNA-isolering — jy sou dit nie altyd gebruik nie, maar soms word dit vir sekere tipes eksperimente benodig. Sodra ons RNA vry is van enige verontreinigings, kan dit bevroren gestoor word. Op hierdie manier is dit veilig en ons kan dit later in verskeie eksperimente gebruik.

Why choose Yaohai In vitro Transkripsie Protokol?

Verwante produk-kategorieë

Kan jy nie kry wat jy soek nie?
Kontak ons konsepteurs vir meer beskikbare produkte.

Verlang nou na 'n offerte