Vandaag is Yaohai zo enthousiast om zijn in vitro transcriptieprotocol voor lange RNA te delen. Het is een effectieve strategie die wetenschappers vaak gebruiken om RNA in de laboratoriumomgeving te produceren. Op deze manier kunnen onderzoekers een aanzienlijk grote hoeveelheid lange RNA produceren — iets wat essentieel is voor studies in verschillende biologische velden. Hier bieden we een stap-voor-stapgids voor de voorbereiding van lange RNA's via in vitro transcriptie. We zullen ook bespreken hoe we het proces beter kunnen maken en proberen enkele van de problemen aan te pakken waarmee u te maken krijgt bij de synthese van lange RNA.
Verschillende essentiële componenten zijn vereist voor in vitro transcriptie, met name voor lange RNA. U moet een enzym noemen genaamd RNA-polymerase, schrijfmateriaal in de vorm van nucleotriphosphaten (NTP's), een buffer om de reactie te ondersteunen en enig DNA-sjabloon. Hoe u dit stapsgewijs kunt doen, vindt u een gedetailleerde gids hier:
Verschillende factoren zijn zeer belangrijk voor het goede functioneren van de synthese van RNA. Vooral de hoeveelheid magnesiumionen in het buffer zelf is belangrijk. RNA-polymerase heeft een flinke hoeveelheid magnesium nodig om de juiste interactie met het DNA-sjabloon te ondersteunen en het volgende vouwen van de RNA. Een ander belangrijk aspect om in overweging te nemen is de concentratie van DNA-sjabloon. Specifiek moet je voldoende sjabloon-DNA hebben in de reactie om goede RNA-opbrengsten te verkrijgen.
Lange RNA komt natuurlijk met zijn eigen reeks problemen. Deze problemen kunnen te maken hebben met de afbraak van de RNA, beïnvloeden hoe de RNA vouwt, en structuren opbouwen die mogelijk interfereren met de synthese van de RNA. Een manier om deze uitdagingen aan te pakken is door de buffer aan te passen die je gebruikt. Voor een meer omvattende structuur van RNA kunnen onderzoekers verschillende speciale chemicaliën zoals DTT en p-mercaptoethanol toevoegen om de RNA correct te laten vouwen en te voorkomen dat ze aan elkaar kleven of klonters vormen.
Daarnaast zijn niet alle lange RNA-typen hetzelfde en sommige kunnen alternatieve synthese methoden vereisen. Er zijn speciale kenmerken die onderzoekers mogelijk aan de RNA moeten toevoegen, zoals een 5' cap of een Poly-A staart. Als dit nodig is (zoals later uitgelegd), dienen onderzoekers andere enzymen zoals Guanylyltransferase en Poly(A) Polymerase toe te voegen. Men moet ook een geschikte RNA polymerase enzyme kiezen die hen natuurlijk in staat stelt meer RNA te produceren. Zodra lang RNA gemaakt moet worden, zullen we de beste voorwaarden moeten bepalen.
Lange RNAs in vitro transcript Er zijn verschillende belangrijke toepassingen voor het protocol van lange RNA in vitro transcripten in verschillende onderzoeks-, assay- en therapeutische activiteiten. Het helpt wetenschappers om de structuur van RNA te begrijpen, hoe deze werkt en hoe ze genen kunnen aanpassen met hedendaagse technologieën. Dag na dag worden er nieuwe ziektes en hun therapieën ontdekt, zoals de recente RNA-therapiën, wat laat zien hoe nuttig deze lees-in-technologie kan zijn voor de geneeskunde.
Er zijn veel voordelen aan het gebruik van dit protocol. Een elektroforese-gebaseerde methode is doorgaans de meest efficiënte en kosteneffectieve manier om grote hoeveelheden lange RNA te produceren. Naast de kwaliteit van de RNA is een goede opbrengst ook een belangrijke factor voor onderzoekers om hen te helpen bij hun onderzoek, vooral als ze grote hoeveelheden RNA nodig hebben voor experimenten vanwege het hoge invoermateriaal dat nodig is. Bovendien is in vitro transcriptie voor lange RNA doorgaans nauwkeuriger en beter reproducerbaar dan chemische synthese of celulaire synthese van RNA.
Yaohai BioPharma is een Top 10 Microbial CDMO die In vitro Transcript Protocol voor Long RNA en regulieringszaken inzet. We hebben een kwaliteitsmanagementsysteem dat aansluit bij de huidige GMP-standaarden en wereldwijde voorschriften. Ons team van reguliere experts is bekwaam in wereldwijde reguliere kaders om de lancering van biologische producten te versnellen. We garanderen traceerbare productieprocessen, kwaliteitsproducten en naleving van de regels van de Amerikaanse FDA en de Europese EMA. De Australische TGA en de Chinese NMPA zijn ook tevreden. Yaohai BioPharma heeft succesvol de audit ter plaatse doorlopen van de Qualified Person (QP) van de Europese Unie voor ons GMP-kwaliteitsysteem en onze productiefaciliteit. Bovendien hebben we de eerste certificatieaudits gehaald van het ISO9001 Kwaliteitsmanagementsysteem, ISO14001 Milieumanagementsysteem en ISO45001 Arbeidsgezondheids- en veiligheidsmanagementsysteem.
Yaohai Bio-Pharma, een van de top 10 producenten van biologische producten, is gespecialiseerd in microbiele fermentatie. We hebben een geavanceerd faciliteit opgericht dat uitgerust is met moderne voorzieningen en sterke RD-productiecapaciteiten. We beschikken over vijf werkstoffenproductielijnen die voldoen aan de GMP-eisen voor microbiele fermentatie en zuivering, en twee volledig geautomatiseerde verpakkingslijnen voor patroon, ampullen en pregevulde spuiten. De beschikbare fermentatieschalen variëren van 100L tot 500L, 1000L en 2000L. In vitro Transcript Protocol voor lang RNA zijn 1ml tot 25ml, terwijl de specificaties voor pregevulde spuiten en patroonvulling 1-3ml bedekken. Onze productiewerkplaats is cGMP-compliant en garandeert een stabiele levering van klinische monsters en commerciële artikelen. Onze fabriek produceert grote moleculen die wereldwijd worden geleverd.
Yaohai Bio-Pharma heeft ervaring in de productie van biologische middelen die worden gemaakt uit microorganismen. We bieden maatwerk RD-oplossingen en productieservices terwijl we potentiële risico's minimaliseren. We hebben gewerkt met diverse technieken, zoals recombinante celulaire subeenheden, vaccins (inclusief peptiden), groeifactoren, hormonen en het In vitro Transcript Protocol voor Long RNA. We zijn gespecialiseerd in veel microorganismen zoals gist extracellulaire en intracellulaire secretie (opbrengsten tot 15g/L) en bacteriële intracellulaire oplosbaarheid en inclusiebody (opbrengsten tot 10g/L). We hebben ook een BSL-2 fermentatieplatform ontwikkeld om bacteriële vaccins te creëren. We hebben een trackrecord van het verbeteren van productieprocessen, waardoor opbrengsten toenemen en kosten dalen. We beschikken over een zeer efficiënt technisch team om de voortijdige en kwalitatieve afronding van projecten te waarborgen. Dit helpt ons uw unieke producten sneller op de markt te brengen.
Yaohai Bio-Pharma is een leider in het In vitro Transcript Protocol voor Long RNA CDMO. Ons belangrijkste focuspunt is de productie van microbiële vaccinaties en therapieën om huisdieren, menselijke en veterinaire gezondheid te behandelen. We beschikken over geavanceerde RD- en productietechnologieplatforms die het volledige productieproces bestrijken, van de ontwikkeling van microbiële stammen, tot celbankverwerking en methodontwerp, tot klinische en commerciële productie, zodat we ervoor kunnen zorgen dat we de succesvolle levering van de meest geavanceerde oplossingen waarborgen. We hebben een enorme hoeveelheid kennis opgebouwd in het gebied van biologische verwerking van micro-organismen. Meer dan 200 projecten zijn succesvol afgerond en helpen we onze klanten om aan regels zoals die van de Amerikaanse FDA en de Europese EMA te voldoen. We helpen ze ook bij het navigeren door de eisen van de Australische TGA en de Chinese NMPA. Vanwege onze ervaring en expertise kunnen we snel reageren op markteisen en aangepaste CDMO-diensten bieden.