Idag är Yaohai så upphetsad att dela sin in vitro transkriptionsprotokoll för lång RNA. Det är en effektiv strategi som forskare ofta använder för att producera RNA i labbet. På detta sätt kan forskare producera ett betydligt större antal långa RNA:n – något som är avgörande för studier inom olika biologiska områden. Här ger vi en steg-för-steg-guide för förberedelsen av långa RNA:n via in vitro transkription. Vi kommer också att prata om hur vi kan göra processen bättre och försöka hantera vissa av de problem ni möter vid syntesen av lång RNA.
Flera nödvändiga komponenter krävs för in vitro transkription, speciellt när det gäller lång RNA. Du måste tillhandahålla en enzym som heter RNA polymeras, skrivmaterial i form av nukleotidtrifosfat (NTP:er), en buffer för att hjälpa reaktionen, och lite DNA-mall. Hur man gör det steg för steg kan du hitta en detaljerad guide här:
Flera faktorer är mycket viktiga för den goda fungeringen av RNA-syntesen. Framför allt är mängden magnesiumjoner i bufferten själv viktig. RNA-polymerasen kräver en stor mängd magnesium för att stödja den korrekta interaktionen med DNA-mallen och efterföljande vikningen av RNA. En annan viktig aspekt att överväga är koncentrationen av DNA-mall. Specifikt måste du ha tillräckligt med mall-DNA i reaktionen för att få bra RNA-utslag.
Lång RNA kommer naturligtvis med sina egna problem. Dessa problem kan röra sig kring nedbrytningen av RNA, påverka hur RNA vikar sig och bildar strukturer som potentiellt kan störa synteasen av RNA. En metod för att möta dessa utmaningar är att justera bufferten du använder. För en mer omfattande struktur av RNA kan forskare lägga till olika specialkemikalier såsom DTT och p-merkaptoetanol för att hjälpa RNA att vika korrekt och förhindra att den klister ihop eller klumpar.
Dessutom är inte alla långa RNA-typer lika och vissa kan kräva alternativa syntesmetoder. Det finns specialfunktioner som forskare kanske behöver lägga till i RNA:n, såsom att lägga till en 5-hatt eller en Poly-A-svans. Om detta behövs (som förklaras senare) bör forskare inkludera andra enzym som Guanylyltransferase och Poly(A) Polymerase. Man måste också välja ett lämpligt RNA polymerase-enzym som naturligt gör det möjligt att producera mer RNA. Så snart lång RNA måste syntetiseras måste vi identifiera de bästa villkoren.
Långa RNAs in vitro-transkript Det finns en mängd viktiga användningsområden för protokollet för långt RNA in vitro-transkript inom flera forsknings-, analys- och terapeutiska verksamheter. Det hjälper forskare att förstå RNA:s struktur, hur den fungerar och hur de kan modifiera gener med moderna teknologier. Varje dag upptäcks nya sjukdomar och deras behandlingar, som de aktuella RNA-terapierna, vilket visar hur användbart detta läsningsteknik kan vara för medicinen.
Det finns många fördelar med att använda detta protokoll. En elektroforesbaserad metod är generellt sett den mest effektiva och kostnadseffektiva metoden för att producera stora mängder lång RNA. Utöver kvaliteten på RNA är en bra utbyte också en viktig faktor för forskare för att hjälpa dem med sina studier, särskilt om de behöver stora mängder RNA för experiment på grund av hög inmatningsmaterial från början. Dessutom är in vitro-transkription av lång RNA vanligtvis mer exakt och reproducerbar än kemisk syntes eller cellsyntes av RNA.
Yaohai BioPharma är en av de tio främsta mikrobiella CDMO:erna som införlivar In vitro Transcript Protocol för lång RNA samt regeringsärenden. Vi har ett kvalitetsmanagement-system som överensstämmer med aktuella GMP-standarder och globala regler. Vår grupp av expertreglerare är skicklig i globala regelverk för att påskynda lanseringar av biologiska produkter. Vi säkerställer spårbara produktionsprocesser, kvalitetsprodukter och efterlevnad av reglerna från US FDA och EU EMA. Australien TGA och Kina NMPA är också nöjda. Yaohai BioPharma har framgångsrikt gått igenom platsgranskningen av den europeiska unionens Kvalificerade Person (QP) för vårt GMP-kvalitetsystem och vår produktionsanläggning. Dessutom har vi klarat de första certifieringsgranskningarna av ISO9001 Kvalitetsmanagementsystem, ISO14001 Miljöhanteringssystem och ISO45001 Arbetsmiljöhälso- och säkerhetsmanagementsystem.
Yaohai Bio-Pharma, en av de tio främsta producenterna av biologiska produkter, är specialist inom mikrobiell fermentation. Vi har etablerat ett avancerat anläggning utrustat med moderna faciliteter och starka RD-produktionsförmågor. Vi har fem substansproduceringslinjer som överensstämmer med GMP-kraven för mikrobiell fermentation och renadning, samt två automatiserade fyllningslinjer för kartuscher, flaskor och förutfyllda spritorna. De tillgängliga fermenteringsskalerna varierar mellan 100L till 500L, 1000L och 2000L. In vitro Transkriptionsprotokoll för lång RNA för via är 1ml till 25ml, medan specifikationerna för förutfyllda syringor och kartuscher täcker 1-3ml. Vår produktionsverkstad är cGMP-kompatibel och garanterar en stabil leverans av kliniska prov och kommersiella artiklar. Vårt verk producerar stora molekyler som skickas ut över hela världen.
Yaohai Bio-Pharma har erfarenhet av att tillverka biologiska produkter som skapas från mikroorganismer. Vi erbjuder skräddarsydda RD-lösningar samt tillverknings tjänster samtidigt som vi minimerar potentiella risker. Vi har arbetat med olika tekniker, såsom rekombinant cellulära subenheter, vaccin (inklusive peptider), växtfaktorer, hormoner och In vitro Transkriptionsprotokollet för Lång RNA. Vi är specialister inom många mikroorganismer som jästextracellulär och intracellulär sekretion (uppgifter upp till 15g/L) och bakteriell intracellulär löslig och inklusionskropp (uppgifter upp till 10g/L). Vi har också utvecklat en BSL-2 fermenteringsplattform för att skapa bakteriella vaccin. Vi har en historik av att förbättra produktionsprocesser, därmed öka uppgiften och minska kostnaderna. Vi har ett högeffektivt teknikteam för att säkerställa tidig och högkvalitativ leverans av projekt. Detta hjälper oss att bringa era unika produkter snabbare till marknaden.
Yaohai Bio-Pharma är en ledare inom in vitro transkriptionsprotokoll för lång RNA CDMO. Vår huvudfokus har varit produktion av mikrobiella vacciner och terapeutiska medel för att behandla husdjur, människor och veterinärhälsovetenskap. Vi besitter framgångsrika RD- och tillverknings teknologiplattformar som täcker hela tillverkningsprocessen från mikrobergsstrainsjukvård, till cellbankbehandling och metoddesign till klinisk och kommersiell tillverkning, vilket säkerställer att vi kan garantera framgångsrik leverans av de mest avancerade lösningarna. Vi har ackumulerat ett stort antal kunskaper inom det mikrobiella biobearbetningsfältet. Mer än 200 projekt har lyckats avslutas och vi hjälper våra kunder att följa regler såsom de från US FDA samt EU EMA. Vi hjälper dem också att navigera Australien TGA och Kina NMPA. Tack vare vår erfarenhet och expertis kan vi snabbt reagera på marknadens krav och erbjuda anpassade CDMO-tjänster.