Vandag is Yaohai so opgewondern om sy in vitro transkripsieprotokol vir lange RNA te deel. Dit is 'n doeltreffende strategie wat wetenskaplikes dikwels gebruik om RNA in die laboratorium te produseer. Op hierdie manier kan navorsers 'n beduidend groot aantal langer RNA produseer — iets wat essentieel is vir studies in verskillende biologiese velde. Hier bied ons 'n stap-vir-stap gids vir die voorbereiding van lange RNA's deur in vitro transkripsie. Ons sal ook praat oor hoe ons die proses beter kan maak en probeer sommige van die probleme wat jy ondervind wanneer jy lange RNA sintetiseer, aanspreek.
Verskeie essensiële komponente word vereis vir in vitro transkripsie, veral vir langer RNA. Jy moet 'n enzym genaamd RNA-polimerase verskaf, skryf materiaal in die vorm van nukleotied-trifosfaat (NTP's), 'n buffer om die reaksie te ondersteun, en 'n paar DNA-sjablone. Hoe om dit stap-vir-stap te doen, kan jy 'n gedetailleerde gids hier vind:
Verskeie faktore is baie belangrik vir die suksesvolle werking van die sintese van RNA. Veral die kwantiteit magnesiumione in die buffervloeistof self. RNA-polimerase vereis 'n groot hoeveelheid magnesium om gepaste interaksie met die DNA-sjabloon te ondersteun en die latere vou van die RNA. 'n Tweede belangrike aspek om in ag te neem is die konentrasie van DNA-sjabloon. Spesifiek moet jy genoeg sjabloon-DNA hê om goeie RNA-opbrengste te verkry.
Lange RNA sal natuurlik saam kom met 'n versameling van probleme. Hierdie probleme kan verband hou met die afbreek van die RNA, beïnvloed hoe die RNA vou, en strukture vorm wat moontlik ingryp met die sintese van die RNA. Een manier om hierdie uitdagings aan te spreek is deur die buffervloeistof te verander wat jy gebruik. Vir 'n omvattender struktuur van RNA, kan navorsers verskillende spesiale chemikalië soos DTT en p-merkappietanol byvoeg om die RNA korrek te laat vou en dit te voorkom dat dit aan mekaar kleef of klomp.
Daarby is nie al lange RNA-tipes dieselfde nie en sommige mag alternatiewe sintese-metodes vereis. Daar is spesiale kenmerke wat navorsers moontlik in die RNA moet voeg, soos byvoorbeeld die toevoeging van 'n 5' hoed of 'n Poly-A stert. As dit nodig is (soos later verduidelik word), moet navorsers ander ensieme insluit soos Guanylyltransferase en Poly(A) Polymerase. Men moet ook 'n geskikte RNA polymerase-ensiem kies wat hul naturally in staat stel om meer RNA te produseer. So gou as langer RNA gesintetiseer moet word, sal ons die beste toestande daarvoor moet bepaal.
Lange RNA in vitro transkripte. Daar is 'n aantal sleutelgebruike vir die protokol van lange RNA in vitro transkripte oor verskeie navorsings-, toets- en terapeutiese ondernemings. Dit help wetenskapers om die struktuur van RNA, die manier wat dit opereer, en hoe hulle gene kan wysig met kontemporêre tegnologieë, te verstaan. Elke dag word die ontdekking van verskeie siekte en hul terapies, soos baie hedendaagse RNA-terapies, ons bewus hoe nuttig hierdie lees-in-tegnologie vir geneeskunde kan wees.
Daar is baie voordele om hierdie protokol te gebruik. 'n Elektroforesis-gebaseerde metode is gewoonlik die mees doeltreffende en koste-effektiewe manier om groot hoeveelhede langer RNA te produseer. Behalwe die kwaliteit van die RNA, is 'n goeie opbrengs ook 'n belangrike faktor vir navorsers om hulle te help met hul navorsing, veral as hulle groot hoeveelhede RNA vir eksperimente nodig het weens hoë invoermateriaal wat nodig is om te begin. Daarnaast is in vitro transkripsie vir langer RNA tipies akkurater en herhaalbaar as chemiese sintese of sellulêre sintese van RNA.
Yaohai BioPharma is een Top 10 Mikrobiële CDMO wat die In vitro Transkripsieprotokol vir Lange RNA asook regulêre sake gebruik. Ons kwaliteitsbestuursstelsel is in ooreenstemming met huidige GMP-standaarde sowel as wêreldwye regulasies. Ons span van regulêre deskundiges is bekwaam in wêreldwye regulêre raamwerke om die lansering van biologiese produkte te versnelling. Ons verseker spoorbare vervaardigingsprosesse, kwaliteitsprodukte en dat ons ooreenstem met die voorskrifte van die US FDA en EU EMA. Australië se TGA en China se NMPA is ook tevrede. Yaohai BioPharma het suksesvol die plaaslike audit van die Europese Unie se Gevalideerde Persoon (QP) vir ons GMP-kwaliteitsstelsel en onse vervaardigingsfasiliteit deurgekom. Verder het ons die eerste sertifiseringsaudits van die ISO9001 Kwaliteitsbestuursstelsel, ISO14001 Omgewingbestuursstelsel en ISO45001 Beroepsgeondheid-en Veiligheidsbestuursstelsel voltooi.
Yaohai Bio-Pharma, een van die top 10 produsente van biologiese produkte, is 'n spesialis in mikrobiële fermering. Ons het 'n gevorderde fasiliteit opgerig wat uitgerus is met moderne fasiliteite en sterk RD-vervaardigingsvermoëns. Ons het vyf aktiewe farmasieutiese stowwe vervaardigingslyne wat ooreenstem met GMP vereistes vir mikrobiële fermering en verrening, sowel as twee outomatiseerde vul-lyslyne vir patrone, flacons sowel as voorafgevulde spruitjies. Die beskikbare fermerskaal varieer van 100L tot 500L, 1000L en 2000L. In vitro Transkripsieprotokol vir lange RNA vir via's is 1ml tot 25ml, terwyl die voorafgevulde spruitjies en patroonvulspeifikasies 1-3ml dek. Ons produksiewerkswinkel is cGMP ooreenstemmend en verseker 'n konstante voorsiening van kliniese monsters sowel as kommersiële items. Ons plaas produseer groot molekulêre stowwe wat na die wêreld verskaf word.
Yaohai Bio-Pharma het ervaring in die vervaardiging van biologiese stowwe wat van mikroorganismes afkomstig is. Ons bied op maat gemaakte RD-oplossings asook vervaardigingsdienste terwyl ons moontlike risiko's minimaliseer. Ons het met verskeie tegnieke gewerk, soos rekombinante sellulêre subeenhede, vakseen (insluitend peptiede), groeifaktore, hormone en die In vitro Transkripsieprotokol vir Lange RNA. Ons is 'n spesialis in baie mikroorganismes soos gist buite- en binnekellsekreksie (opbrengste tot 15g/L) en bakteriële binnekellsolubiliteit, en inklusiebody (opbrengste tot 10g/L). Ons het ook 'n BSL-2 fermentasieplatform ontwikkel om bakteriële vakseen te skep. Ons het 'n geskiedenis van die verbetering van produksieprosesse, waarmee opbrengste verhoog word en koste verminder word. Ons het 'n hoëtydige tegnologie-span om tydige en hoë-kwaliteitsaflewering van projekte te verseker. Dit help ons om jou unieke produkte vinniger op die mark te bring.
Yaohai Bio-Pharma is 'n leier in In vitro Transcript Protokol vir Lang RNA CDMO. Ons hoof fokus was die produksie van mikrobiële vaksinasies en terapeutika om hulpetjies, mense en veterinêre gesondheid te behandel. Ons besit skerpvoorendige RD- en vervaardigingstegnologieplatforms wat die hele vervaardigingsproses dek, vanaf die ingenieurswese van mikrobiële stamme, tot selbankverwerking en metodeontwerp tot kliniese en kommersiële vervaardiging, om seker te stel dat ons die suksesvolle levering van die voorste oplossings kan verseker. Ons het 'n groot hoeveelheid kennis in die mikrobiële bioproessingsveld opgespoor. Meer as 200 projekte is suksesvol voltooi en ons help ons kliënte om aan regulasies soos dié van die US FDA sowel as die EU EMA te voldoen. Ons help hulle ook om Australië TGA en China NMPA te navigeer. Ons kan vlugtig op markbehoeftes reageer en gespesialiseerde CDMO-diens insake aanbied weens ons ervaring en kundigheid.