Zirkuläres RNA, oder circRNA, ist eine spezifische Art von RNA, die eine andere Form hat. Während normale RNA eine lineare, geradlinige Erscheinung aufweist, ist circRNA geschlungen. Die Struktur der CircRNAs ist entscheidend, da sie oft in großer Menge vorhanden sind und in vielen wichtigen zellulären Prozessen beteiligt sind. Sie regulieren unter anderem, wie unsere Gene exprimiert werden, was alles von den Wachstumsmustern unseres Körpers bis hin zu unserer Reaktion auf Krankheiten beeinflussen kann. CircRNAs wecken großes Interesse bei Wissenschaftlern; ein besseres Verständnis von ihnen kann Aufschlüsse über die Entstehung von Krankheiten geben und innovative therapeutische Ansätze identifizieren. Es gibt jedoch ein Problem: CircRNAs sind sehr klein und neigen dazu, in sehr geringen Mengen in den von Wissenschaftlern untersuchten Proben vorhanden zu sein. Dies macht es schwierig, genügend circRNA für Forschungszwecke zu gewinnen.
Bevor die endgültige Grundlage geschaffen wurde, um circRNA zu sammeln, wurde eine etablierte Methode namens Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, kurz HPLC, eingesetzt. HPLC ist eine vielseitige Technik, die zur Trennung verschiedener Moleküle nach ihren physikalischen und chemischen Eigenschaften verwendet wird. Sie funktioniert dadurch, dass sie Moleküle aufgrund ihrer Größe und Form trennt. Da circRNAs sehr klein sind, können sie leicht unter den tausenden anderen Molekülen in einem Probe verloren gehen. Das bedeutet, circRNAs können von anderen RNAs, Proteinen und fremden Verunreinigungen, die eventuell in der Probe enthalten sind, durch effektive Methoden wie Größenexklusionschromatographie (SEC), einer HPLC-Methode, getrennt werden. Es ist eine wichtige Trennung für Wissenschaftler, die circRNA für ihre Forschung isolieren müssen.
Sobald HPLC bei der Reinigung von circRNA hilft, muss sie gründlich von Wissenschaftlern analysiert werden, um ihre Funktionen in uns zu verstehen. CircRNAs sind als wichtige Moleküle aufgetreten, die an verschiedenen biologischen Funktionen beteiligt sind, was ein tiefgehendes Verständnis der verschiedenen circRNA-Typen und -Rollen für die Entschlüsselung ihrer Beteiligung an diversen Krankheiten kritisch macht. Wissenschaftler kennen die Sequenz der gereinigten circRNA nicht und müssen es herausfinden, um die Funktionen dieser Rollen zu entdecken. Dazu nutzen sie Techniken wie die Umkehrtranskription PCR (RT-PCR). Mit RT-PCR erstellen Wissenschaftler weitere Kopien der circRNA, damit sie sie spezifischer untersuchen können. Sie sind oft aufschlussreich und liefern Informationen darüber, wie diese Moleküle funktionieren und was sie in unseren Zellen tun, indem sie die circRNA-Sequenzen analysieren.
Forscher müssen alle circRNA-Moleküle sammeln, an die sie herankommen können. CircRNAs sind nur in kleinen Mengen in biologischen Proben verfügbar, und HPLC kann hilfreich sein, um eine größere Menge dieser entscheidenden Moleküle zu trennen und zu sammeln. Somit haben Forscher eine größere Wahrscheinlichkeit, genügend circRNA für ihre Experimente zu erhalten und handfeste Ergebnisse zu erzielen. Je mehr circRNA sie sammeln können, desto mehr Funktionen und Rollen können sie im Gesundheits- und Krankheitszustand verstehen.
Methoden zur circRNA-Extraktion aus komplexen biologischen Materialien sind oft kostenintensiv (z. B. Ultrafiltration), zeitaufwändig und anfällig für Kontaminationen. Die Gewinnung der circRNA ohne Verlust erfordert oft sorgfältige Handhabung und mehrere Schritte. Hier kommt HPLC besonders zum Einsatz. HPLC-Methoden können die Extraktion zu einem schnelleren und effektiveren Prozess machen. Durch die Reduktion der Schritte bei der Extraktion minimiert HPLC auch den potenziellen Verlust wertvoller Proben. Diese sorgfältige Methode liefert zuverlässigere Daten und hilft sicherzustellen, dass die isolierte circRNA so rein wie möglich ist.
CircRNAs sind sehr schwer zu untersuchen, und es hängt von der Präzision der Wissenschaftler bei ihrer Identifizierung und Messung ab. Aufgrund dieses Faktors ist HPLC nicht nur ein entscheidender Schritt zur Entfernung anderer Verunreinigungen, sondern garantiert auch, dass nur circRNA-Moleküle isoliert werden können, was die Spezifität und Empfindlichkeit der circRNA-Detektion verbessert. Dadurch entsteht ein saubereres Probe, was für die Forschungspräzision wichtig ist. Ein gereinigtes circRNA-Probe hilft Wissenschaftlern, mehr Vertrauen in ihre Ergebnisse zu haben und weniger Gefahr zu laufen, Fehler in ihren Studien zu machen.
Yaohai Bio-Pharma ist eines der führenden Unternehmen im Bereich Biotechnologie, das sich auf die HPLC-basierte circRNA-Reinigung spezialisiert hat. Wir haben eine moderne Produktionsanlage mit starken Forschungs- und Entwicklungsleistungen sowie modernen Produktionsstätten errichtet. Fünf Wirkstoffproduktionslinien gemäß GMP-Standards für mikrobielle Fermentation und Reinigung sowie zwei Abfüll- und Endabnahmelinien für Ampullen, Kartuschen und vorbeladene Nadeln stehen zur Verfügung. Die verfügbaren Fermentationskapazitäten liegen zwischen 100 Liter und 2000 Liter. Das Füllvolumen reicht von 1 ml bis zu 25 ml. Vorbeladene Spritzen oder Kartuschen werden mit 3 bis 3,5 ml gefüllt. Unser cGMP-konformes Produktionswerk gewährleistet einen kontinuierlichen Versorgungsstrom an klinischen Proben und kommerziellen Produkten. Unsere Anlagen produzieren große Moleküle, die weltweit exportiert werden.
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