Hari ini Yaohai sangat bersemangat untuk membagikan protokol transkrip in vitro untuk RNA panjang. Ini adalah strategi efektif yang sering digunakan oleh ilmuwan untuk menghasilkan RNA di laboratorium. Dengan cara ini, para peneliti dapat menghasilkan jumlah RNA panjang yang signifikan — sesuatu yang penting untuk studi di berbagai bidang biologi. Di sini, kami menyediakan panduan langkah-demi-langkah untuk persiapan RNA panjang melalui transkripsi in vitro. Kami juga akan membahas bagaimana kami dapat memperbaiki proses tersebut dan mencoba menyelesaikan beberapa masalah yang Anda hadapi dalam sintesis RNA panjang.
Beberapa komponen esensial diperlukan untuk transkripsi in vitro, terutama RNA panjang. Anda harus menyediakan enzim bernama polimerase RNA, bahan tulis berupa nukleotida trifosfat (NTPs), buffer untuk membantu reaksi, dan beberapa template DNA. Bagaimana cara melakukannya langkah demi langkah, Anda bisa menemukan panduan rinci di sini:
Beberapa faktor sangat penting untuk berjalannya sintesis RNA dengan baik. Yang paling menonjol, jumlah ion magnesium dalam buffer itu sendiri adalah hal yang penting. Polimerase RNA membutuhkan jumlah magnesium yang cukup besar untuk mendukung interaksi yang tepat dengan template DNA dan lipatan RNA berikutnya. Aspek penting kedua yang perlu dipertimbangkan adalah konsentrasi template DNA. Secara khusus, Anda harus memiliki cukup template DNA reaksi agar mendapatkan hasil RNA yang baik.
Tentu saja, RNA panjang akan membawa serangkaian masalah tersendiri. Masalah-masalah ini dapat berhubungan dengan pemecahan RNA, memengaruhi cara RNA melipat, dan membentuk struktur-struktur yang secara potensial mengganggu sintesis RNA. Salah satu cara untuk mengatasi tantangan-tantangan ini adalah dengan menyesuaikan buffer yang digunakan. Untuk struktur RNA yang lebih komprehensif, para peneliti dapat menambahkan bahan kimia khusus seperti DTT dan p-merkaptietanol untuk membantu RNA melipat dengan benar dan mencegahnya saling menempel atau membeku.
Selain itu, tidak semua jenis RNA panjang sama dan beberapa mungkin memerlukan metode sintesis alternatif. Ada fitur khusus yang mungkin perlu ditambahkan oleh peneliti ke dalam RNA, seperti menambahkan 5' cap atau ekor Poly-A. Jika ini diperlukan (seperti dijelaskan kemudian), maka peneliti harus menyertakan enzim lain seperti Guanylyltransferase dan Poly(A) Polymerase. Seseorang juga harus memilih enzim polimerase RNA yang sesuai yang secara alami memungkinkan mereka menghasilkan lebih banyak RNA. Setelah RNA panjang perlu disintesis, kita harus mengidentifikasi kondisi terbaik.
Transkrip RNA panjang in vitro. Ada beberapa penggunaan utama protokol transkrip RNA panjang in vitro dalam berbagai penelitian, asay, dan upaya terapeutik. Ini membantu ilmuwan memahami struktur RNA, cara kerjanya, dan bagaimana mereka dapat memodifikasi gen dengan teknologi kontemporer. Setiap hari semakin banyak penemuan penyakit dan terapi mereka seperti terapi RNA terkini yang menunjukkan betapa bergunanya teknologi ini untuk kedokteran.
Ada banyak keuntungan menggunakan protokol ini. Metode berbasis elektroforesis umumnya merupakan cara yang paling efisien dan hemat biaya untuk menghasilkan kuantitas besar RNA panjang. Selain kualitas RNA, hasil yang baik juga merupakan faktor penting bagi para peneliti untuk membantu mereka dalam penelitian, terutama jika mereka membutuhkan jumlah besar RNA untuk eksperimen karena bahan masukan yang tinggi dari awal. Selain itu, transkripsi in vitro untuk RNA panjang biasanya lebih akurat dan dapat diulang dibandingkan sintesis kimia atau sintesis seluler RNA.
Yaohai BioPharma adalah salah satu CDMO Mikrobiologi Top 10 yang mengintegrasikan Protokol Transkrip In vitro untuk RNA Panjang serta urusan regulasi. Kami memiliki sistem manajemen kualitas yang sesuai dengan standar GMP saat ini dan peraturan global. Tim ahli regulasi kami mahir dalam kerangka regulasi global untuk mempercepat peluncuran biologis. Kami memastikan proses produksi yang dapat dilacak, produk berkualitas, serta mematuhi aturan US FDA dan EU EMA. Australia TGA dan China NMPA juga merasa puas. Yaohai BioPharma telah berhasil lulus audit di lokasi oleh Orang Terlatih (QP) Uni Eropa untuk sistem kualitas GMP kami serta fasilitas produksi kami. Selain itu, kami telah lulus sertifikasi pertama dari Sistem Manajemen Kualitas ISO9001, Sistem Manajemen Lingkungan ISO14001, dan Sistem Manajemen Keselamatan dan Kesehatan Kerja ISO45001.
Yaohai Bio-Pharma, salah satu produsen teratas 10 produk biologis, adalah spesialis dalam fermentasi mikroba. Kami telah mendirikan fasilitas canggih yang dilengkapi dengan peralatan modern dan kemampuan manufaktur RD yang kuat. Kami memiliki lima jalur produksi zat obat yang mematuhi persyaratan GMP untuk fermentasi mikroba dan pemurnian, serta dua jalur pengisian otomatis untuk kartrid, botol kaca, dan suntikan prapenuhan. Skala fermentasi yang tersedia bervariasi dari 100L hingga 500L, 1000L, dan 2000L. Protokol Transkrip in vitro untuk RNA panjang untuk via adalah 1ml hingga 25ml, sedangkan spesifikasi pengisian suntikan prapenuhan dan kartrid mencakup 1-3ml. Bengkel produksi kami mematuhi cGMP dan menjamin pasokan stabil sampel klinis serta barang komersial. Pabrik kami menghasilkan molekul besar yang dikirim ke seluruh dunia.
Yaohai Bio-Pharma memiliki pengalaman dalam memproduksi biologis yang dibuat dari mikroorganisme. Kami menawarkan solusi RD khusus serta layanan manufaktur sambil meminimalkan risiko potensial. Kami telah bekerja dengan berbagai teknik, seperti subunit seluler rekombinan, vaksin (termasuk peptida), faktor pertumbuhan, hormon, dan Protokol Transkrip In vitro untuk RNA Panjang. Kami adalah spesialis dalam banyak mikroorganisme seperti sekresi ekstraseluler dan intraseluler ragi (hasil hingga 15g/L) dan bakteri larut intraseluler, serta inklusi tubuh (hasil hingga 10g/L). Kami juga telah mengembangkan platform fermentasi BSL-2 untuk membuat vaksin bakteri. Kami memiliki catatan yang terbukti dalam meningkatkan proses produksi, sehingga meningkatkan hasil dan mengurangi biaya. Kami memiliki tim teknologi yang sangat efisien untuk memastikan pengiriman proyek tepat waktu dan berkualitas tinggi. Ini membantu kami membawa produk unik Anda lebih cepat ke pasar.
Yaohai Bio-Pharma adalah pemimpin dalam Protokol Transkrip In vitro untuk CDMO RNA Panjang. Fokus utama kami telah berada pada produksi vaksinasi mikroba dan terapi untuk mengobati hewan peliharaan, kesehatan manusia, dan kesehatan veteriner. Kami memiliki platform teknologi RD dan manufaktur terdepan yang mencakup seluruh proses manufaktur, dari rekayasa strain mikroba, pengolahan perbankan sel, desain metode hingga manufaktur klinis dan komersial, memastikan bahwa kami dapat menjamin pengiriman solusi paling canggih secara sukses. Kami telah mengumpulkan sejumlah besar pengetahuan di bidang pengolahan mikroba biologis. Lebih dari 200 proyek telah berhasil diselesaikan dan kami membantu klien kami mematuhi peraturan seperti yang dari US FDA serta EU EMA. Kami juga membantu mereka bernavigasi melalui TGA Australia dan NMPA China. Karena pengalaman dan keahlian kami, kami mampu merespons dengan cepat terhadap permintaan pasar dan menawarkan layanan CDMO yang disesuaikan.