Izzivi uključenega sveta litijevskega kloridnega padavinjenja

Litijev kloridni padavin je široko uporabljan za ločitev RNA iz rešitve.

Tu je razcep procesa:

1. Priprava vzorca: Začnite z vzorcem, ki vsebuje RNA, na primer in vitro mešanico transkriptov.

2. Dodajanje litijevega klorida: V rešitev s RNA dodajte ustrezen prostorninski obseg koncentrirane litijeve kloridne rešitve.

3. Inkubacija: Po dodajanju litijevega klorida se rešitev inkubira pri nizki temperaturi, splošno okoli -20°C. To povzroči, da se molekule RNA padajo iz rešitve.

4. Centrifikacija: Po inkubaciji se rešitev centrificira pri visoki hitrosti. To loči padavino RNA od ostale rešitve, ki vsebuje nepurence.

5. Promezava: Ko je centrifikacija zaključena, pazljivo odstranite nadležek, ne da bi motili padavino RNA. Promezajte delce RNA s hladnim etanolom ali izopropilnim alkoholom, da odstranite vse preostale nepurence.

6. Raztopljanje RNA: Po umivanju se RNA padec kratko suši na zraku in nato raztopi v ustreznem buferju, kot je na primer TE bufer (Tris-EDTA bufer) ali destilirana voda. Za dovoljno raztopljenost RNA morda bodo potrebna jarna pipetiranja ali eddinske struje.

7. Količinsko določanje in analiza: Na koncu se izolirana RNA količinsko določi s pomočjo ultravijolične spektroskopije ali fluorescenčne metode. To določi koncentracijo in čistoto vzorca RNA, kar je pomembno za nadaljnje uporabe, kot je inkapsulacija LNP in transfekcija celic.

Yaohai Bio-Pharma je vmešana v uporabo metode osadnjenja z litijem kloridom v proizvodnji, ker je preprosta, nižje ceno in producira visoko kakovostno RNA, primerno za številne aplikacije molekularne biologije. Vendar je pomembno prilagoditi pogoje (npr. koncentracijo litija klorida, čas navduševanja, hitrost centrifugiranja), da se dosežejo najboljši rezultati za določen vzorec.

Zaradi naše močne in lastne platforme RNASci ponavadi tudi po meri prilagojene storitve sinteze RNA, ter katalog izdelkov mRNA (do 10 kb), circRNA (do 4 kb) in LNP. Ustanovili smo kompleksen sklop tehnologij za sintezo mRNA/circRNA, da zagotovimo visoko kakovostno RNA, kot so na primer načrtovanje in optimizacija zaporedja, IVT, okroženje, očiščevanje in zapolnovanje v LNP. Vsi izdelki se izdajajo pod strogi standardi nadzora kakovosti.

Yaohai Bio-Pharma je prva in največja biološka CRDMO, posvečena mikrobijskim izraževalnim sistemom v Veliki Kitaji. Ponujamo kompleksne prilagojene rešitve ali samostojne storitve, ki se razlagajo od sinteze RNA, inženiringa in gradnje številcev, razvoja gornjega in spodnjega procesa, do proizvodnje snovi za farmacevtske pripravke na ravni GMP ali ne-GMP, ter storitve izpolnjevanja za različne modalitete, kot so mRNA, circRNA, plazmidna RNA, rekombinantni proteini, peptidi, enzimi, enoodsečne antitela (sdAbs) in VLP-ji. Zavezani smo izpolnjevanju potreb globalnih strank v bioloških zdravilih, cepivih in diagnostiki za uporabo pri človeških in živalskih boleznih.

Yaohai Bio-Pharma aktivno išče tudi institucionalne ali posamezne globalne partnerje in ponuja najbolj konkurenčno naknadbo v industriji. Če imate katere koli vprašanja, nas prosimo, da nas kontaktirate: [email protected]