Dalam biologi molekuler dan bioteknologi, enhanced green fluorescent protein (eGFP) telah muncul sebagai gen pelapor penting karena kemampuannya menghasilkan fluoresensi hijau terang pada 509 nm. Protein ini, yang awalnya diisolasi dari ubur-ubur Aequorea victoria, merupakan penanda deteksi langsung dalam kultur sel mamalia, yang memfasilitasi pemantauan dan pengoptimalan efisiensi transfeksi. Namun, muncul pertanyaan: berapa dosis optimal RNA pelapor eGFP untuk mencapai tingkat ekspresi yang diinginkan?

Penelitian telah menunjukkan bahwa efektivitas RNA reporter eGFP sangat bergantung pada dosisnya, khususnya dalam konteks sistem RNA sirkuler (circRNA) dan mRNA yang mengamplifikasi sendiri (saRNA). Penelitian yang dilakukan oleh tim Katrien Remaut di Kelompok Penelitian Nanomedicine Universitas Ghent telah menyoroti hubungan rumit antara dosis saRNA dan efisiensi translasinya dalam sel retina. Mereka menemukan bahwa dosis saRNA yang rendah, di bawah ambang batas untuk aktivasi imun bawaan, memfasilitasi ekspresi protein yang efisien. Hal ini menggarisbawahi pentingnya kontrol dosis yang tepat dalam memanfaatkan potensi penuh RNA reporter eGFP.

Dalam aplikasi praktis, konsentrasi mRNA eGFP yang umum digunakan dapat berkisar dari mikrogram (μg) hingga nanogram per mikroliter (ng/μL). Misalnya, dalam percobaan transfeksi, dosis yang berkisar dari 0.05 μg hingga 0.5 μg mRNA eGFP telah terbukti menghasilkan tingkat ekspresi yang signifikan dalam berbagai jenis sel, dengan persentase sel positif mencapai setinggi 99-100% dalam kasus tertentu. Khususnya, pada dosis di bawah 0.1 μg, saRNA menunjukkan tingkat ekspresi yang lebih unggul dibandingkan dengan mRNA linier, yang menunjukkan keunggulannya dalam memperkuat diri.

Keserbagunaan RNA reporter eGFP tidak hanya terletak pada fluoresensinya yang terang dan stabil, tetapi juga pada kemampuan adaptasinya terhadap berbagai pengaturan eksperimen. Para peneliti dapat menyesuaikan dosis agar sesuai dengan kebutuhan spesifik mereka, memastikan kontrol yang tepat atas tingkat ekspresi gen. Fitur ini menjadikan eGFP sebagai alat yang sangat berharga untuk mempelajari fungsi gen, memantau nasib sel, dan mengoptimalkan protokol transfeksi.

Kesimpulannya, dosis optimal RNA reporter eGFP sangat bergantung pada konteks eksperimen dan hasil yang diinginkan. Dengan memilih dosis yang tepat secara cermat, para peneliti dapat memanfaatkan potensi penuh gen reporter serbaguna ini, memajukan pemahaman kita tentang mekanisme molekuler dan mendorong inovasi dalam bioteknologi.

Yaohai Bio-Pharma adalah perusahaan biologi pertama dan terbesar yang didedikasikan untuk sistem ekspresi mikroba CRDMO di Tiongkok Raya. Kami berkomitmen untuk memenuhi kebutuhan klinis dan komersial pelanggan global kami akan obat-obatan biologis, vaksin, dan diagnostik untuk penggunaan manusia dan hewan.

Kami juga secara aktif mencari mitra global institusional atau individu. Kami menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri. Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami: Alamat: [email protected]