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Protocole de transcription in vitro

Bonjour. Vous êtes-vous déjà demandé comment les scientifiques peuvent cloner un ARN ? L'ARN est cette molécule spéciale que nous trouvons dans nos cellules et qui fait un tas de choses pour fabriquer des protéines, et les protéines sont là pour que notre corps puisse faire tout ce qu'il faut. Dans cet épisode, nous allons faire un tour d'horizon du protocole beaucoup plus curieux utilisé par les chercheurs : la transcription in vitro. Et tout ce que cela signifie, c'est que les scientifiques prennent de l'ARN et en fabriquent beaucoup dans un tube à essai (qui est ce petit bocal que les laboratoires utilisent), alors passons à chaque étape ici. 

Après avoir terminé mon article précédent, je me suis rendu compte que le dernier était peut-être un peu sec, comme les articles « venez vous amuser dans le laboratoire humide » ; donc, pour rester dans le ton maintenant que vous êtes bel et bien dans le train du plaisir (sic de la fabrication d'ARN) : de quels réactifs et autres aurez-vous besoin pour votre EF ? Pour y parvenir, nous aurons besoin de protéines spéciales appelées enzymes, identiques au produit de Yaohai Fabrication de Midkine recombinante. Il catalyse les réactions chimiques, ces enzymes aident à la décomposition. Il ne nous reste donc plus qu'à utiliser notre morceau d'ADN. Cette fonction est l'ADN que nous utilisons comme modèle pour copier notre ARN. Des séquences régulatrices supplémentaires dans l'ARN, à savoir les nucléotides, sont également nécessaires. Ces nucléotides sont comme de minuscules blocs de construction qui doivent être assemblés pour fabriquer l'ARN. Nous utilisons également des tubes courts de petit diamètre pour pétrir l'évaluation du goût dans d'autres. Enfin, nous avons besoin d'une machine (un thermocycleur) qui s'assure que nos réactions se déroulent à la bonne température. De plus, nous pourrions avoir besoin de quelques outils et produits pour certaines expériences.

Maximiser le rendement et la pureté des procédures de transcription in vitro

Donc ici les choses divergent, nous avons un brin d'ARN et maintenant nous aimerions en avoir plus de copies, aussi le Fabrication de vaccins conjugués VLP développé par Yaohai. Le moyen d'y parvenir consiste à utiliser une autre enzyme, l'ARN polymérase T7. Cette enzyme unique, par exemple, reconnaît des zones spécifiques au sein de l'ARN. un cône sauteur pour faire beaucoup plus de copies d'ARN au cours de la procédure. À ce stade, davantage de copies seront ajoutées au brin d'ARN par l'ARN polymérase T7 jusqu'à ce qu'une masse de transcription ait été créée, ou jusqu'à ce que nous lui disions d'arrêter. 

Après avoir isolé l'ARN autant que possible, faites défiler la page pour voir comment nettoyer et stocker l'ARN pour une utilisation ultérieure. Rhoades : Certaines de ces méthodes sont un peu plus extrêmes en termes d'isolement de l'ARN. Vous ne l'utiliserez pas toujours, mais parfois, pour certains types d'expériences, c'est nécessaire. Une fois que notre ARN est débarrassé de tout contaminant, il peut être stocké congelé. De cette façon, il est sécurisé et nous pouvons ensuite l'utiliser plus tard dans les différentes expériences.

Pourquoi choisir le protocole de transcription in vitro Yaohai ?

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