I dag er det så oppsiktsvekkende at Yaohai deler sin protokoll for in vitro transkriptering av lange RNA. Dette er en effektiv strategi som forskere ofte bruker for å produsere RNA i laboratoriet. På denne måten kan forskere produsere et betydelig større antall lange RNA – noe som er essensielt for studier innen forskjellige biologiske felt. Her gir vi en trinn-for-trinn-guide for forberedelsen av lange RNA gjennom in vitro transkriptering. Vi vil også snakke om hvordan vi kan forbedre prosessen og forsøke å behandle noen av problemene du møter under syntesen av lange RNA.
Flere nødvendige komponenter kreves for in vitro-transkriptering, spesielt lange RNA. Du må ha en enzyme som kalles RNA-polymerase, skrivemateriale i form av nukleotidtrifosfat (NTP-er), en buffer for å bistå reaksjonen, og litt DNA-mal. Hvordan gjøre det trinn for trinn, kan du finne en detaljert guide her:
Flere faktorer er veldig viktige for at syntesen av RNA skal fungere godt. Spesielt er mengden magnesiumioner i bufferen selv viktig. RNA-polymerasen krever en betydelig mengde magnesium for å støtte den riktige interaksjonen med DNA-mal og etterfølgende folding av RNA. En annen viktig aspekt å ta hensyn til er konsentrasjonen av DNA-malen. Spesifikt må du ha nok mal-DNA i reaksjonen for å få gode RNA-utbytter.
Lang RNA vil naturligvis komme med sine egne sett med problemer. Disse problemene kan relatere seg til nedbrytingen av RNA, påvirke hvordan RNA bretter seg, og bygge opp strukturer som potensielt kan forstyrre syntesen av RNA. En måte å håndtere disse utfordringene på er ved å justere bufferten du bruker. For en mer omfattende struktur av RNA kan forskere legge til ulike spesialkjemikalier som DTT og p-merkaptetanol for å hjelpe RNA til å brette riktig og forhindre at den kleber sammen, eller klumper.
I tillegg er ikke alle lange RNA-typene like, og noen kan kreve alternative syntese-metoder. Det finnes spesielle trekk som forskere kanskje må legge til i RNA-et, for eksempel ved å legge på en 5'-hode eller en Poly-A-hale. Hvis dette er nødvendig (som forklart senere), bør forskerne inkludere andre enzym som Guanylyltransferase og Poly(A)-Polymerase. Man må også velge et passende RNA-polymerase-enzym som naturligvis lar dem produsere mer RNA. Så snart langt RNA må sintetiseres, må vi identifisere de beste betingelsene.
Lange RNAs in vitro-transkript Er det flere nøkkeltjenester for protokollen for langt RNA in vitro-transkript over flere forsknings-, test- og terapeuttiske tiltak. Det hjelper vitenskapsmenn til å forstå strukturen på RNA, hvordan den fungerer og hvordan de kan modifisere gener med moderne teknologier. Oppdagelsen av flere sykdommer og deres terapiformer, som de nyeste RNA-terapiene, lar oss tro på hvor nyttig denne lesingen-teknologien kan være for medisin.
Det er mange fordeler med å bruke dette protokollt. En elektroforese-basert metode er generelt den mest effektive og kostnadsnyttige måten å produsere store mengder lang RNA på. Utover kvaliteten på RNA, er en god utbytte også en viktig faktor for forskere for å støtte dem i deres forskning, spesielt hvis de trenger store mengder RNA for eksperimenter på grunn av høy innputtmengde allerede fra start. I tillegg er in vitro-transkripsjon av lang RNA typisk mer nøyaktig og gjentakelig enn kjemisk syntese ellerzellbasert syntese av RNA.
Yaohai BioPharma er en av de 10 største mikrobielle CDMO-ene som bruker In vitro Transcript-protokoll for lang RNA samt reguleringsspørsmål. Vi har et kvalitetsstyringssystem som er i overensstemmelse med gjeldende GMP-standarder og globale regler. Vår gruppe av reguleringsexperter er dyktige innen globale reguleringssammenhenger for å akselerere biologiske lanseringer. Vi sikrer sporbar produksjonsprosesskvalitet, produkter og overholdelse av reglene fra US FDA og EU EMA. Australia TGA og Kina NMPA er også tilfreds. Yaohai BioPharma har vellykket passert plasskontrollen av Den europeiske unionens Kvalifiserte Person (QP) for vårt GMP-kvalitetsystem og vår produksjonsanlegg. Videre har vi bestått de første sertifiseringsauditten av ISO9001 Kvalitetsstyringssystem, ISO14001 Miljøstyringssystem og ISO45001 Arbeidshelsesikkerhetssystem.
Yaohai Bio-Pharma, en av de ti største produsentene av biologiske produkter, er spesialist i mikrobiell fermering. Vi har etablert et fremragende anlegg som er utstyrt med moderne faciliteter og sterke RD-fremstillingskapasiteter. Vi har fem stoffproduserte linjer som oppfyller GMP-kravene for mikrobiell fermering og renasjon, samt to automatiserte fylle-linjer for karuseller, fløier og preutfylte sprutepipetter. De tilgjengelige fermerskalaene varierer fra 100L til 500L, 1000L og 2000L. In vitro Transkriptprotokoll for lang RNA for viaer er fra 1ml til 25ml, mens spesifikasjonene for preutfylte sprutepipetter og karuseller dekker 1-3ml. Vår produksjonsverksted er cGMP-kompatibelt og garanterer stabil leveranse av kliniske prøver og kommersielle varer. Vår fabrikk produserer store molekyler som distribueres over hele verden.
Yaohai Bio-Pharma har erfaring med å lage biologiske produkter som er laget av mikroorganismer. Vi tilbyr skreddersyede RD-løsninger og produksjonstjenester samtidig som vi minimerer potensielle risikoer. Vi har jobbet med ulike teknikker, såsom rekombinante cellulære subenheter, vaksiner (inkludert peptider), vekstfaktorer, hormoner og In vitro Transkriptprotokoll for Lang RNA. Vi er spesialister i mange mikroorganismer som gjen og innvardssekretering av gjerme (opptil 15g/L) og bakteriell innvardsbar løselighet og inklusjonslegemer (opptil 10g/L). Vi har også utviklet en BSL-2 fermentasjonsplattform for å lage bakterielle vaksiner. Vi har et sporeregister av å forbedre produksjonsprosesser, dermed øke utbyttet og redusere kostnadene. Vi har et høyeffektivt teknisk team for å sikre tidsmessig og høykvalitets leveranse av prosjekter. Dette hjelper oss med å få dine unike produkter raskere på markedet.
Yaohai Bio-Pharma er en leder innen in vitro transkriptprotokoll for lang RNA CDMO. Vår hovedfokus har vært produksjon av mikrobielle vaksiner og terapi til behandling av dyr, mennesker og veterinærhelse. Vi besitter fremmede RD- og produksjons teknologiplattformer som dekker hele produksjonsprosessen fra utforming av mikrobielle strenekker, til cellebankbehandling og metodeutforming til klinisk og kommersiell produksjon, for å sikre at vi kan garantere vellykket levering av de mest avanserte løsningene. Vi har akkumulert et stort mengde kunnskap innenfor mikrobiell bioprosessering. Over 200 prosjekter har blitt vellykket fullført, og vi hjelper våre kunder med å oppfylle regelverk som dem fra US FDA samt EU EMA. Vi hjelper dem også med å navigere gjennom Australia TGA og Kina NMPA. På grunn av vår erfaring og ekspertise, er vi i stand til å reagere raskt på markedets behov og tilby tilpassede CDMO-tjenester.