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Protocolo de Transcrição in vitro para RNA Longo

Hoje, a Yaohai está muito empolgada para compartilhar seu protocolo de transcrição in vitro para RNA longo. É uma estratégia eficaz que os cientistas frequentemente utilizam para produzir RNA no laboratório. Dessa forma, os pesquisadores podem produzir uma quantidade significativamente grande de RNA longo — algo essencial para o estudo em diferentes campos biológicos. Aqui, fornecemos um guia passo a passo para a preparação de RNAs longos por meio de transcrição in vitro. Também discutiremos como podemos melhorar o processo e tentaremos abordar alguns dos problemas que você enfrenta na síntese de RNA longo.

Vários componentes essenciais são necessários para a transcrição in vitro, especialmente para RNA longo. Você precisará fornecer uma enzima chamada polimerase de RNA, material de escrita na forma de trifosfatos de nucleotídeos (NTPs), um tampão para auxiliar na reação e algum DNA template. Como fazer isso passo a passo, você pode encontrar um guia detalhado aqui:

Otimizando condições para uma síntese eficiente de RNA longo

Vários fatores são muito importantes para o bom funcionamento da síntese de RNA. Notavelmente, a quantidade de íons de magnésio no próprio tampão é importante. A RNA polimerase requer uma quantidade considerável de Magnésio para apoiar a interação adequada com o DNA template e a subsequente dobra do RNA. Um segundo aspecto importante a considerar é a concentração de DNA template. Especificamente, você deve ter template DNA suficiente na reação para obter bons rendimentos de RNA.

O RNA longo, é claro, virá com seu próprio conjunto de problemas. Esses problemas podem estar relacionados à degradação do RNA, afetar como o RNA se dobra e formar estruturas que potencialmente interferem na síntese do RNA. Uma maneira de enfrentar esses desafios é ajustando o tampão que você utiliza. Para uma estrutura mais abrangente do RNA, os pesquisadores podem adicionar diferentes produtos químicos especiais, como DTT e p-mercaptoetanol, para ajudar o RNA a se dobrar corretamente e evitar que ele grude ou forme agregados.

Why choose Yaohai Protocolo de Transcrição in vitro para RNA Longo?

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