Ympyrämuotoinen RNA, tai circRNA, on tietty tyyppi RNA:ta, jolla on erilainen muoto. Kun tavallinen RNA on suoraviivainen, circRNA on pykälä. CircRNA:n rakenne on keskeinen, koska se on usein runsaasti läsnä ja osallistuu moniin tärkkien soluprosesseihin. Yksi asia on se, että ne säätelevät sitä, miten geenit ilmaantuvat, mikä voi vaikuttaa kaikkeen alkaen kehon kasvumalleistaan saakka tautiin liittyviin vastauksiimme. CircRNA:t herättävät suurta kiinnostusta tiede miehillä; niiden paremmalla ymmärryksellä voidaan avata uusia näkökulmia siitä, miten taudit kehittyvät ja miten voitaisiin löytää uusia hoito-approacheja. On kuitenkin ongelma: circRNA:t ovat erittäin pieniä ja esiintyvät usein hyvin vähissä määrin niissä näyteaineistoissa, joita tutkijat käyttävät. Tämä tekee haastavaksi saada tarpeeksi circRNA:a tutkimukseen.
Ennen kuin lopullinen perusta oli luotu circRNA:n keräämiseen, käytettiin hyvin tunnettua menetelmää nimeltä Korkean suorituskyvyn nesteseparointi tai lyhyesti HPLC. HPLC on monipuolinen tekniikka, jota käytetään erilaisten molekyylien erottelemiseen niiden fyysisten ja kemiaalisien ominaisuuksien perusteella. Se toimii erotellen molekyyliä niiden koon ja muodon perusteella. Koska circRNA:t ovat erittäin pieniä, ne voivat helposti hukkuessa tuhansien muiden molekyylien kesken näyteessä. Se tarkoittaa, että circRNA:t voidaan erottaa muista RNA:sta, proteineista ja ulkopuolisista jäteaineista, jotka saattavat olla mukana näytteessä tehokkaiden menetelmien, kuten kokemukseen perustuvan separointi (SEC), joka on HPLC-tekniikka, avulla. Se on tärkeä erotus tutkijoille, jotka tarvitsevat circRNA:n eristämistä tutkimuksensa varten.
Kun HPLC auttaa circRNA:n puhdistamisessa, sen on analysoiduttava perusteellisesti tieteilijöiden toimesta ymmärrettäväksi sen toimintoja meissä. CircRNA:t ovat noussut esiin tärkeiksi molekyyleiksi, jotka osallistuvat moniin biologisiin toimintoihin, mikä tekee perusteellisen ymmärryksen erilaisten circRNA-tyypeistä ja niiden rooleista kriittiseksi selkeyttääkseen niiden osallisuutta monipuolisissa sairauksissa. Tieteitäjät eivät tiedä puhdistetun circRNA:n järjestystä, ja he tarvitsevat sen selvittääkseen näiden roolien toiminnot. Tähän he käyttävät tekniikoita, kuten käänteistranskriptaation PCR (RT-PCR). RT-PCR:llä tieteilijät tekevät lisää kopioita circRNA:sta, jotta he voivat tutkia sitä tarkemmin. Ne ovat usein informatiivisia ja antavat tietoa siitä, miten nämä molekyylit toimivat ja mitä ne tekevät soluissamme analysoimalla circRNA-jonoja.
Tutkijat tarvitsevat palauttaa kaikki saattavansa käsiinsä joutuvan circRNA:n. CircRNA on vain pieniä määriä biologisissa näytteissä, ja HPLC voi olla apua niiden erottamisessa ja keräämisessä suuremmassa määrässä. Näin tutkijat saavat suuremman mahdollisuuden kerätä riittävästi circRNA:a kokeisiinsa ja tuottaa toimivia löytöjä. Mitä enemmän circRNA:a he voivat kerätä, sitä enemmän he voivat oppia sen toimintoista ja rooleista terveydessä ja sairauksissa.
Menetelmiä circRNA:n purkaukseen monimutkaisista biologisista materiaaleista on usein korkeakustoisia (esim. ultrafiltraatio), työläitä ja alttiita saastumiselle. CircRNA:n saanti ilman menetyksiä vaatii usein huolellista käsittelemistä ja useita vaiheita. Tässä HPLC on todella hyödyllinen. HPLC-menetelmät voivat tehdä purkamisen nopeammaksi ja tehokkaammaksi prosessiksi. Vaiheiden vähentämiseksi HPLC myös minimoi arvokkaiden näytteiden potentiaalisen menetyksen. Tämä tarkka metodi tuottaa luotettavampia tietoja ja auttaa varmistamaan, että eristetty circRNA on mahdollisimman puhdas.
CircRNA:t ovat erittäin vaikeita tutkia, ja siihen vaaditaan tieteiden ihmisten erityisen tarkka identifikaatio ja mittaaminen. Tämän tekijän perusteella HPLC ei ole ainoastaan avainaskel poistaa muita saasteita, vaan se myös takaa, että vain circRNA-molekyylit voidaan eristää, mitä parantaa circRNA-tunnistuksen spesifiteettiä ja herkkyyttä. Tämä johtaa puhtaampaan näytteeseen, mikä on tärkeää tutkimuksen tarkkuuden kannalta. CircRNA:n puhdistettu näyte auttaa tieteilijöitä olemaan luottavaisempia tuloksiinsa ja vähentää virheiden riskiä heidän tutkimuksissaan.
Yaohai Bio-Pharma on yksi 10 suurimmasta bioteknologiayrityksestä, joka erikoistuu HPLC-perustuvaan circRNA-puhdistukseen. Olemme rakennetut moderneja tuotantolaitteita vahvalla tutkimus- ja kehityskyvyllä sekä uusilla tuotantolaitoksilla. Viisi ainesaineiden tuotantolinjaa, jotka noudattavat GMP-normeja mikrobien fermointiin ja puhdistukseen liittyen, sekä kaksi täyttö- ja loppulinjaa pulloille ja kartidgeille sekä etukäteen täytetyille neuleille ovat välittömästi saatavilla. Fermointimittaukset vaihtelevat 100L ja 2000L välillä. Täytötilavuus vaihtelee 1ml:stä 25ml:een. Etukäteen täytetyt syrjat tai kartidgeet täytetään 3–3,5ml:llä. cGMP-yhteensopiva tuotantotila varmistaa vakionnetun toimituksen kliinisille näytteille ja kaupalliseen tuotteeseen. Laitoksemme tuottaa isoja molekyylejä, jotka vievät maailmanlaajuisesti.
Yaohai Bio-Pharma, mikrobien biologisten yhdisteiden circRNA-purifikaation johtaja HPLC-perusteinä, sijaitsee Jiangsussa. Keskimme on mikrobien tuottamissa terapeuuteissa ja rokotteissa, jotka sopivat ihmisten, eläinten ja lemmikkeiden terveydenhallintaan. Meillä on modernit tutkimus- ja kehitysyksiköt sekä valmistusteollisuuden teknologiaplatformit, jotka kattavat koko prosessin alusta loppuun: mikrobiologisten pölynten muokkaaminen, solupankki, prosessi- ja menetelmäkehitys sekä kaupallinen ja klinikkovalmistus, varmistaaksemme edistyneimpien ratkaisujen menestyksekäsen toimituksen. Olemme saaneet runsaasti kokemusta mikrobien bioprosessointialalla. Yli 200 projektia on toteutettu onnistuneesti, ja me autamme asiakkaitamme vastaamaan säädöksiin, kuten Yhdysvaltain FDA:n ja EU:n EMA:n vaatimuksiin. Me autamme myös heitä Australia TGA:n ja Kiinan NMPA:n kanssa. Kokemuksemme ja asiantuntemuksemme ansiosta voimme reagoida nopeasti markkinoiden tarpeisiin ja tarjota mukautettuja CDMO-palveluita.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa HPLC-perustun circRNA-puhdistuksen mikrobiologisista lähteistä. Tarjoamme mukautettuja tutkimus- ja kehitystyökaluja sekä valmistussoluita samalla minimoiden riskejä. Olemme olleet mukana monissa erilaisissa modaliteeteissa, kuten rekombinoituja subyunitteja rokotteita, peptidihoormoneja, sytokiineja kasvatekijöitä, singl-domain-antikeijoita, enzyymeja, plasmid-DNA:ta, mRNA:ta ja muita. Olemme asiantuntijoita useissa mikrobisoluissa, kuten hiivien ekstracellular- ja intracellular-tuotannossa (tuotosaste saavuttaa 15 grammaa litralta) sekä bakteerien periplasmallisen salailun ja ratkaisemattomien intracellular-inclusion-bodieiden tuotannossa (tuotosaste saavuttaa 10 grammaa/L). Lisäksi olemme kehittäneet BSL-2-mikrobisuomen alustan bakteerirokotteiden kehittämiseen. Meillä on osoitus parantaa tuotantoprosesseja, mikä korottaa tuotosasteita ja vähentää kustannuksia. Korkeasti tehokkaan teknologisteemin avulla taataan nopean ja luotettavan projektin toteutuksen, joka tuo tuotteet markkinoille nopeammin.
Yaohai BioPharma, yksi kymmenestä johtavista mikrobioittisista CDMO-yhtiöistä, jotka integroivat laadunhallinnan ja säädöstenasioiden. Laajamme laadunhallintajärjestelmä on mukana nykyisten GMP-standardeiden sekä kansainvälisten säädösten mukaisuudessa. Säädösten asiantuntijoihimme on erinomainen taito maailmanlaajuisissa säädöksissä, jotta biologisten tuotteiden markkinoiminen nopeutetaan. Varmistamme jäljitykselliset tuotantoprosessit, laadukkaat tuotteet sekä noudattamme HPLC-perustuvien circRNA-puhdistuksen ja EU:n EMA:n vaatimuksia. Australia TGA ja Kiinan NMPA vaatimukset täyttyvät myös. Yaohai BioPharma menestyi henkilökohtaisten tarkastusten aikana Euroopan Unionin (QP) kvalifioimalla henkilöllä, joka tutki GMP-järjestelmäämme ja tuotantolaitosta. Suoritimme myös ISO9001 Laadunhallintajärjestelmän ja ISO14001 Ympäristöhallintajärjestelmän alkuvarmistustarkastukset.