اليوم يشعر ياوهاي بالحماس لمشاركة بروتوكول النسخ الاصطناعي الخاص به للRNA الطويل. إنها استراتيجية فعّالة يستخدمها العلماء غالبًا لإنتاج RNA في المختبر. بهذه الطريقة يمكن للمحَققين إنتاج عدد كبير جدًا من RNA الطويل - وهو أمر أساسي لدراسة مجالات بيولوجية مختلفة. هنا، نقدم دليلًا خطوة بخطوة لإعداد RNA الطويل عبر النسخ الاصطناعي. سنتحدث أيضًا عن كيفية تحسين العملية ومحاولة معالجة بعض المشكلات التي تواجهها أثناء تكوين RNA الطويل.
تحتاج عملية النسخ الاصطناعي إلى عدة مكونات أساسية، خاصةً بالنسبة لـ RNA الطويل. ستحتاج إلى إنزيم يُسمى RNA polymerase، ومادة خام على شكل ثلاثي فوسفات النوكليوتيدات (NTPs)، ومحفز كيميائي لدعم التفاعل، وبعض قوالب DNA. كيف تتم العملية خطوة بخطوة؟ يمكنك العثور على دليل تفصيلي هنا:
هناك عدة عوامل مهمة جدًا لعملية التركيب الجيدة للRNA. وأبرزها هو كمية الأيونات المغنيسيوم الموجودة في المحلول نفسه، حيث تحتاج إنزيم RNA polymerase إلى كمية كبيرة من المغنيسيوم لدعم التفاعل الصحيح مع القالب DNA وطي RNA اللاحق. العامل الثاني المهم الذي يجب أخذه في الاعتبار هو تركيز قالب DNA. تحديدًا، يجب أن يكون لديك ما يكفي من قالب DNA في التفاعل للحصول على إنتاج جيد من RNA.
بالطبع، الحمض النووي الريبي الطويل (RNA) سيأتي مع مجموعة من المشكلات الخاصة به. يمكن أن تتعلق هذه المشكلات بتفتت الحمض النووي الريبي، أو تأثيرها على طي RNA، أو تكون هياكل قد تعيق بشكل محتمل عملية التركيب الكيميائي للحمض النووي الريبي. أحد الطرق لمعالجة هذه التحديات هو تعديل المحلول الذي يتم استخدامه. وللحصول على بنية أكثر شمولًا للحمض النووي الريبي، يمكن للباحثين إضافة مواد كيميائية خاصة مثل DTT و p-mercaptoethanol لمساعدة RNA على الطي بشكل صحيح ومنعه من الالتصاق أو التكتل.
بالإضافة إلى ذلك، ليس جميع أنواع الـ RNA الطويلة متشابهة وربما يحتاج البعض منها إلى طرق تركيب بديلة. هناك خصائص خاصة قد يحتاج الباحثون إلى إضافتها إلى الـ RNA، مثل إضافة قبعة 5 أو ذيل Poly-A. إذا كان هذا ضروريًا (كما سيُشرح لاحقًا)، فيجب على الباحثين تضمين إنزيمات أخرى مثل Guanylyltransferase و Poly(A) Polymerase. كما يجب اختيار إنزيم بوليمراز RNA المناسب الذي يمكّنهم بشكل طبيعي من إنتاج المزيد من RNA. بمجرد الحاجة إلى تصنيع RNA طويل، سنحتاج إلى تحديد أفضل الظروف لتحقيق ذلك.
النسخ الاصطناعي للRNA الطويل يُستخدم في عدد من التطبيقات الرئيسية عبر عدة مجالات بحثية، وتحليلات، وجهود علاجية. فهو يساعد العلماء على فهم بنية RNA، وكيفية عمله، وكيف يمكنهم تعديل الجينات باستخدام التكنولوجيات الحديثة. وبمرور الوقت، فإن اكتشاف أمراض مختلفة وعلاجاتها مثل العلاجات القائمة على RNA - التي تُعد حديثة جدًا - يجعلنا ندرك مدى فائدة هذه التقنية في المجال الطبي.
هناك العديد من المزايا لاستخدام هذا البروتوكول. تعتبر طريقة التحليل الكهربائي عمومًا أكثر الطرق كفاءة وفعالية من حيث التكلفة لإنتاج كميات كبيرة من الحمض النووي الريبوزي الطويل. بالإضافة إلى جودة الحمض النووي الريبوزي، فإن العائد الجيد يعد أيضًا عاملًا مهمًا للباحثين لمساعدتهم في أبحاثهم، خاصة إذا كانوا بحاجة إلى كميات كبيرة من الحمض النووي الريبوزي للتجارب بسبب الحاجة إلى مواد أولية بكثافة عالية للبدء. بالإضافة إلى ذلك، يعتبر النسخ في المختبر للحمض النووي الريبوزي الطويل عادةً أكثر دقة وقابلية للتكرار مقارنة بالتركيب الكيميائي أو التركيب الخلوي للحمض النووي الريبوزي.
ياوهاي بيوفارما هي واحدة من أكبر 10 شركات CDMO الدقيقة التي تدمج بروتوكول النسخ في المختبر للRNA الطويل وكذلك الشؤون التنظيمية. لدينا نظام إدارة جودة يتماشى مع معايير GMP الحالية واللوائح العالمية. فريق خبراء الشؤون التنظيمية لدينا على دراية بالأنظمة التنظيمية العالمية لتسريع إطلاق المنتجات البيولوجية. نحن نضمن عمليات إنتاج قابلة للتتبع، ومنتجات ذات جودة عالية، وكذلك الامتثال للقواعد الخاصة بالهيئة الأمريكية للأغذية والأدوية (FDA) والهيئة الأوروبية للأدوية (EMA). كما أن الهيئة الأسترالية لتقييم الأدوية (TGA) وهيئة تنظيم الأدوية الصينية (NMPA) راضية أيضًا. لقد نجحت ياوهاي بيوفارما في اجتياز التدقيق الميداني من قبل الشخص المؤهل (QP) في الاتحاد الأوروبي لنظام الجودة الخاص بنا وفقًا لمعايير GMP ولمنشأتنا الإنتاجية. بالإضافة إلى ذلك، قدمنا بنجاح أول تدقيق للشهادات لنظام إدارة الجودة ISO9001، نظام إدارة البيئة ISO14001، ونظام إدارة الصحة والسلامة المهنية ISO45001.
ياوهاي بيو-فارما، وهي واحدة من أكبر 10 منتجين للمنتجات البيولوجية، متخصصة في التخمير المجهرى. قمنا بإنشاء منشأة متقدمة مزودة بمرافق حديثة وقدرات تصنيعية قوية في مجال البحث والتطوير. لدينا خمس خطوط لإنتاج المواد الدوائية التي تتوافق مع متطلبات GMP للتخمير والتنقية المجهرية، بالإضافة إلى خطين آليين لتعبئة الأنبوب، الزجاجات، والإبر المسبقة الملء. تتراوح أحجام التخمير المتاحة من 100 لتر إلى 500 لتر، 1000 لتر و2000 لتر. بروتوكول النسخ الريبي لـ RNA الطويل يبلغ من 1 مل إلى 25 مل، بينما تغطي مواصفات الإبر المسبقة الملء وتعبئة الأنابيب من 1-3 مل. ورشة إنتاجنا متوافقة مع cGMP وتضمن توفير العينات السريرية والمنتجات التجارية بشكل مستمر. مصنعنا ينتج الجزيئات الكبيرة التي يتم شحنها حول العالم.
لدى Yaohai Bio-Pharma خبرة في تصنيع الأدوية البيولوجية التي تُنتج من الميكروبات. نقدم حلول RD المخصصة وخدمات التصنيع مع تقليل المخاطر المحتملة. عملنا باستخدام تقنيات متنوعة مثل الوحدات الخلوية рекombinat، اللقاحات (بما في ذلك الببتيدات)، عوامل النمو، الهرمونات، وبروتوكول النسخ الريبي النووي الطويل In vitro. نحن متخصصون في العديد من الميكروبات مثل الإفراز الخلوي الخارجي والداخلي لخميرة (مع إنتاج يصل إلى 15 جم/لتر) والإذابة الداخلية للبكتيريا وأجسام الشمول (مع إنتاج يصل إلى 10 جم/لتر). كما طورنا منصة تخمير BSL-2 لإنشاء لقاحات بكتيرية. لدينا سجل حافل في تحسين عمليات الإنتاج، مما يزيد من العائد ويقلل التكاليف. لدينا فريق تقني كفؤ لضمان تسليم المشاريع في الوقت المحدد وبجودة عالية. هذا يساعدنا على تقديم منتجاتكم الفريدة إلى السوق بشكل أسرع.
ياوهاي بيو-فارما هي رائدة في بروتوكول النسخ الاصطناعي لـ RNA الطويل في مجال CDMO. كان تركيزنا الأساسي هو إنتاج اللقاحات والعلاجات الدقيقة لعلاج الحيوانات الأليفة، والصحة البشرية والبيطرية. نحن نمتلك منصات تقنية متقدمة للبحث والتطوير والإنتاج تغطي العملية الإنتاجية بأكملها، من هندسة سلالات الكائنات الدقيقة إلى معالجة بنوك الخلايا وتصميم الطرق وحتى التصنيع السريري والتجاري، مما يضمن لنا تقديم الحلول الأكثر تطوراً بنجاح. لقد جمعنا كمية كبيرة من المعرفة في مجال معالجة الكائنات الدقيقة البيولوجية. تم تنفيذ أكثر من 200 مشروع بنجاح، ونساعد عملاءنا على الامتثال للوائح مثل لوائح إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) وكذلك إدارة الأدوية والأغذية الأوروبية (EMA). كما نساعد العملاء في التعامل مع إدارة الأدوية الأسترالية (TGA) وإدارة المنتجات الطبية الوطنية الصينية (NMPA). بسبب خبرتنا ومهارتنا، يمكننا الاستجابة بسرعة لمتطلبات السوق وتقديم خدمات CDMO مخصصة.