mRNA Plazmidiniai šablonai: pagrindiniai elementai ir dizaino strategijos

Kuriant mRNA vakcinoms arba terapijoms, pradžia yra gerai sukurta plazmidų šablonas. Štai trumpas vadovas pagal svarbiausius elementus ir kaip jie yra optimizuoti sėkmės dėlei.

Promotorius: Kur prasideda transkripcija

T7 promotorius yra populiariausias pasirinkimas pradedant mRNA sintezę. Jo klasikinė seka, „TAATACGACTCACTATAGGG“, užtikrina efektyvą transkripciją. Laikui bėgant mokslininkai sukūrė kitoprielaidiškus variantus, tokius kaip GG, AG ir AT/AU šablonus, kurie tinka sudėtingesniems sistemoms, pvz., CleanCap arba automatiniam RNA platformoms.

Linearizavimas: Tiksli plazmidų pjautimas

Norint sustabdyti plazmido begalinę transkripciją, jis turi būti išpjautas tam tikru vienu. Type IIS enzymai, tokie kaip BspQⅠ arba BsaⅠ, yra puikiai tinka šiam darbui. Jie išpjaučia DNA už savo atpažinimo sekos ribų, nepalikdami jokių papildomų dalies ir išlaikydami svarbų polyA halią.

MRNA planas: Sėkmės statinių elementų

MRNA seka apima 5’ kapą, nevertinamus regionus (UTRs), koduojantį seką (CDS) ir polyA uodega. Štai kaip kiekviena dalis yra sukonstruota:

• UTRs : Jie gali būti paimti iš galingai išreikštytų natūralių genų (pvz., iš virusų) arba sukurti naudojant pažangias algoritmus geriausiam veikimui.
• CDS : Mokslininkai pirmaisiais žingsniais sukuria baltymo seką, o vėliau optimizuoja DNA kodą efektyvesniam išraiškymui.
• PolyA Uodega : 100–120 adeninų ilgis, arba segmentuota versija, pvz., 30A + Su jungikliu + 70A, užtikrina, kad mRNA liktų stabilioji ir funkcionalioji.

Išmokę šiuos elementus, tyrėjai gali sukurti galingas mRNA šablonus nuo vakcinų iki pažangių terapijų. Medicinos ateitis prasideda čia!

Yaohai Bio-Pharma yra platformos įmonė, specializuojanti save mikroorganizmų išreikšties sistemoms teikiamaisiais paslaugomis. Remiantis dešimtmečio patirtimi, Yaohai sukūrė visapusišką GMP atitinkančių technologijų rinkinį linijinių ir apvalinių mRNA sintezės, siūlantis aukštos kokybės RNA produktus, kuriuose apimami sekcijų dizainas ir optimizavimas, geno sintezė, in vitro transkripcija (IVT), apvalinimas, RNA purifikavimas ir LNP inkapsuliacija.

Be to, aktyviai ieškome globalių institucinių ar asmeninių partnerių. Siūlome geresnį nei konkurentai atlyginimą. Jei turite bet kokios problemos, prašome ją kuo greičiau su mumis spręsti: [email protected]