Plasmid DNA, sebagai in vitro templat transkripsi (IVT), merupakan bahan baku penting untuk produksi mRNA. Hasil tinggi, kebersihan tinggi, dan pemulihan tinggi plasmid DNA adalah yang utama tujuan selama pengembangan proses plasmid.
Yaohai Bio-Pharma menyediakan solusi satu atap untuk pengembangan plasmid, termasuk proses hulu (fermentasi), proses hilir (pemurnian) pengembangan, karakterisasi proses, dan validasi proses. Kami memiliki pengalaman luas dalam meningkatkan hasil plasmid dan memisahkannya dari matriks yang kompleks dengan mengembangkan dan mengoptimalkan proses fermentasi, pemurnian, dan penghilangan kontaminan.
Proses biologi dasar untuk manufaktur plasmid mencakup: Escherichia coli (E. coli) fermentasi, panen sel dan lisisme alkaline, klarifikasi, konsentrasi, proses kromatografi tiga langkah (penangkapan, pemurnian menengah, dan penyempurnaan), dan konsentrasi.
Detail Layanan | Operasi Unit | Parameter |
E. coli fermentasi |
Shake Flask | Komposisi media, antibiotik, volume inoculum, suhu pertumbuhan, dan lain-lain. |
Fermentor (7 L) |
Antibiotik, volume inoculum, suhu pertumbuhan, pH, oksigen terlarut (DO), mode pemberian makan (misalnya, fed-batch), media pemberian makan, waktu fermentasi, dan lain-lain. |
|
Pemanenan sel | Mikrofiltrasi | Standar E. coli proses pemanenan |
Lisis sel | Resuspendisi sel, lisis alkaline, neutralisasi | Rasio alkali, waktu lisis |
Pengklarifikasi | Penyaringan | Filtrasi kasar, 20 µm dan rangkaian filter 5 µm (disukai) |
Konsentrasi | Ultrafiltrasi, filtrasi aliran tangensial | Ukuran pori (atau NMWC), Tekanan Membran Trans (TMP), Flux, rasio volume filtrat ke luas membran |
Kromatografi tiga langkah | Kromatografi eksklusi ukuran (SEC), atau kromatografi filtrasi gel (GFC) | Panjang dan diameter kolom, komposisi buffer, volume injeksi, komposisi fase mobile (adsorpsi dan desorpsi), pH, laju alir, kondisi penyeimbangan, pengikatan, pencucian, dan elusi. |
Kromatografi afinitas (AF) | ||
Kromatografi pertukaran anion (AEX) | ||
Konsentrasi | Ultrafiltrasi, filtrasi aliran tangensial | Ukuran pori (atau NMWC), Tekanan Membran Trans (TMP), Flux, rasio volume filtrat ke luas membran |
Lebih banyak Solusi Proses Pemurnian Biologis |