Производња на рекомбинантни белки: Инженерирани страни E. coli

Escherichia coli (E. coli) има значителна улога во производството на рекомбинантни протеини во биофармацевската индустрија, служејќи како прв експресен вектор за производство на биолошки лекови. E. coli се карактеризира со брз раст, лесна генетска манипулација и брзо синтезирање на рекомбинантни протеини, меѓу другите предности. Проширени модификацији го наведуваат E. coli како оптимален избор за експресија на протеини, што доведува до дизајн на различни инженерски страни на E. coli.

Yaohai Bio-Pharma се специјализира во осигување услуги на еден стан за ферментација, чистење, развој на формула и производство на серија од биофармацевтички продукти користејќи E. coli експресни системи. Според широкиот искуство на Yaohai, ја сумираме дека четири обични страни на E. coli се користат за производство на рекомбинантни протеини и нивните карактеристики.

BL 21 strain

Произведена од линијата E. coli B, штамбата BL21 нема протеаза Лон и внатрешна мембрана протеаза OmpT. Протеазата Лон главно деградира екзогенни белки, додека OmpT главно деградира белки од екстрацелуларната матрица. Отсустствието на овие две клучни протеази може ефективно да спречи деградацијата на рекомбинантни белки.

Штамбата Origami

Штамбата Origami, која е дериват од E. coli K-12, има мутации во тиоредоксин редуктазата и глутатион редуктазата, што олеснува формирањето на правилно складирани белки со ди сульфидни врски и зголемува растворливоста на белките. Штамбите Origami, вклучувајќи Origami, Origami 2 и Origami B, се прилагодени за експресија на активни белки со ди сульфидни врски.

Штамбата SHuffle

SHuffle штамата конститутивно изразува дисулфидни изомераза DsbC во цитоплазмот, што го подобрува формирањето на правилните дисулфидни врски во оксидирани протеини. Освен тоа, служи како молекуларен чаперон за фолдирање на протеините, помагајќи во формирањето на правилната конформација.

Rosetta штама

Штамата Rosetta дополнува E. coli со tRNA кои одговараат на ретки кодони, со цел да подобри нивото на експресија на екзогени гени, особено евкариотски гени, во прокариотски системи. Произведена од BL21 и носачка на хлорамфеникол-резистентен плаzmид pRARE, таа дополнува шест tRNA кои одговараат на ретки кодони (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, и GGA) кои почетно недостасуваат во E. coli, осигурвајќи повеќе "универзална" експресија на протеини.

Заклучок

Три главни фактори за успешна производство на рекомбинантни протеини се домашин, вектор и условите на културата. На основа на разбирање на физико-хемискиот природен карактер на рекомбинантниот протеин, уникалните предности на секоја штамба и специфичните потреби на експериментот, треба да се избере најсоодветниот домашин. Понатаму, факторите како плазмидни вектори, температурата и индукторите треба да се оптимизираат за подобрување на изразот на протеинот.

Yaohai Bio-Pharma исто така активно ги бара светските партнерски институции или индивидуални партнери и нуди најконкурентното вознаграждување во индустријата. Ако имате било кои прашања, слободно ни kontaktirajte: [email protected]