Glutamiin ja aspaaragiini kõrvalahedade deamidatsioon on levinud muutus, mis mõjub proteiinbiofarmatoodete omadustele. Deamidatsioon võib toimuda ka glutamiiniresiidides, kuid tavaliselt palju aeglasemalt. Deamidatsiooni kiirus sõltub temperatuurist, pH-st, lokaalsest proteiinistruktuurist ja ümbritsevatest aminohappedest.
Yaohai BioPharma pakub aminohapete deamidatsiooni testimisteenust, mis võimaldab teil tuvastada aminohapete deamidatsiooni vedelkromaatograafia-mass-spektromeetria (LC-MS) abil.
Oleme osalenud erinevate suurte molekulite, sealhulgas rekombinantsete alamühikute vaktsiinide, nanokehade/VHHde/ühe domeeni antikehade (sdAbs), antikeha fragmentide, hormoonide/peptide, sitokiinide, kasvufaktorite (CF), enzyymide, kollageenide jms, proteiinistruktuuri karakteriseerimises.
Reguleerivad nõuded aminohapete deamidatsioonile
ICH Q6B juhendite kohaselt võivad deamidatsioonivorme tuvastada ja iseloomustada kromaatografiliste, elektroforeetiliste ja/või muude seotud analüütiliste meetodite abil.
Analüütilised meetodid
| Analüüs |
Meetodid |
| Deamidatsioon |
Vedelkromaatograafia-massi-spektromeetria (LC-MS) |
Menetlused
nt aspaatse deamidatsioon
1. Enzyymiline digeerimine
2. LC-MS Kõrgejõulisel Vedelkromaatograafial (HPLC) tingimustel
3. Andmeanalüüs
Asparagiini deamidatsioon toimub suktsiimi vahemolekul (Suc) kaudu, mis on tundlik raasematsuse ja hüdrolyysiga suhtes ning annab nelja Asp izomeeri, sealhulgas L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp ja D-IsoAsp.
Teoorias võib glutamiini deamidatsioon toota neli vastavat Glu izomeerit protsessis, mis on sarnane Asn deamidatsiooniga.
Kõrge resolutsiooniga massispektromeetria võimaldab hõlpsasti tuvastada Asn/Gln- sisaldavate peptiidide ja nende vastavate deamidiseeritud vastaspoolte Asp/Glu 1-Da massivahe.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
