N-glikānu profilēšana ir būtiska biofarmaceitisko preparātu ražošanai. Yaohai Bio-Pharma piedāvā N-glikānu profilēšanas pakalpojumu, izmantojot ūdens krāsošanas-masas spektrometriju (LC-MS) no atbrīvoti un marķēti glikāniem. Parastie soli N-glikānu parauga sagatavošanai ietver glycoproteīna (GP) sadalīšanu, deģlikozēšanu, tīrīšanu, marķēšanu/derivatizāciju un Solid Phase Extraktēšanu (SPE).
Mēs esam iesaistīti dažādu lielo molekulu, tostarp Rekombinantu Subūnas vakcinu, Nanocorpusi/VHHs/Vienkāršo anticorpuss (sdAbs), Anticorpju fragmentu, Hormonu/Peptīdu, Citoķīnu, Augstas faktoru (GF), Enzīmu, Kolaģēnu utt. Proteīnu struktūras raksturošanā.
Regulatīvie prasības N-Glikānu profilēšanai
Pēc ICH Q6B norādes, "glikoproteīnu gadījumā noteikta cukura sastāva (neitrālie cukuri, aminocukuri un sialīdzokis) saturu. Turklāt, līdz iespējai, tiek analizētas cukura virsmas struktūras, oligosaharīdu modelis (antenas profils) un polipeptīda virsmas glikozacijas vietas.
Analītiskā metode
| Analīze |
Metodes |
| N-glikānu profilēšana |
Atbrīvotu un marķētu glikānu šķīdināšanas-masa spektrometrija (LC-MS) |
Procedūras
1. Enzimiskais glikānu atbrīvošana ar Peptide N-Glikozidāzi F (PNGase F)
2. Atbrīvotu glikānu derivatizācija ar 2-aminobenzamīdu (2-AB)
3. Sakopināto N-glikānu notīrīšana uz TSK Amide - 80 kolonnas, ja ir lielas deterģentu, nenovoltīgu soli vai vielu ar brīviem amīna grupiem daudzumi
4. Marķēšana ar fluorescējošo 2-aminobenzamīdu (2-AB)
5. Marķēto N-glikānu LC-MS analīze
6. Dati pārstrādāti
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
