Cirkulär RNA, eller circRNA, är en speciell typ av RNA som har en annorlunda form. Medan vanlig RNA har ett linjärt utseende, är circRNA böjd till en cirkel. CircRNAs — en typ vars struktur är avgörande eftersom de ofta visar sig vara omfattande och deltar i många viktiga cellprocesser. För det första reglerar de hur våra gener uttrycks, vilket kan påverka allt från vår kroppars växtmönster till hur vi reagerar på sjukdomar. CircRNAs är av stort intresse för forskare; ett bättre förstånd för dem kan avslöja hur sjukdomar utvecklas och identifiera nya terapeutiska metoder. Men det finns ett problem: circRNAs är mycket små och tenderar att finnas i mycket låga mängder i de prov som forskarna studerar. Det gör det utmanande att samla in tillräckligt med circRNA för forskning.
Innan den slutgiltiga grundandet av circRNA utfördes användes en väl etablerad metod som heter Högpresterande vätskechromatografi, eller HPLC för kort. HPLC är en mångsidig teknik som används för att separera olika molekyler baserat på deras fysikaliska och kemiska egenskaper. Den fungerar genom att separera molekyler utifrån storlek och form. Eftersom circRNAs är mycket små kan de enkelt gå förlorade bland de tusentals andra molekyler i ett prov. Det betyder att circRNAs kan separeras från andra RNAs, proteiner och främmande partiklar som eventuellt har ingått i provet genom att använda effektiva metoder som storleksexkluderande chromatografi (SEC), en HPLC-teknik. Det är en viktig separation för forskare som behöver isolera circRNA för sina studier.
När HPLC hjälper till med reningsprocessen av circRNA måste den analyseras grundligt av forskare för att förstå dess funktioner hos oss. CircRNAs har visat sig vara viktiga molekyler som är inblandade i flera biologiska funktioner, vilket gör en grundlig förståelse av de olika typerna och roller av circRNA kritiskt för att avkoda deras betydelse i olika sjukdomar. Forskare känner inte till sekvensen på den renade circRNA:n och kommer behöva göra det för att upptäcka funktionerna hos dessa roller. För detta använder de tekniker som revers transkription PCR (RT-PCR). Med RT-PCR skapar forskarna ytterligare kopior av circRNA så att de kan studera den mer specifikt. De är ofta informativa och ger information om hur dessa molekyler fungerar och vad de gör i våra celler genom att analysera circRNA-sekvenserna.
Forskare behöver återvinna all den circRNA de kan komma åt. CircRNAs finns endast i små mängder i biologiska prov, och HPLC kan vara till hjälp för att separera och samla in en större mängd av dessa kritiska molekyler. På så sätt har forskarna en större sannolikhet att få tillräckligt med circRNA för sina experiment och generera handlingbar information. Ju mer circRNA de kan samla in, desto fler funktioner och roller kan de lära känna i hälsa och sjukdom.
Metoder för extraktion av circRNA från komplexa biologiska material är ofta högkostnadsfulla (t.ex. ultrafiltrering), krävande och lätt att förorena. Att få ut circRNA utan att tappa någon ofta kräver lite noggrann hantering och flera steg. Här kommer HPLC att vara mycket användbart. HPLC-metoder kan göra extraktionen till en snabbare och effektivare process. Genom att minska antalet steg i extraktionen minskar HPLC också potentiell förlust av värdefulla prov. Denna noggranna metod producerar mer pålitliga data och hjälper till att säkerställa att den isolerade circRNA:n är så ren som möjligt.
CircRNA:er är mycket svåra att studera, och det beror på att forskare måste vara extra noggranna i sin identifiering och mätning. Utifrån detta faktum är HPLC inte bara en nyckelsteg för att ta bort andra föreningar utan garanterar också att endast circRNA-molekyler kan isoleras, vilket förbättrar specifiteten och känsligheten i circRNA-detektering. Detta resulterar i ett renare prov, vilket är viktigt för forskningens noggrannhet. Att ha ett rengjort prov av circRNA hjälper forskare att känna större förtroende för sina resultat och minskar risken för fel i sina studier.
Yaohai Bio-Pharma är en av de tio främsta biologiska företagen som specialiserar sig på HPLC-baserad circRNA-rening. Vi har byggt ett modernt tillverkningsanlägg med starka forsknings- och utvecklingsförmågor och moderna tillverkningsanläggningar. Fem tillverkningslinjer för aktiva läkemedelssubstanser som följer GMP-standarder för mikrobiell färdering och reningsprocesser, tillsammans med två slutliga linjer för flaskor och kassettor samt förutfyllda spritorna är direkt tillgängliga. De tillgängliga färdeskalorna varierar mellan 100L och 2000L. Fyllvolymen ligger mellan 1ml och 25ml. Förutfyllda syringor eller kassettor fylls med 3 till 3,5ml. Vår cGMP-kompatibla produktionsverkstad säkerställer en konstant leverans av kliniska prov och kommersiella produkter. Vårt anlägg producerar stora molekyler som exporteras över hela världen.
Yaohai Bio-Pharma, en ledare inom HPLC-baserad circRNA-rening av mikrobiella biologiska produkter, är belägen i Jiangsu. Vi fokuserar på mikrobiellt producerade terapeutiska medel och vaccin som är lämpliga för hälsohantering inom människors, veterinär- och husdjursområdet. Vi har moderna forsknings- och tillverknings teknikplattformar som täcker hela processen, från mikrobergsanpassning, cellbankering, process- och metodutveckling, fram till kommersiell och klinisk tillverkning, vilket säkerställer att vi kan garantera framgångsrik leverans av de mest innovativa lösningarna. Vi har samlat en stor mängd erfarenhet inom området mikrobiell biotillverkning. Mer än 200 projekt har slutförts framgångsrikt och vi stöder våra kunder att möta regleringar såsom de från US FDA och EU EMA. Vi hjälper även dem med Australiens TGA och Kinas NMPA. Tack vare vår erfarenhet och expertis kan vi snabbt reagera på marknadens krav och erbjuda anpassade CDMO-tjänster.
Yaohai Bio-Pharma utför HPLC-baserad circRNA-rengöring i mikrobiella biologiska produkter. Vi erbjuder anpassade RD-lösningar samt tillverkningslösningar samtidigt som vi minimerar risken. Vi har varit inblandade i flera modaliteter som rekombinanta subenhet-vacciner, peptides hormoner, cytokiner växstillskillnader, ensdomänantikroppar, enzym, plasmid DNA, mRNA och andra. Vi är experter på flera mikrobiella värdar, såsom gärningsjord intracellulär och extracellulär (uppgift upp till 15 gram per liter), bakteriell periplasmisk sekretion samt löslig intracellulär inklusionskroppar (uppgift upp till 10 gram/L). Dessutom har vi utvecklat BSL-2-mikrobiell fermenteringsplattform för utveckling av bakteriella vaccin. Vi har en historik av att förbättra produktionsprocesser, därmed öka uppgiften och minska kostnaderna. Med en högkvalitativ teknikgrupp garanterar vi snabb och pålitlig projektleverans och tar dina produkter snabbare till marknaden.
Yaohai BioPharma, en av de tio främsta mikrobiella CDMO:erna som integrerar kvalitetsmanagement och regulatoriska ärenden. Vårt kvalitetsystem är kompatibelt med aktuella GMP-standarder samt internationella föreskrifter. Vår grupp av regulatoriska experter är skicklig i globala regulatoriska ramverk för att accelerera lanseringar av biologiska produkter. Vi säkerställer spårbara produktionsförfaranden, kvalitetsprodukter samt överensstämmelse med kraven för HPLC-baserad circRNA-purifiering och EU EMA. Australien TGA och Kina NMPA uppfylls också. Yaohai BioPharma lyckades med en på-plats-granskning utförd av en behörig person från Europeiska Unionen (QP) för att undersöka vårt GMP-system och produktionsanläggning. Vi har också slutfört de inledande certifieringsgranskningarna av ISO9001 Kvalitetsmanagementsystem och ISO14001 Miljöhanteringssystem.