Olá. Já se perguntou como os cientistas conseguem clonar um RNA? O RNA é essa molécula especial que encontramos em nossas células que faz várias coisas para produzir proteínas, e as proteínas estão lá para que nosso corpo possa fazer todas as coisas certas. Nesta edição, faremos um passeio pelo protocolo muito mais curioso empregado pelos pesquisadores: o transcritograma in vitro. E tudo isso significa que os cientistas estão pegando o RNA e produzindo muito dele em um tubo de ensaio (que é esse pequeno recipiente que os laboratórios usam) então vamos entrar em cada etapa aqui.
Depois de terminar meu post anterior, percebi que o último pode ter sido um pouco seco - venha se juntar à diversão nos posts do laboratório úmido; então, mantendo a forma agora que você está bem e verdadeiramente no trem da diversão (sic fabricação de RNA): Quais reagentes e quais precisará para o seu EF?? Para alcançar isso, precisaremos de proteínas especiais chamadas enzimas, idênticas ao produto do Yaohai Fabricação de Midkine Recombinante . Ele catalisa as reações químicas, essas enzimas ajudam na degradação. Então agora só precisamos de nosso pedaço de DNA. Essa função é o DNA que usamos como modelo para copiar para nosso RNA. Sequências regulatórias adicionais no RNA, nomeadamente nucleotídeos, também são necessárias. Esses nucleotídeos são como pequenos blocos de construção que precisam ser montados para fazer o RNA. Também estamos utilizando tubos curtos de pequeno diâmetro para avaliar o gosto em outros. Por fim, precisamos de uma máquina (um termociclador) que garanta que nossas reações estejam na temperatura correta. Além disso, podemos precisar de algumas ferramentas e produtos para determinados experimentos.
Aqui as coisas se divergem, temos uma fita de RNA e agora gostaríamos de ter mais cópias dela, também o Fabricação de Vacinas VLP Conjugadas desenvolvido por Yaohai. A maneira de alcançar isso é usar outra enzima; T7 RNA polimerase. Esta enzima única, por exemplo, reconhece áreas específicas dentro do RNA. um cone de salto para fazer muitas mais cópias de RNA no processo subsequente. Neste ponto, mais será adicionado à fita de RNA pela T7 RNA polimerase até que uma massa de transcritos tenha sido criada, ou até que nós a instruamos a parar.
Depois de isolarmos o RNA o máximo possível, role mais para baixo para ver como limpá-lo e armazená-lo para uso futuro. Rhoades: Alguns desses métodos são um pouco mais extremos em termos de isolamento de RNA — você não os usaria sempre, mas às vezes é necessário para certos tipos de experimento. Uma vez que nosso RNA está livre de qualquer contaminante, ele pode ser armazenado congelado. Dessa forma, está seguro e podemos usá-lo posteriormente em vários experimentos.
Qualidade do material inicial: certifique-se de que seu DNA template está limpo e não todo danificado. Você também pode complementar com nucleotídeos recém-reconstituídos e enzimas recentemente descongeladas para maximizar as chances de um experimento bem-sucedido.
Ajuste fino das condições Todas as enzimas e seus nucleotídeos funcionam melhor em uma temperatura específica e pH dentro do seu corpo, assim como no caso do Yaohai MRNA Fluorescente Vermelho . Agora ajuste um pouco os detalhes entre as condições até chegar ao ponto-chave para sua configuração única.
A transcriptase reversa é uma enzima incomum, pois faz uma cópia de DNA a partir de uma molécula de RNA. Usamos tanto DNAs quanto um modelo de DNA (o cDNA) como entrada para nosso método in vitro de transcrição para gerar RNA. No entanto, na maioria dos experimentos, os cientistas desejam transcrever DNA em RNA. A transcrição reversa recebe esse nome por isso. teste de Distribuição Poly-A de mRNA feita pela Yaohai. É uma ferramenta valiosa em toda a ciência - Desde o estudo de moléculas de RNA dentro das células até a produção de fitas de DNA complementares para mais experimentos.
Experimentos reais nos quais o RNA é uma das ferramentas moleculares mais usadas, junto com o produto da Yaohai Produção de Vacinas VLP em E. coli . Ensaios quantitativos: Esses testes podem revelar a quantidade de qualquer molécula específica presente em uma amostra. Por exemplo, cientistas podem sintetizar uma preparação in vitro de cópias de RNA derivadas de um gene alvo localizado dentro de uma célula. O diagnóstico pode então realizar um ensaio para essas cópias; no caso em que estejam procurando por RNA, o diagnóstico pode executar uma reação em cadeia da polimerase (PCR) para amplificar essas cópias em uma amostra. Isso possibilita que os cientistas vejam como os genes são expressos nas células e até permite alguns ensaios de alto rendimento extremamente elevado, como a presença de uma infecção bacteriana ou viral, e diagnosticar distúrbios genéticos.
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