Utforska den Fascinerande Världen av Lithiumkloridprecipitering

Lithiumkloridprecipitering används allmänt för att separera RNA från lösning.

Här är hur processen går till:

1. Provförberedelse: Börja med ett prov som innehåller RNA, såsom in-vitro transkriptblandning.

2. Tillägg av lithiumklorid: Lägg till en lämplig volym av koncentrerad lithiumkloridlösning i RNA-lösningen.

3. Inkubering: Efter att ha lagt till lithiumklorid inkuberas lösningen vid låg temperatur, vanligen runt -20°C. Detta orsakar att RNA-molekyler precipiterar ur lösningen.

4. Centrifugeringssteg: Efter inkubering centrifugeras lösningen på hög hastighet. Detta separerar den precipiterade RNA:n från resten av lösningen, som innehåller orenheter.

5. Spölning: När centrifugeringssteg är klart, ta bort supernatanten försiktigt utan att störa RNA-precipitationen. Spola RNA-partiklarna med kall etanol eller isopropylalkohol för att ta bort eventuella återstående orenheter.

6. RNA upplösning: Efter tvättning lufttorkas RNA-nedfallningen kort och sedan upplöses den i en lämplig buffer, som till exempel TE-buffer (Tris-EDTA-buffer) eller destillerat vatten. Mjukt pipettering eller virvelströmningar kan krävas för att tillräckligt upplösa RNA:n.

7. Kvantifiering och analys: Slutligen kvantifieras det isolerade RNA:t med ultraviolett spektroskopi eller fluorescensmetod. Detta bestämmer koncentrationen och renheten av RNA-provet, vilket är viktigt för efterföljande tillämpningar såsom LNP inkapsling och celltransfektion.

Yaohai Bio-Pharma är skicklig i att använda jodkloridnedfallsmetoden i produktionsprocessen eftersom den är enkel, kostnadseffektiv och producerar högkvalitativt RNA som är lämpligt för en mängd molekylärbiologiska tillämpningar. Dock är det viktigt att optimera villkoren (t.ex., jodkloridkoncentration, inkuberingstid, centrifugeringssnabbhet) för att uppnå bästa resultat för ett visst prov.

Vi baserar oss på vår kraftfulla och egna RNASci-plattform och erbjuder också anpassade RNA-syntes tjänster, samt mRNA (upp till 10 kb), circRNA (upp till 4 kb) och LNP-katalogprodukter. Vi har etablerat en komplett uppsättning av mRNA/circRNA-syntestekniker för att erbjuda högkvalitativ RNA, såsom sekvensdesign och optimering, IVT, cirkulärisering, reningsprocess och LNP-inkapsling. Alla produkter släpps under strikta kvalitetskontrollstandarder.

Yaohai Bio-Pharma är det första och största biologiska CRDMO:t som specialiserar sig på mikrobiella uttryckssystem i Större Kina. Vi erbjuder slutna, anpassade lösningar eller enskilda tjänster som sträcker sig från RNA-syntes, stamcellskonstruktion och -utveckling, till processutveckling upstream och downstream, samt GMP- eller icke-GMP-nivå produktion av aktiva farmacevtiska ingredienser (API) och fyllnings-/slutförings tjänster för olika modaliteter, såsom mRNA, circRNA, plasmid RNA, rekombinanta proteiner, peptider, enzym, singeldomänantikroppar (sdAbs) och VLPs. Vi är dedikerade till att uppfylla våra globala kunders behov inom klinisk och kommersiell produktion av biologiska läkemedel, vaccin och diagnostik, både för människor och veterinärbruk.

Yaohai Bio-Pharma söker också aktivt efter institutionella eller enskilda globala partner och erbjuder de mest konkurrenskraftiga ersättningarna inom branschen. Om du har några frågor, tveka inte att kontakta oss: [email protected]