Presipitasi litium klorida digunakan secara luas untuk memisahkan RNA dari larutan.

Berikut rincian prosesnya:

1. Persiapan sampel: Mulailah dengan sampel yang mengandung RNA, seperti in-vitro campuran transkrip.

2. Penambahan litium klorida: Tambahkan larutan litium klorida pekat dengan volume yang sesuai ke dalam larutan RNA.

3. Inkubasi: Setelah menambahkan litium klorida, larutan diinkubasi pada suhu rendah, umumnya sekitar -20°C. Hal ini menyebabkan molekul RNA mengendap keluar dari larutan.

4. Sentrifugasi: Setelah inkubasi, larutan disentrifugasi dengan kecepatan tinggi. Ini memisahkan RNA yang mengendap dari sisa larutan, yang mengandung kotoran.

5. Pencucian: Setelah sentrifugasi selesai, keluarkan cairan supernatan dengan hati-hati, tetapi jangan sampai mengganggu presipitasi RNA. Cuci partikel RNA dengan etanol dingin atau alkohol isopropil untuk menghilangkan kotoran yang tersisa.

6. Resuspensi RNA: Setelah dicuci, endapan RNA dikeringkan dengan udara sebentar lalu disuspensikan kembali dalam buffer yang sesuai, seperti buffer TE (buffer Tris-EDTA) atau air suling. Pipet yang lembut atau arus eddy mungkin diperlukan untuk mensuspensikan kembali RNA secara memadai.

7. Kuantifikasi dan analisis: Akhirnya, RNA yang diisolasi dikuantifikasi dengan spektroskopi ultraviolet atau metode fluoresensi. Ini menentukan konsentrasi dan kemurnian sampel RNA, yang penting untuk aplikasi hilir seperti enkapsulasi LNP, dan transfeksi sel.

Yaohai Bio-Pharma ahli dalam menggunakan metode presipitasi litium klorida dalam proses produksi karena metode ini sederhana, murah, dan menghasilkan RNA berkualitas tinggi yang cocok untuk berbagai aplikasi biologi molekuler. Namun, penting untuk mengoptimalkan kondisi (misalnya, konsentrasi litium klorida, waktu inkubasi, kecepatan sentrifugasi) guna memperoleh hasil terbaik untuk sampel tertentu.

Mengandalkan platform RNASci milik kami yang tangguh dan eksklusif, kami juga menyediakan layanan sintesis RNA yang disesuaikan, serta produk katalog mRNA (hingga 10 kb), circRNA (hingga 4 kb), dan LNP. Kami telah menetapkan serangkaian lengkap teknologi sintesis mRNA/circRNA untuk menyediakan RNA berkualitas tinggi, seperti desain dan pengoptimalan sekuens, IVT, sirkularisasi, pemurnian, dan enkapsulasi LNP. Semua produk dirilis di bawah standar kendali mutu yang ketat.

Yaohai Bio-Pharma adalah CRDMO biologis pertama dan terbesar yang didedikasikan untuk sistem ekspresi mikroba di Tiongkok Raya. Kami menawarkan solusi khusus menyeluruh atau layanan mandiri mulai dari sintesis RNA, rekayasa dan konstruksi strain, pengembangan proses hulu dan hilir, hingga pembuatan zat obat tingkat GMP atau non-GMP, dan layanan pengisian & penyelesaian untuk berbagai modalitas, seperti mRNA, circRNA, plasmid RNA, protein rekombinan, peptida, enzim, antibodi domain tunggal (sdAb), dan VLP. Kami berkomitmen untuk memenuhi kebutuhan klinis dan komersial pelanggan global dalam obat-obatan biologis, vaksin, dan diagnostik untuk penggunaan manusia dan hewan.

Yaohai Bio-Pharma juga secara aktif mencari mitra global institusional atau individu dan menawarkan kompensasi paling kompetitif di industri ini. Jika Anda memiliki pertanyaan, jangan ragu untuk menghubungi kami: [email protected]