Hari ini Yaohai begitu bersemangat untuk berkongsi protapnya bagi transkripsi in vitro RNA panjang. Ia adalah strategi yang berkesan yang kerap digunakan oleh saintis untuk menghasilkan RNA di makmal. Dengan cara ini, penyelidik boleh menghasilkan jumlah besar RNA panjang — sesuatu yang penting untuk kajian dalam pelbagai bidang biologi. Di sini, kami menyediakan panduan langkah demi langkah untuk penyiapan RNA panjang melalui transkripsi in vitro. Kami juga akan membincangkan bagaimana kami boleh membaiki proses tersebut dan cuba menyelesaikan beberapa masalah yang anda hadapi dalam sintesis RNA panjang.
Beberapa komponen penting diperlukan untuk transkripsi in vitro, terutamanya RNA panjang. Anda perlu menyediakan enzim yang dipanggil polimerase RNA, bahan mentah dalam bentuk nukleotida trifosfat (NTPs), penyangga untuk membantu tindak balas, dan beberapa templat DNA. Bagaimana untuk melakukan langkah demi langkah, anda boleh mendapatkan panduan terperinci di sini:
Beberapa faktor sangat penting untuk berfungsi dengan baik dalam sintesis RNA. Paling mencolok, kuantiti ion magnesium dalam buffer sendiri adalah perkara penting. Polimerase RNA memerlukan jumlah Magnesium yang besar untuk menyokong interaksi yang betul dengan templat DNA dan lipatan seterusnya RNA. Aspek kedua yang penting untuk dipertimbangkan adalah kepekatan templat DNA. Secara spesifik, anda mesti mempunyai cukup reaksi templat DNA untuk mendapatkan hasil RNA yang baik.
RNA panjang, tentu saja, akan datang dengan siri masalahnya sendiri. Masalah-masalah ini boleh berkaitan dengan pemecahan RNA, mempengaruhi cara RNA melipat, dan membentuk struktur-struktur yang mungkin mengganggu sintesis RNA. Satu cara untuk menyelesaikan cabaran ini adalah dengan menyesuaikan penyangga yang anda gunakan. Untuk struktur RNA yang lebih komprehensif, penyelidik boleh menambah bahan kimia istimewa yang berbeza seperti DTT dan p-merkaptoetanol untuk membantu RNA melipat dengan betul dan menghalang ia dari melekat bersama-sama atau membeku.
Selain itu, tidak semua jenis RNA panjang adalah sama dan beberapa mungkin memerlukan kaedah sintesis alternatif. Terdapat ciri-ciri khas yang mungkin perlu ditambahkan oleh penyelidik dalam RNA, seperti menambah topi 5 atau ekor Poly-A. Jika ini diperlukan (seperti yang dijelaskan kemudian), maka penyelidik harus menyertakan enzim lain seperti Guanylyltransferase dan Poly(A) Polymerase. Seseorang juga perlu memilih enzim polimerase RNA yang sesuai yang secara semula jadi membolehkan mereka menghasilkan lebih banyak RNA. Sebaik sahaja RNA panjang perlu disintesis, kita perlu mengenalpasti keadaan terbaik.
Transkrip RNA panjang in vitro. Terdapat beberapa penggunaan utama bagi protokol transkrip RNA panjang in vitro di pelbagai bidang penyelidikan, ujian, dan terapi. Ia membantu para saintis memahami struktur RNA, cara ia beroperasi, dan bagaimana mereka boleh mengubah gen dengan teknologi moden. Semakin banyak hari ini - penemuan pelbagai penyakit dan terapi mereka seperti terapi RNA yang sangat semasa - membiarkan kita percaya betapa bergunanya teknologi pembacaan ini untuk perubatan.
Terdapat banyak kelebihan dalam menggunakan protokol ini. Kaedah berdasarkan elektroforesis biasanya adalah cara yang paling cekap dan kos-efektif untuk menghasilkan kuantiti besar RNA panjang. Selain kualiti RNA, hasil yang baik juga merupakan faktor penting bagi penyelidik untuk membantu mereka dengan penyelidikan mereka, terutamanya jika mereka memerlukan kuantiti besar RNA untuk eksperimen kerana bahan input yang tinggi diperlukan pada permulaan. Selain itu, transkripsi in vitro untuk RNA panjang biasanya lebih tepat dan boleh diulang berbanding sintesis kimia atau sintesis selular RNA.
Yaohai BioPharma adalah salah satu CDMO Mikro 10 Teratas yang menggabungkan Protokol Transkrip In vitro untuk RNA Panjang serta urusan peraturan. Kami mempunyai sistem pengurusan kualiti yang sepadan dengan piawaian GMP semasa serta peraturan global. Pasukan pakar peraturan kami mahir dalam kerangka peraturan global untuk mempercepatkan pelancaran biologi. Kami memastikan proses pengeluaran yang boleh dilacak, produk berkualiti, serta mematuhi peraturan US FDA dan EU EMA. Australia TGA dan China NMPA juga berpuas hati. Yaohai BioPharma telah berjaya melalui pemeriksaan di tapak oleh Orang Berkuasa (QP) Kesatuan Europa bagi sistem kualiti GMP kami serta kilang pengeluaran kami. Selain itu, kami telah lulus audit sertifikasi pertama bagi Sistem Pengurusan Kualiti ISO9001, Sistem Pengurusan Alam Sekitar ISO14001, dan Sistem Pengurusan Kesihatan dan Keselamatan Pekerjaan ISO45001.
Yaohai Bio-Pharma, salah satu pengeluar produk biologi teratas 10, adalah spesialis dalam pemfermentasi mikrob. Kami telah mendirikan sebuah kemudahan moden yang dilengkapi dengan peralatan moden dan keupayaan pembuatan RD yang kuat. Kami mempunyai lima garis pengeluaran bahan ubat yang mematuhi keperluan GMP untuk pemfermentasi mikrob dan pemurnian, serta dua garis pengisian automatik untuk kartrij, botol kaca, dan suntikan pra-isian. Skala fermentasi yang tersedia bervariasi dari 100L hingga 500L, 1000L dan 2000L. Protokol Transkrip In Vitro untuk RNA panjang bagi via adalah 1ml hingga 25ml, manakala spesifikasi pengisian suntikan pra-isian dan kartrij meliputi 1-3ml. Bengkel pengeluaran kami mematuhi cGMP dan menjamin bekalan stabil sampel klinikal serta item komersial. Pabrik kami menghasilkan molekul besar yang dieksport ke seluruh dunia.
Yaohai Bio-Pharma mempunyai pengalaman dalam mengeluar produk biologi yang dicipta daripada mikroorganisma. Kami menawarkan penyelesaian RD tersuai serta perkhidmatan pengeluaran sambil meminimumkan risiko yang mungkin berlaku. Kami telah bekerja dengan pelbagai teknik, seperti subunit sel rekombinan, vaksin (termasuk peptida), faktor pertumbuhan, hormon, dan Protokol Transkrip In vitro untuk RNA Panjang. Kami adalah pakar dalam banyak mikroorganisma seperti sekretori ekstraseluler dan intraseluler ragi (pengeluaran hingga 15g/L) dan bakteria larut intraseluler, dan badan termasuk (pengeluaran hingga 10g/L). Kami juga telah membangunkan platform fermentasi BSL-2 untuk mencipta vaksin bakteria. Kami mempunyai rekod yang baik dalam membaiki proses pengeluaran, meningkatkan pengeluaran dan mengurangkan kos. Kami mempunyai pasukan teknologi yang sangat cekap untuk memastikan penghantaran projek tepat masa dan berkualiti tinggi. Ini membantu kami membawa produk anda yang unik lebih pantas ke pasaran.
Yaohai Bio-Pharma adalah pemimpin dalam Protokol Transkrip In vitro untuk CDMO RNA Panjang. Fokus utama kami telah berada pada penghasilan vaksin mikroba dan terapi untuk memperlakukan haiwan peliharaan, kesihatan manusia dan veterinar. Kami memiliki platform RD dan teknologi pengeluaran terkini yang menutupi seluruh proses pengeluaran dari kejuruteraan strain mikroba, kepada pemprosesan bankan sel dan reka bentuk kaedah hingga pengeluaran klinikal dan komersial, memastikan bahawa kami dapat menjamin penghantaran berjaya penyelesaian paling canggih. Kami telah mengumpulkan jumlah besar ilmu dalam bidang pemprosesan mikroba biologi. Lebih daripada 200 projek telah berjaya diselesaikan dan kami membantu pelanggan kami mematuhi peraturan seperti yang dikeluarkan oleh US FDA serta EU EMA. Kami juga membantu mereka untuk menavigasi TGA Australia dan NMPA China. Kami mampu merespon dengan pantas kepada keperluan pasaran dan menawarkan perkhidmatan CDMO tersuai disebabkan oleh pengalaman dan kecekapan kami.