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Protocole de transcription in vitro

Salut. T’as déjà wondered comment les scientifiques peuvent cloner un ARN ? L'ARN est cette molécule spéciale que l'on trouve dans nos cellules qui fait plein de trucs pour fabriquer des protéines, et les protéines sont là pour que notre corps puisse faire tout ce qu'il faut. Dans cet épisode, nous allons faire un tour d’un protocole bien plus curieux utilisé par les chercheurs : la transcription in vitro. Et tout ce que cela signifie, c'est que les scientifiques prennent de l'ARN et en font beaucoup dans un tube à essai (ce petit récipient que les laboratoires utilisent) alors passons à chaque étape ici.

Après avoir terminé mon dernier article, je me suis rendu compte que le précédent pourrait avoir été un peu aride - rejoignez donc maintenant les moments amusants en laboratoire humide ; donc, maintenant que vous êtes bien installés dans le train du fun (sic fabrication d'ARN) : Quels réactifs et autres aurez-vous besoin pour votre EF ?? Pour y arriver, nous aurons besoin de protéines spéciales appelées enzymes, identiques au produit de Yaohai Fabrication de Midkine recombinant il catalyse les réactions chimiques, ces enzymes aident au décomposition. Maintenant, nous avons juste besoin de notre fragment d'ADN. Cette fonction est l'ADN que nous utilisons comme modèle pour copier notre ARN. Des séquences régulatrices supplémentaires dans l'ARN, à savoir des nucléotides, sont également nécessaires. Ces nucléotides sont comme de petits éléments de construction qui doivent être assemblés pour fabriquer l'ARN. Nous utilisons également de petits tubes de petit diamètre pour intégrer l'évaluation du goût dans un autre processus. Enfin, nous avons besoin d'une machine (un thermocycleur) qui s'assure que nos réactions se déroulent à la bonne température. De plus, nous pourrions avoir besoin de quelques outils et produits pour certaines expériences.

Maximiser le rendement et la pureté dans les procédures de transcription in vitro

C'est ici que les choses divergent, nous avons un brin d'ARN et maintenant nous aimerions en avoir plus de copies, également le Fabrication de vaccins VLP conjugués développé par Yaohai. La manière d'y parvenir est d'utiliser une autre enzyme ; la T7 RNA polymérase. Cette enzyme unique, par exemple, reconnaît des zones spécifiques dans l'ARN. Un cône de saut pour produire beaucoup plus de copies d'ARN dans la suite. À ce stade, plus de fragments seront ajoutés au brin d'ARN par la T7 RNA polymérase jusqu'à ce qu'un grand nombre de transcriptions soit créé, ou jusqu'à ce que nous lui disions d'arrêter.

Après avoir isolé l'ARN autant que possible, faites défiler encore un peu pour voir comment le nettoyer et le stocker pour un usage futur. Rhoades : Certains de ces méthodes sont un peu plus extrêmes en termes d'isolement de l'ARN — vous ne les utiliserez pas toujours, mais parfois pour certains types d'expériences, c'est nécessaire. Une fois que notre ARN est débarrassé de tout contaminant, il peut être conservé au congélateur. De cette manière, c'est sécurisé et nous pouvons ensuite l'utiliser dans diverses expériences.

Why choose Yaohai Protocole de transcription in vitro?

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