Základom encapsulácie je dizajn a vývoj systému pre dopravu. Dobré zoskupenie systému pre dopravu umožňuje molekulám circRNA vstúpiť do tela bez degradácie RNA enzymami a potom byť účinne doručené na cieľové miesto, prekročiť bunkovú membránу a uvoľniť sa vo vnútri bunky.
Lipidové nanocastičky (LNPs) sú najlepším dostupným systémom pre dodávku, s výhodami v oblasti zapouzdrenia, expresie in vivo a bezpečnosti in vivo v porovnaní s ostatnými systémami pre dodávku. LNPs s úlomkami nukleových kyselín sa ľahko pozrivajú do buniek a tvoria intracelulárne telieska. Po vstupe do bunky protonuje kyselá prostredie intracelulárneho tela hlavu ionizovaného lipídu a dodáva jej pozitívne náboje, čo spôsobí fúziu s vnútornou membránou intracelulárneho tela a uvoľní cieľovú nukleovú kyselinu do bunky na pôsobenie.
Služba Yaohai Bio-Pharma circRNA neustále dosahuje vylepšovanie a môže ponúknuť službu zapouzdrenia circRNA-LNP na optimalizáciu relevantných kritických parametrov procesu a zlepšenie konzistenčnosti a reprodukovateľnosti produkcie lieku circRNA.
Proces | Podrobnosti služby | Dobový obdobie doručenia (Deň) | Výstupy |
encapsulation circRNA-LNP | Pretretment materiálu a kapaliny | 2 | produkt farmaceutského lieku circRNA-LNP (DP) |
Mikrofluidické zameranie miešania | |||
Tangenciálny tokovýfiltrovanie | 1 | ||
MRNA-LNP liečivový produkt (DP) | |||
kvalitná kontrola circRNA-LNP | Účinnosť enkapsulácie | 1 | Skúšobná správa |
Veľkosť častíc a index polydisperzity | |||
Zeta potenciál |
Rýchla syntéza, vysoká účinnosť R&D a predoptimalizované riešenia;
Pomer encapsulácie môže dosiahnuť viac ako 90%;
Veľkosť lipidných nanocastic môže byť riadená zmenou rýchlosti a pomeru vstrelu kapaliny;
circRNA-LNP produkty sú overené in vitro bunkovým vyjadrením a môžu efektívne vyjadzovať cieľový proteín.
Prípravujú sa vzorky LNP-eGFP circRNA a ich rôzne dávky (1ug, 2ug a 4ug) sú priamo transfikované do buniek 293T na overenie, či môžu vyjadzovať cieľový proteín. Po 48 hodinách transfikácie je možné pozorovať jasný fluorescenčný signál a existuje efekt eskalácie intenzity fluorescencie podľa dávky.
Lipo-circ_eGFP, ktoré tvoria liposomy a nezabalená eGFP circRNA, slúži ako kontrola.