Plazmid: Mali krugovi DNA molekula sa velikim potencijalom

Plazmidi, mali kružni molekuli DNA, služe kao ključni vektori za rekombinaciju DNA u istraživanjima molekularne biologije i genetskoj terapiji. Rezultat i kvalitet plazmida su od ključne važnosti, pri čemu su omjer superuvitka i sadržaj endotoksinova dva značajna faktora koji utiču na kvalitet plazmida.

Podtipovi plazmida

Plazmidi izvučeni iz Escherichia coli (E. coli) postoje u različitim podtipovima: superuviti (SC), otvoreno kružni (OC) i linearni (L) oblici (Slika 1). Među njima, superuvitak plazmid ima odličnu stabilnost, antigeničnost i visoku efikasnost transfekcije i ekspresije.

Slika 1. Shematski dijagram običnih podtipova plazmida

U elektroforezi plazmidnog DNA u agaroznom gełu, redosled brzine migracije je superuvitak DNA, linearni DNA i otvoreno kružni DNA (Slika 2).

Slika 2. Obrazac migracije u agaroznoj gel elektroforezi različitih podtipova plazmida

Yaohai Bio-Pharma je neprestano unapređivalo svoje procese i tehnike kako bi osiguralo da je proporcija superkoidnih plazmida za transfekciju ≥85%, a za istraživačke plazmode ≥50%. Sledeći je primer prikaza (Slika 3), gde se agarozni gelektroforezi kombinuje sa softverom Gel-Pro Analyzer za detekciju proporcije superkoidnih plazmida.

Slika 3. Rezultati provere kvaliteta proporcije superkoidnih plazmida

Endotoxin

Endotoksin, komponenta stenosne zidove Gram-negativnih bakterija, uglavnom se sastoji od lipopolisaharida A (LPS-A) kao svoje toksične komponente. Tijekom izvlačenja plazmida, endotoksin se otpušta u lizat rješenje, što može znatno utjecati na učinkovitost transfekcije plazmida u stanice. Pored toga, može aktivirati nespecifične imunološke odgovore stanica, što može dovesti do lažno pozitivnih rezultata u eksperimentima.

Yaohai Bio-Pharma primenjuje pristup "bez uvođenja" i "visokog uklanjanja", strogo kontrolisanjem korišćenja reaktiva i materijala koji sadrže endotoksin tijekom cijelog procesa čišćenja. Kompanija je takođe razvila efikasan metod za uklanjanje endotoksina, ponuđujući tri nivoa sadržaja endotoksina: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg i ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma poseduje visokoprugu liniju usluga za izvlačenje plazmida, sposobnu da dostavi 1 mg izvučenih plazmida već za jedan tjedan. Po zadatu, pruža više od sedam testova kontrole kvaliteta (QC) kako bi osigurala dostavu visokokvalitetnih, standardizovanih plazmida iz više perspektiva.

Takođe aktivno tražimo globalne parcele, institucionalne ili individuelne. Ponudili smo najbolju kompenzaciju u industrijи. Ako imate bilo kakva pitanja, slobodno nas kontaktirajte: [email protected]