Circulární RNA, nebo circRNA, je specifický druh RNA, který má jiný tvar. Zatímco běžná RNA má lineární přímkovitý vzhled, circRNA je zavřená do smyčky. Struktura circRN se dále liší a je klíčová, protože obvykle jsou bohaté a účinkují ve spoustě důležitých buněčných procesů. Například regulují, jak jsou naše geny vyjádřeny, což může ovlivňovat všechno od vzorů růstu našeho těla po to, jak reagujeme na nemoci. CircRNA je velmi zajímavá pro vědce; lepší jejich porozumění může odhalit, jak vznikají nemoci, a identifikovat nové terapeutické přístupy. Ale existuje problém: circRNA jsou velmi malé a obvykle jsou přítomny v ukazatelích, které studují vědci, v velmi nízkých koncentracích. To činí obtížným shromáždit dostatek circRNA pro výzkum.
Před tím, než byl založen konečný systém pro shromažďování circRNA, byla použita již dobře zavedená metoda nazvaná Vysokoefektivní kapalná chromatografie, nebo HPLC v krátkosti. HPLC je univerzální technika používaná pro oddělování různých molekul podle jejich fyzikálních a chemických vlastností. Funguje tím, že odděluje molekuly na základě velikosti a tvaru. Protože circRNA jsou velmi malé, mohou být snadno ztraceny mezi tisíci jiných molekul v ukázce. To znamená, že circRNA mohou být odděleny od ostatních RNA, bílkovin a exogenních látek, které se mohly dostat do vzorku, pomocí efektivních metod jako je chromatografie s velikostní exkluzí (SEC), což je technika HPLC. Je to důležité oddělení pro vědce, kteří potřebují izolovat circRNA pro svá výzkumná práva.
Jakmile HPLC pomůže při čištění circRNA, musí být důkladně analyzováno vědci, aby porozuměli jejím funkcím v našem těle. CircRNA se objevila jako důležité molekuly zapojené do mnoha biologických funkcí, což dělá důkladné porozumění různým typům a rolím circRNA kritickým pro rozluštění jejich účasti v různých nemocích. Vědci neznají sekvenci vyčištěné circRNA a budou ji potřebovat, aby odhalili funkce těchto rolí. Pro tento účel používají techniky jako je reverzní transkriptase PCR (RT-PCR). Pomocí RT-PCR vědci vytvářejí další kopie circRNA, aby ji mohli studovat konkrétněji. Jsou často informativní, poskytují informace o tom, jak tyto molekuly fungují a co dělají v našich buňkách, když analyzují sekvence circRNA.
Výzkumníci musí obnovit všechny circRNA, které dokážou získat. CircRNA jsou k dispozici pouze v malých množstvích v biologických vzorcích a HPLC může být užitečné pro oddělování a sbírání většího množství těchto klíčových molekul. Tím zvyšují šanci na to, že získají dostatek circRNA pro své experimenty a vygenerují tak prakticky využitelné výsledky. Čím více circRNA budou schopni shromáždit, tím více funkcí a rolí mohou objevit v souvislosti se zdravím a nemocí.
Metody pro extrakci circRNA z komplexních biologických materiálů jsou často nákladné (například ultrafiltrace), náročné a jsou předmětem kontaminace. Dostání circRNA ven bez jakéhokoli ztrát často vyžaduje pečlivé zacházení a několik kroků. Zde je HPLC skutečně užitečná. Metody HPLC mohou udělat extrakci rychlejší a efektivnější proces. Snížením počtu kroků při extrakci také HPLC minimalizuje potenciální ztrátu cenných vzorků. Tato pečlivá metoda vytváří spolehlivější data a pomáhá zajistit, aby izolovaná circRNA byla co nejčistší.
CircRNA je velmi náročné studovat a vyžaduje, aby vědci byli při jejich identifikaci a měření neobyčejně přesní. Na základě tohoto faktoru je HPLC nejen klíčovým krokem pro odstranění ostatních kontaminantů, ale také zaručuje, že lze izolovat pouze molekuly circRNA, čímž se zvyšuje specifita a citlivost detekce circRNA. Výsledkem je čistější vzorek, což je důležité pro přesnost výzkumu. Purifikovaný vzorek circRNA pomáhá vědcům být si jistější svými výsledky a snižuje pravděpodobnost chyb v jejich studiích.
Yaohai Bio-Pharma je jedna z deseti největších biologických společností specializujících se na čištění circRNA pomocí HPLC. Postavili jsme moderní výrobní zařízení s robustními výzkumnými a vývojovými schopnostmi a moderními výrobními zařízeními. Pět produkčních linií látek podléhajících GMP normám pro mikrobiální fermentaci a čištění, spolu s dvěma linkami na vyplňování flašek a kartridžů a předvyplněných jehel, je okamžitě k dispozici. Dostupné rozměry fermentátorů se pohybují mezi 100L a 2000L. Objem vyplňování sahá od 1ml až po 25ml. Předvyplněné špetky nebo kartridže jsou vyplněny objemy 3 do 3,5ml. Naše cGMP-kompatibilní výrobní dílna zajišťuje konstantní dodávku klinických vzorků a komerčních produktů. Náš areál vyrábí velké molekuly, které jsou exportovány po celém světě.
Yaohai Bio-Pharma, vůdce v oblasti HPLC-založené purifikace circRNA z mikrobiologických látek, sídlí v provincii Jiangsu. Soustředíme se na léčivá a vakcíny produkovaná mikroorganismy, která jsou vhodná pro péči o lidské, veterinární a domácí zvířata. Máme moderní výzkumně-vývojové i výrobní technologické platformy, které pokrývají celý proces – od inženýrství mikroorganismů, bank buněk, vývoje procesů a metod až po komerční a klinickou výrobu, abychom zajistili úspěšné dodávky nejmodernějších řešení. Získali jsme bohaté zkušenosti v oblasti mikrobiologického zpracování. Bylo úspěšně dokončeno více než 200 projektů a podporujeme naše klienty při překonávání regulací, jako jsou ty americké FDA a evropské EMA. Rovněž jim pomáháme s australským TGA a čínským NMPA. Díky našemu zkušenostem a odborností můžeme rychle reagovat na tržní požadavky a nabízet přizpůsobené CDMO služby.
Yaohai Bio-Pharma je HPLC založená purifikace circRNA v mikrobiálních biologických látkách. Nabízíme přizpůsobené RD řešení i výrobní služby, zároveň minimalizujeme riziko. Byli jsme zapojeni do mnoha modalit, jako jsou rekombinantní subunitové vakcíny, peptidové hormony, cytokiny růstové faktory, jednodoménové antikoropta, enzymy, plazmidová DNA, mRNA a další. Jsme odborníky na několik mikrobiálních nositelů, jako je kvasinky extracelulární a intracelulární (výnos až 15 gramů na litr), bakteriální periplazmatická sekrece a rozpustné intracelulární inkluzióvní tělesa (výnos až 10 gramů/L). Navíc jsme vyvinuli BSL-2 mikrobiální fermentační platformu pro vývoj bakteriálních vakcín. Máme historii úspěšných vylepšení produkčních procesů, čímž zvyšujeme výnosy a snižujeme náklady. S vysokou technologickou tímovou efektivitou zaručujeme rychlé a spolehlivé dodání projektu a přivedeme vaše produkty na trh rychleji.
Yaohai BioPharma, jedna z deseti největších mikrobiologických CDMO, která integruje řízení kvality a regulační záležitosti. Naši systém kvality je v souladu s aktuálními GMP standardy a mezinárodními předpisy. Náš tým odborníků na regulace má hluboké znalosti globálních regulačních rámce pro akceleraci uvedení biologických produktů na trh. Zajišťujeme stopovatelné produkční postupy, kvalitní produkty a také dodržování požadavků HPLC-bazovaného čištění circRNA a EU EMA. Jsou také splněny požadavky Australské TGA a Čínské NMPA. Yaohai BioPharma úspěšně prošla osobní inspekční kontrolou prováděnou osoba plnící povinnosti kvalifikované osoby Evropské unie (QP) pro ověření našeho systému GMP a produkčních zařízení. Dokončili jsme také počáteční certifikační audit Systému řízení kvality ISO9001 a Systému řízení životního prostředí ISO14001.