Hei täällä. Oletko koskaan ihmetellyt, kuinka tiedemiehet pystyvät kloonaamaan RNA:n? RNA on se erityinen molekyyli, jonka löydämme soluistamme ja joka tekee joukon asioita proteiinien tuottamiseksi, ja proteiinit ovat olemassa, jotta kehamme voi tehdä kaikki oikeat asiat. Tässä osassa käymme läpi paljon mielenkiintoisempaa protokollaa, jota tutkijat käyttävät: in vitro-transkriptio. Ja kaikki tarkoittaa sitä, että tiedemiehet tekevät RNAa paljon testituulissa (joka on se pieni pullomainen asia, jonka laboratoriot käyttävät), joten aloitetaan jokainen vaihe tästä.
Kun olin valmis edellisestä viestistäni, huomasin, että viimeinen saattanut olla hieman kuiva - tule mukaan juhliin kymmenen kostea laboratorio-artikkelia; joten, noudattaaksemme mallia, nyt kun olet todella menossa mielenkiintoisen (siis RNA-tekemisen) junalla: Mitä reagenssejä ja mitä tarvitset EF:esi varten?? Saavuttääksemme tämän, meidän täytyy käyttää erityisiä proteiineja nimeltään enzyymejä, jotka ovat samanlaisia kuin Yaohain tuote Uudelleenrakennettu Midkine-valmistus . Se katalysoi kemiallisia reaktioita, nämä enzyymit auttavat hajottamisessa. Tarvitsemme nyt siis vain hieman DNA:ta. Tämä funktio on DNA, jonka käytämme mallina kopioinnissa RNA:ta varten. Lisätietoja ohjaavia jonoja RNA:ssa, nimittäin nukleotideja, tarvitaan myös. Nämä nukleotidit ovat kuin pieniä rakennuspalikoita, jotka täytyy koota yhteen saadakseen RNA. Käytämme myös lyhyitä putkia pienten halkaisijoiden kanssa sekoittaaksemme maistotestauksen toisiin. Lopuksi tarvitsemme laite (termodykli) joka varmistaa että reaktiot ovat oikeassa lämpötilassa. Saattaa myös olla tarpeellista joitakin työkaluja ja tuotteita tiettyihin kokeisiin.
Tässä asiat hajontautuvat, meillä on yksi RNA-ketju ja nyt haluamme enemmän kopioiden siitä, myös Yhdistelmä-VLP-rokotteiden valmistus kehittänyt Yaohai. Tapa saavuttaa tämän on käyttää toista enzymia; T7 RNA-polymeraasi. Tämä ainutlaatuinen enzyme esimerkiksi tunnistaa tiettyjä alueita RNA:ssa. hyppelykonetta varten tehdä monta enemmän RNA-kopioita jatkossa. Tähän asti lisätään enemmän RNA-ketjuun T7 RNA-polymeraasin avulla, kunnes suuri määrä transcriptteja on luotu tai kunnes sanomme sen lopettamaan.
Kun olemme eristäneet RNA:n mahdollisimman pitkälle, katso alaspäin, miten siivoaa ja tallentaa RNA tulevaa käyttöä varten. Rhoades: Jotkut näistä menetelmistä ovat hieman äärimmäisempiä RNA:n eristämisen osalta — et käytä niitä aina, mutta joskus tietyissä kokeissa se on tarpeen. Kun RNA on vapaana kaikista saasteista, sen voi tallentaa jäässä. Tällä tavoin se on turvassa, ja sitä voidaan käyttää myöhemmin erilaisissa kokeissa.
Lähtömateriaalin laatu: varmista, että DNA-mallisi on puhasta eikä kokonaan rikkiä. Voit myös täydentää uusilla rekonstituoituilla nukleotideilla ja uudelleenjäätetyillä enzyymeillä maksimoivan todennäköisyyden onnistuneeseen koeasetukseen.
Olosuhteiden tarkkuustasojen säätäminen Kaikki enzymit ja niiden nukleotidit toimivat paremmin tietyllä lämpötilalla ja pH:ssa kehon sisällä sekä Yaohain. Punainen fluoresoivi mRNA . Nyt säädä hiukan yksityiskohtia olosuhteiden välillä, kunnes löydät avaimen ainutlaatuiselle asetuksellesi.
Käänteinen transkriptasa on erityinen enzyme, koska se tekee DNA-kopion RNA-molekyylistä. Käytimme sekä DNAsia että DNA-temppua (cDNA:a) syötteenä in vitro -transkriptiomenetelmäämme RNA:n tuottamiseksi. Kuitenkin useimmissa kokeissa tiedemiehet haluaisivat transkriboida DNA:ta RNA:ksi. Käänteinen transkriptio saa nimensä tästä prosessista. mRNA poly-A jakauman testaus mitä kehitti Yaohai. Se on äärimmäisen arvokas työkalu tieteessä - RNA-molekyylien tutkimisesta soluissa komplementtisten DNA-solken tuottamiseen lisäkokeille.
Todellisissa kokeissa, joissa RNA on yksi yleisimmistä molekyylitööreistä, mukaan lukien Yaohain tuote. VLP-rokoteiden tuotto E. coli -bakteereissa . Määrälliset analyysit: Nämä testit voivat paljastaa määrän mitkä tahansa tiettyjen molekyylien ovat läsnä otoksessa. Esimerkiksi, tiedemiehet voivat syntyttää in vitro transkripttilaitoksen RNA-kopioista, jotka on johdettu kohdegeenistä solussa. Diagnostiikka voi sitten analysoida näitä kopioita; jos etsitään RNA:ta, diagnostiikka voi suorittaa polymeraasiketjureaktion (PCR) näiden koppioiden lisäämiseksi otoksessa. Tämä mahdollistaa tiede miehille nähdä, miten geenit ilmaantuvat solissa, ja antaa jopa johtaa joitain erittäin korkean läpimeno-opeeraatioiden analyysit, kuten bakteerien tai virusten infektioiden läsnäolo, sekä diagnosoida perimäisäireytyksiä.
in vitro Transcript Protocol on johtava mikrobialisten biologien CDMO. Keskeinen huomioimme on ollut mikrobien tuottamien rokotteiden ja hoidon kehittämisessä, jotka sopivat ihmisten, eläinten sekä kotieläinten terveydenhallintaan. Meillä on edelläkävimmät tutkimus- ja kehitysplatformit sekä valmistusteknologia, jotka kattavat koko prosessin alusta loppuun: mikrobien käyttöön soveltuvien pankkien kehittämisen, menetelmien ja prosessien kehittämisen sekä klinikoiden ja kaupallisten tuotantojen varmistamisen, mikä takaa innovatiivisten ratkaisujen onnistuneen toimituksen. Ajan myötä olemme saaneet runsaasti tietoa mikrobipohjaisesta bioprosessoinnista. Yli 200 projektia on onnistuneesti suoritettu, ja autamme asiakkaitamme noudattamaan sääntöjä, kuten US FDA:n ja EU EMA:n säännöksiä. Me autamme heitä myös löytämään tie TGA:lle (Australia) ja NMPA:lle (Kiina). Ammattitaitomme ja laaja kokemuksemme mahdollistavat nopean reagointikyvymme markkinoiden tarpeisiin ja antavat tilinpäätöspalveluita mukautetuille CDMO-palveluille.
Yaohai Bio-Pharmailla on kokemusta biologisten aineiden tuotannossa, jotka on luotu in vitro -transkriptio-protokollasta. Tarjoamme mukautettuja tutkimus- ja kehitys-, sekä valmistustehoja samalla, kun varmistamme, ettei ole riskejä. Olemme olleet mukana monipuolisissa toimintatavoissa, kuten alijakso-rokotteiden rekombinoimisessa, peptidihoormaaleissa, sytokiineissa, kasvutekijöissä, yksiosaisissa抗体ienzymeissä, plasmid DNA:ssa MRNA:ssa ja monessa muussa. Olemme asiantuntijoita monissa mikrobieneissä, mukaan lukien jeksi extracellular ja intracellular -sekretoinnissa (tuottoja jopa 15g/L) sekä bakteereihin liittyvässä intracellular -ratkaisussa ja inklusiokroppa (tuottoja korkeintaan 10g/L). Olemme myös kehittäneet BSL-2 fermentaatioplatformin bakteerirokotteiden tuottamiseksi. Keskitämme huomiomme prosessien parantamiseen, tuotteen tuoton lisäämiseen ja tuotantokustannusten vähentämiseen. Vahvan teknologisteeman avulla voimme varmistaa nopean ja luotettavan projektin toimituksen, mikä tuo tuotteesi markkinoille nopeammin.
Yaohai Bio-Pharma, yksi 10 suurimmasta biotuotteiden valmistajista, erikoistuu mikrobilasteprocessoihin. Olemme rakennetut moderneja asioita vahvalla tutkimus- ja kehitysohjelmalla sekä edistyksellisillä laitteilla. Meillä on viisi ainesaineen valmistusriviä, jotka täyttävät GMP-vaatimukset mikrobilasteyksikön ja puhdistuksen osalta. Meillä on myös kaksi automaattista täytöntuotantolinjaa kartidgeille, pulleille ja etukäteen täytetyille hypodermiaheille. Käytettävissä olevien lastejärjestelmien mittakaavat vaihtelevat in vitro Transcript Protocol -protokollasta 2000L:ään. Pulven täytön määrittelyt vaihtelevat 1ml:stä 25ml:een. Etukäteen täytettyjen hypodermiaheittimien tai kartidgeiden täytön määrittelyt ovat noin 1–3ml. cGMP-yhteensopiva tuotantolaitoksemme varmistaa klinikoiden näyteaineiden ja kaupallisten tuotteiden jatkuvan toimituksen. Laitoksessamme tuotetaan isoja molekyylejä, jotka lähetetään maailmanlaajuisesti.
Yaohai BioPharma on Top 10 mikrobiologinen CDMO, joka sisältää in vitro Transkripttioprotokollan sekä sääntelyasioiden hallinnan. Meillä on laadunhallintajärjestelmä, joka täyttää nykyiset GMP-standardit sekä kansainväliset säännökset. Sääntelyasiantuntijoidemme tiimi on taitava kansainvientisten sääntelykehysten käyttämisessä biologisten tuotteiden käyttöönottomista nopeuttamiseksi. Varmistamme jäljitykselliset tuotantoprosessit, laadukkaat tuotteet sekä noudattamme Yhdysvaltain FDA:n ja Euroopan unionin EMA:n sääntöjä. Australia TGA ja Kiinan NMPA ovat myös tyytyväisiä. Yaohai BioPharma onnistui EU:n kelpoisuuspäällikkön (QP) paikalliskatsauksessa GMP-laadunhallintajärjestelmämme sekä tuotantolaitoksemme osalta. Lisäksi olemme saaneet ensimmäiset vahvistusaudit ISO9001 Laadunhallintajärjestelmästä, ISO14001 Ympäristöhallintajärjestelmästä ja ISO45001 Työterveys- ja -turvallisuushallintajärjestelmästä.