Bugün Yaohai, uzun RNA için in vitro transkript protokolünü paylaşmaktan dolayı heyecanlı. Bu, bilim adamları laboratuarda RNA üretmek için sıkça kullandıkları etkili bir strateji. Böylece araştırmacılar biyolojik alanlardaki çalışmalar için hayati olan önemli miktarda uzun RNA üretebilirler. Burada, uzun RNAların in vitro transkripsiyon yoluyla hazırlanmasına ilişkin adım adım bir kılavuz sunuyoruz. Ayrıca, süreç nasıl daha iyi hale getirilebilir ve uzun RNA sentezi sırasında karşılaştığınız bazı sorunlara çözüm önerileri de tartışacağız.
In vitro transkripsiyon için özellikle uzun RNA için birkaç temel bileşen gereklidir. RNA polimeraz adında bir enzim, nükleotid trifosfatlar (NTP'ler) şeklinde yazma malzemesi, reaksiyonu desteklemek için bir tampon ve biraz DNA şablonu sağlamalısınız. Adım adım nasıl yapılacağına dair detaylı bir kılavuz burada bulabilirsiniz:
RNA sentezinin iyi çalışması için birkaç faktör çok önemli dir. En önemlisi, tampon kendisindeki magnezyum ionlarının miktarıdır. RNA polimerazı, DNA şablonu ile uygun etkileşime geçmesi ve ardından RNA'nın kırışması için büyük bir miktarda Magnezyum gerektirir. Dikkat edilmesi gereken ikinci önemli unsur ise DNA şablonunun konsantrasyonudur. Belirli olarak, iyi RNA verimleri elde etmek için yeterli şablon DNA reaksiyonuna sahip olmalısınız.
Elbette uzun RNA kendi problemleriyle birlikte gelir. Bu sorunların RNA'nın bozulmasına, RNA'nın nasıl katlalandığına etki edebildiği ve potansiyel olarak RNA senteziyle çakışabilecek yapılar oluşturabileceği vardır. Bu zorluklara karşı bir çözüm, aldığınız tamponu ayarlamaktır. RNA'nın daha kapsamlı bir yapısı için araştırmacılar, RNA'nın doğru şekilde katlanmasını sağlayıp birbirine yapışmasını veya toplanmasını engellemek amacıyla DTT ve p-merkaptetanol gibi farklı özel kimyasallar ekleyebilir.
Ek olarak, tüm uzun RNA tipleri birbirine benzemiyor ve bazıları alternatif sentez yöntemlerine ihtiyaç duyabilir. Araştırmacıların RNA'ya eklemesi gerekebilecek özel özellikler bulunmaktadır, örneğin 5' kapağını veya Poly-A kuyruğunu eklemek gibi. Eğer bu gerekli ise (daha sonra açıklanmıştır), araştırmacılar Guanylyltransferase ve Poly(A) Polymerase gibi diğer enzimleri de eklemelidir. Ayrıca, doğal olarak daha fazla RNA üretmelerine olanak tanıyan uygun bir RNA polimeraz enzimi seçmelidir. Uzun RNA sentezlenmesi gerekiyorsa, en iyi koşulları belirlememiz gerekir.
Uzun RNA'larda in vitro transkript Bir dizi araştırmada, deneyde ve tedavi alanında uzun RNA in vitro transkript protokolü için birkaç anahtar kullanım alanı bulunmaktadır. Bilim insanlarına, RNA'nın yapısını, nasıl çalıştığını ve çağdaş teknolojilerle genleri nasıl değiştirebileceklerini anlatmaya yardımcı olur. Gündemdeki RNA terapileri gibi çeşitli hastalıkların keşfi ve bunlara ilişkin tedaviler - bize bu okuma-teknoji'nin tıp için ne kadar faydalı olabileceğini gösterir.
Bu protokolü kullanmanın birçok avantajı vardır. Elektroforizma tabanlı bir yöntem, genellikle uzun RNA'nın büyük miktarda üretilmesi için en verimli ve maliyet etkili yöntemdir. RNA kalitesinin yanı sıra, araştırmacılar için özellikle deneylerde büyük miktarlarda RNA gerekiyorsa başlangıçta yüksek giriş malzemesine sahip olmalarına rağmen araştırma süreçlerinde yardımcı olacak olan iyi bir verim de önemli bir faktördür. Ayrıca, uzun RNA için in vitro transkripsiyon, kimyasal sentez veya hücre içi RNA senteziye göre tipik olarak daha doğru ve tekrarlanabiliruktur.
Yaohai BioPharma, uzun RNA için In vitro Transkript Protokolünü ve düzenleyici işlerini birleştiren ilk 10 mikrobiyal CDMO'dur. Geçerli GMP standartları ve küresel düzenlemelerle uyumlu bir kalite yönetimi sistemi bulunmaktadır. Düzenleyici uzmanlarımız, biyolojik başlangıçları hızlandırmak için küresel düzenleyici çerçevelerde uzmandır. Amerika Birleşik Devletleri FDA'sı ve Avrupa Birliği EMA'nın kurallarına uymayı, izlenebilir üretim süreçleri ve kaliteli ürünler sunmayı garanti ederiz. Avustralya TGA ve Çin NMPA da memnuniyet duymaktadır. Yaohai BioPharma, GMP kalite sistemimiz ve imalat tesisimiz için Avrupa Birliği'nin Uygun Kişisi (QP) tarafından yapılan yerinde denetimi başarıyla geçmiştir. Ayrıca, ISO9001 Kalite Yönetimi Sistemi, ISO14001 Çevre Yönetimi Sistemi ve ISO45001 Meslek Sağlığı ve Güvenliği Yönetimi Sistemi ilk sertifikasyon denetimlerini tamamlamış bulunmaktayız.
Yaohai Bio-Pharma, biyolojik ürünlerin üreme alanındaki en iyi 10 üretici arasında yer alan bir firma ve mikrobiyal fermantasyon uzmanıdır. Modern tesislerle donatılmış gelişmiş bir tesis kurduk ve güçlü R&D imalat yetenekleri vardır. GMP gereksinimlerine uygun mikrobiyal fermantasyon ve temizleme için beş adet ilacsal madde üretim hattı bulunmakta ve otomatik olarak çalışabilen iki doldurma tamamlama hattımız da kartuşlar, şişeler ve ön-dolulmuş şırıngalar için mevcuttur. Kullanılabilir fermantasyon ölçekleri 100L'den 500L, 1000L ve 2000L'ye kadar değişmektedir. Vias için uzun RNA'nın in vitro Transkript Protokolü 1ml ile 25ml arasında olup, ön-dolulmuş şırıngalar ve kartuş doldurma belirtileri 1-3ml aralığını kapsar. Üretim atölyemiz cGMP uyumlu olup klinik örneklerin yanı sıra ticari ürünlerin sürekli sağlanması garantisi verir. Tesisimiz küresel düzeyde gönderilen büyük molekülleri üretmektedir.
Yaohai Bio-Pharma, mikroorganizmalarından üretilen biyolojiklerin üretiminde deneyime sahiptir. Olası riskleri minimum tutarken özel RD çözümleri ve üretim hizmetleri sunuyoruz. Recombinant hücre alt birimleri, aşılar (peptitler dahil), büyüme faktörleri, hormonlar ve Uzun RNA için In vitro Transkript Protokolü gibi çeşitli tekniklerle çalıştık. Yeast ekstraselüler ve intraselüler sekrezyon (en fazla 15g/L verim) ve bakteri intraselüler çözünür ve inklüzyon vucudu (en fazla 10g/L verim) gibi birçok mikroorganizma konusunda uzmandır. Ayrıca bakteriyel aşılar oluşturmak için BSL-2 fermantasyon platformu geliştirdik. Üretim süreçlerini iyileştirme kaydımız bulunmaktadır; bu da verimi artırır ve maliyetleri düşürür. Projelerin zamanında ve yüksek kalitede teslim edilmesini sağlamak için çok verimli bir teknoloji ekibine sahibiz. Bu, benzersiz ürünlerinizle pazarda daha hızlı yer almanızı sağlar.
Yaohai Bio-Pharma, uzun RNA CDMO için In vitro Transkript Protokolünde önderlik eden bir firma. Ana odak alanımız, evcil hayvanlar, insan ve veteriner sağlığı için mikrobiyal aşıları ve tedavi yöntemlerini üretmektir. Mühendislik mikrobiyal türlerden başlayarak hücre bankacılığı işleme ve yöntem tasarımı, klinik ve ticari üremeye kadar tüm üretim sürecini kapsayan en yeni RD ve üretim teknolojisi platformlarına sahibiz; bu da bize en ileri çözümlerin başarılı teslimini garanti etmemizi sağlar. Mikrobiyal biyoişlem alanında büyük bir bilgi birikimi kazandık. 200'den fazla proje başarıyla tamamlanmış ve müşterilerimize ABD FDA'sı gibi düzenleyici kurumların yanı sıra AB EMA'nın gereksinimlerini karşılamalarına yardımcı oluyoruz. Ayrıca Avustralya TGA ve Çin NMPA ile ilgili süreçleri de yönetmeye yardımcı oluyoruz. Deneyim ve uzmanlığımız sayesinde pazardaki taleblere hızlı bir şekilde yanıt veriyor ve özel CDMO hizmetleri sunabiliyoruz.