Plasmid: Et liten sirkulær DNA-molekyl med stor potensial

Plasmider, små sirkulære DNA-molekyler, fungerer som viktige vektorer for DNA-rekombinasjon i molekylærbiologisk forskning og geneterapi. Avlingen og kvaliteten på plasmidene er avgjørende, hvor supertrukket andel og endotoksininnhold er to betydelige faktorer som påvirker plasmidkvaliteten.

Plasmidundertyper

Plasmider ekstrahert fra Escherichia coli (E. coli) finnes i ulike undertyper: supertrukket (SC), åpent sirkulært (OC) og lineært (L) former (Figur 1). Blant disse viser supertrukkede plasmider fremragende stabilitet, antigenisitet og høy transfeksjons- og uttrykks-effektivitet.

Figur 1. Skisse av vanlige plasmidundertyper

Ved agarosegel-elektroforese av plasmid-DNA er migrasjonsfarten i følgende rekkefølge: supertrukket DNA, lineært DNA og åpent sirkulært DNA (Figur 2).

Figur 2. Migrasjonsmønster ved agarosegel-elektroforese av ulike plasmidundertyper

Yaohai Bio-Pharma har kontinuerlig forbedret sine prosesser og teknikker for å sikre at andelen superkjedet av transfeksjonsgrad plasmider er ≥85% og at andelen av forskningsgrad plasmider er ≥50%. Følgende er et eksempel (figur 3), der agarosegelelektroforese kombineres med Gel-Pro Analyzer-programvaren for å oppdage andelen superkjedet.

Figur 3. Kvalitetskontrollresultater av plasmidens superkjedet andel

Endotoxin

Endotoksin, en komponent i celleveggen til gramnegative bakterier, består hovedsakelig av lipopolysaccharide A (LPS-A) som dens giftige komponent. Under plasmiduttrekk slipper endotoksin ut i lysatloesningen, noe som sterkt påvirker effektiviteten ved plasmidtransfeksjon i celler. Dessuten kan det aktiver non-spesifikke immunresponser i cellene, noe som fører til falske positive resultater i eksperimentene.

Yaohai Bio-Pharma bruker en "ikke-introduksjon" og "høy fjerning"-metode, og kontrollerer strengt bruken av reaktiver og materialer som inneholder endotoxin gjennom hele reneseprosessen. Selskapet har også utviklet en effektiv metode for å fjerne endotoxin, og tilbyr tre nivåer av endotoxin-innhold: ≤0.1 EU/µg, ≤0.01 EU/µg, og ≤0.005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma har en høydekthroughput-plasmiduttrekkservice, som kan levere 1 mg uttrekte plasmider på bare en uke. Som standard tilbyr den mer enn syv kvalitetskontrolltester (QC) for å sikre levering av høykvalitets-, høystandardplasmider fra flere perspektiver.

Vi søker også aktivt globale partnere, både institusjonelle og enkeltpersoner. Vi tilbyr den mest konkurransedyktige kompensasjonen i bransjen. Hvis du har noen spørsmål, ikke nøl med å kontakte oss: [email protected]