mCherry mRNA экспрысую fluorescent protein, mCherry, якія пачаткова вывадзіліся з DsRed, белка, які знаходзіліся ў Discosoma sp. Belak mCherry дыспляўвае манамерны fluorophore, калі выклікаецца святлом з пікам эмісіі ў 610 нм. Гэта mRNA часта выкарыстоўваецца як пазітыўны кантроль у розробцы сістэм трансфекцыі і дастаўкі.
еGFP mRNA выражает улучшаную зелёную флуоресцентную белку (eGFP), якую спачатку атрымалі з медузі Aequorea victoria. Белка eGFP паказуе ярка зялёную флуорэсценцыю, калі ўдзельваецца святлом у сінім да ультрафіолетавага диапазона, з максімумам вылучэння ў 509 нм. Рыба eGFP часта выкарыстоўваецца як пазітыўны кантроль пры разрабоці сістэм трансфекцыі і дастаўкі.
mCherry-еGFP mRNA адночасова выражает абодві mCherry і eGFP.
Yaohai Bio-Pharma прасабляе неадпрацаваны ці з N1Ψ модыфікацыяй mCherry-еGFP mRNA , з структурай Cap1, аптымізаванымі кодонамі, інжынерным UTR і 110-нуклеатовым хвостам polyA, каб павялічыць стаякасць mRNA і эфектыўнасць перакладу.
Выrob
mRNA mCherry-eGFP, Cap1, хвост poly(A), неадпрацаваная ці модыфікаваная mRNA
ДЭТАЛІ ПРЫЗНАЦКА
| Выrob |
mCherry-еGFP mRNA
|
| Кат. Нум. |
mP004 |
| Змест RNA |
100 µг~10 мг (OD260) |
| Чыстасьць |
A260/A280 |
| Аднагароду і чыстата |
Электрафарэза ў агарасавай гелю (AGE) |
| 5’Капа |
Капа1 |
| 3’ poly(A) хвост |
110±5 нт |
| Мадыфікацыя баз |
Немадыфікаваны, N1Ψ |
| Буфер |
Вада без RNase (рыдна) |
| Адправка |
Дасылаць з сухім ледам; ці ў амбіентаўнай температуры |
| Храненне |
Рыдна, у або ніжэй -20°C; Ліофілізаваны порошак, у 4°C
|
| Зastosаванне |
Репартарныя гены, пазітыўны кантроль |
Іншыя дапаможныя опцыі
| 5' Кап |
● Без капа
● Cap0, спалучанае капаванне
● Cap1, спалучанае капаванне
● Кап1, энзыматычнае капіруванне
|
| 5’ UTR\/3’ UTR |
● Паслядоўнасць UTR натуральнага паходжання
● Паслядоўнасць UTR мутанта\/інжынеравана
|
| 3' ПоліA хвост |
● хвост 100A ~120A (рэкамендавана)
● Сегмэнтаваны поліA хвост
● Іншы цягамы хвост
|
| Мадифікаваныя нуклеазы |
● Незмяненыя базы,
● Псевдуюрыцын (Ψ),
● N1-Метылпсевдуюрыцын (N1Ψ),
● 5-метылцытызін (m5C),
● 5-метылуюрыцын (m5U),
● 5-метаксуюрыцын (5moU),
● 2-тыйоюрыцын (s2U),
● 2′-O-метыл-U
● Іншыя
|
падготовка mRNA і выразка ў клеткі
Узяўшы лінейны пляzmідную ДНК (pDNA), якая мае mCherry-еGFP mRNA кодуючыя гены як шаблон для IVT, мы атрымалі чыстыя транскріпты mRNA mCherry-eGFP метадам капіравання ў час транскрыпцыі і чыстення, з кап1 структурай і модыфікацыяй N1Ψ.
Чысты mRNA mCherry-eGFP (1 μg) былі адмешаны да комерчыскага трансфекцыйнага рэагенту і трансфекаваліся ў клеткі 293T у пластыку 96-х скважынаў. А пасля 48 гадзін былі выкананы сьвятлотэнтыячныя фотagraфii.
Экспрэсія mRNA mCherry-eGFP ў клетках 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
