Hôm nay Yaohai rất hào hứng khi chia sẻ giao thức chuyển lục in vitro cho RNA dài. Đây là một chiến lược hiệu quả mà các nhà khoa học thường sử dụng để sản xuất RNA trong phòng thí nghiệm. Bằng cách này, các nhà nghiên cứu có thể sản xuất một số lượng lớn RNA dài - điều này rất cần thiết cho việc nghiên cứu trong nhiều lĩnh vực sinh học khác nhau. Ở đây, chúng tôi cung cấp hướng dẫn từng bước để chuẩn bị RNA dài thông qua quá trình chuyển lục in vitro. Chúng tôi cũng sẽ thảo luận về cách cải thiện quy trình và cố gắng giải quyết một số vấn đề bạn gặp phải khi tổng hợp RNA dài.
Một số thành phần thiết yếu cần thiết cho quá trình chuyển lục in vitro, đặc biệt là RNA dài. Bạn sẽ cần cung cấp một enzym gọi là polymerase RNA, vật liệu viết dưới dạng nucleotide triphosphates (NTPs), một chất đệm để hỗ trợ phản ứng, và một số mẫu DNA. Cách thực hiện từng bước, bạn có thể tìm thấy hướng dẫn chi tiết tại đây:
Một số yếu tố rất quan trọng đối với việc hoạt động tốt của quá trình tổng hợp RNA. Nổi bật nhất là lượng ion magie trong chính chất đệm là quan trọng. Enzym polymerase RNA cần một lượng lớn Magie để hỗ trợ tương tác đúng cách với mẩu DNA và gấp nếp RNA tiếp theo. Một khía cạnh quan trọng khác cần xem xét là nồng độ DNA mẫu. Cụ thể, bạn phải có đủ DNA mẫu phản ứng để đạt được năng suất RNA tốt.
RNA dài, tất nhiên, sẽ đi kèm với một loạt các vấn đề riêng của nó. Những vấn đề này có thể liên quan đến sự phân giải của RNA, ảnh hưởng đến cách RNA gập lại, và tạo ra các cấu trúc có khả năng can thiệp vào quá trình tổng hợp RNA. Một cách để đối phó với những thách thức này là điều chỉnh chất đệm mà bạn sử dụng. Để có được cấu trúc RNA toàn diện hơn, các nhà nghiên cứu có thể thêm các hóa chất đặc biệt khác nhau như DTT và p-mercaptoethanol để giúp RNA gập đúng cách và ngăn ngừa việc chúng dính vào nhau hoặc kết tụ.
Ngoài ra, không phải tất cả các loại RNA dài đều giống nhau và một số có thể yêu cầu phương pháp tổng hợp thay thế. Có những đặc điểm đặc biệt mà các nhà nghiên cứu có thể cần thêm vào RNA, chẳng hạn như thêm nắp 5' hoặc đuôi Poly-A. Nếu điều này là cần thiết (như sẽ giải thích sau) thì các nhà nghiên cứu nên bao gồm các enzym khác như Guanylyltransferase và Poly(A) Polymerase. Người ta cũng cần chọn một enzym polymerase RNA phù hợp, vốn tự nhiên giúp họ sản xuất nhiều RNA hơn. Ngay khi RNA dài cần được tổng hợp, chúng ta sẽ cần xác định điều kiện tốt nhất.
Bản sao RNA dài in vitro có nhiều ứng dụng quan trọng trong các nghiên cứu, xét nghiệm và nỗ lực điều trị. Nó giúp các nhà khoa học hiểu rõ hơn về cấu trúc của RNA, cách nó hoạt động và cách họ có thể sửa đổi gen bằng các công nghệ hiện đại. Ngày càng có nhiều phát hiện về các bệnh khác nhau và liệu pháp điều trị của chúng, như liệu pháp RNA hiện đại, cho chúng ta thấy công nghệ đọc này hữu ích như thế nào cho y học.
Có rất nhiều lợi thế khi sử dụng giao thức này. Phương pháp dựa trên điện di thường là cách hiệu quả và tiết kiệm chi phí nhất để sản xuất số lượng lớn RNA dài. Ngoài chất lượng của RNA, năng suất tốt cũng là một yếu tố quan trọng đối với các nhà nghiên cứu để hỗ trợ họ trong công việc nghiên cứu, đặc biệt nếu họ cần một lượng lớn RNA cho các thí nghiệm do yêu cầu đầu vào ban đầu cao. Ngoài ra, quá trình phiên mã in vitro cho RNA dài thường chính xác và tái hiện được hơn so với tổng hợp hóa học hoặc tổng hợp RNA trong tế bào.
Yaohai BioPharma là một trong 10 công ty CDMO vi sinh hàng đầu, tích hợp Giao thức Chuyển Script In vitro cho RNA dài cũng như các vấn đề quản lý. Chúng tôi có hệ thống quản lý chất lượng tuân thủ theo tiêu chuẩn GMP hiện hành và các quy định toàn cầu. Đội ngũ chuyên gia quản lý của chúng tôi thành thạo các khung pháp lý toàn cầu để đẩy nhanh việc ra mắt các sản phẩm sinh học. Chúng tôi đảm bảo quá trình sản xuất có thể truy xuất nguồn gốc, sản phẩm chất lượng cao và tuân thủ các quy định của US FDA và EU EMA. Australia TGA và China NMPA cũng đã hài lòng. Yaohai BioPharma đã thành công vượt qua cuộc kiểm tra tại chỗ của Người Có Chức Năng Hợp Cách (QP) của Liên Minh Châu Âu đối với hệ thống chất lượng GMP và cơ sở sản xuất của chúng tôi. Hơn nữa, chúng tôi đã vượt qua các cuộc kiểm toán chứng nhận đầu tiên của Hệ thống Quản lý Chất lượng ISO9001, Hệ thống Quản lý Môi trường ISO14001 và Hệ thống Quản lý An toàn Sức khỏe Nghề nghiệp ISO45001.
Yaohai Bio-Pharma, một trong mười nhà sản xuất hàng đầu về sản phẩm sinh học, là chuyên gia trong lĩnh vực lên men vi sinh. Chúng tôi đã thiết lập một cơ sở tiên tiến được trang bị các thiết bị hiện đại và có khả năng sản xuất mạnh mẽ về nghiên cứu và phát triển (RD). Chúng tôi có năm dây chuyền sản xuất chất dược phẩm tuân thủ theo yêu cầu GMP cho quá trình lên men và tinh chế vi sinh, cùng với hai dây chuyền đóng gói tự động dành cho ống tiêm, lọ và kim tiêm đã được điền sẵn. Quy mô lên men có sẵn dao động từ 100L đến 500L, 1000L và 2000L. Giao thức chuyển bản in vitro cho RNA dài cho vias có dung tích từ 1ml đến 25ml, trong khi đó các thông số điền vào của kim tiêm đã được điền sẵn và ống tiêm bao gồm từ 1-3ml. Xưởng sản xuất của chúng tôi tuân thủ cGMP và đảm bảo cung cấp ổn định các mẫu lâm sàng cũng như sản phẩm thương mại. Nhà máy của chúng tôi sản xuất các phân tử lớn được vận chuyển trên toàn thế giới.
Yaohai Bio-Pharma có kinh nghiệm trong việc sản xuất sinh phẩm được tạo ra từ vi sinh vật. Chúng tôi cung cấp các giải pháp RD theo yêu cầu cũng như dịch vụ sản xuất đồng thời tối thiểu hóa các rủi ro tiềm ẩn. Chúng tôi đã làm việc với nhiều kỹ thuật khác nhau, chẳng hạn như tiểu đơn vị tế bào tái tổ hợp, vắc-xin (bao gồm peptit), yếu tố tăng trưởng, hormone và Giao thức Chuyển Kịch Bản In vitro cho RNA Dài. Chúng tôi là chuyên gia về nhiều loại vi sinh vật như tiết lộ ngoài tế bào và trong tế bào của men (hiệu suất lên đến 15g/L) và khả năng hòa tan trong tế bào và khối bao gồm của vi khuẩn (hiệu suất lên đến 10g/L). Chúng tôi cũng đã phát triển một nền tảng lên men BSL-2 để tạo ra vắc-xin vi khuẩn. Chúng tôi có lịch sử cải tiến quy trình sản xuất, từ đó tăng hiệu suất và giảm chi phí. Chúng tôi có một đội ngũ công nghệ hiệu quả cao để đảm bảo giao dự án đúng thời hạn và chất lượng cao. Điều này giúp chúng tôi đưa sản phẩm độc đáo của bạn nhanh hơn đến thị trường.
Yaohai Bio-Pharma là một nhà lãnh đạo trong lĩnh vực Giao thức Chuyển Kịch In vitro cho RNA Dài CDMO. Trọng tâm chính của chúng tôi là sản xuất vắc xin và liệu pháp vi sinh để điều trị thú cưng, sức khỏe con người và thú y. Chúng tôi sở hữu các nền tảng công nghệ nghiên cứu và phát triển (RD) và sản xuất tiên tiến nhất, bao gồm toàn bộ quy trình sản xuất từ việc thiết kế chủng vi sinh, xử lý ngân hàng tế bào và phương pháp đến sản xuất lâm sàng và thương mại, đảm bảo rằng chúng tôi có thể cung cấp thành công các giải pháp hiện đại nhất. Chúng tôi đã tích lũy được một lượng lớn kiến thức trong lĩnh vực xử lý sinh học vi sinh. Hơn 200 dự án đã được hoàn thành thành công và chúng tôi giúp khách hàng tuân thủ các quy định như của US FDA cũng như EU EMA. Chúng tôi còn hỗ trợ họ điều hướng qua Australia TGA và China NMPA. Nhờ kinh nghiệm và chuyên môn của mình, chúng tôi có khả năng đáp ứng nhanh chóng nhu cầu thị trường và cung cấp dịch vụ CDMO tùy chỉnh.