Контрола на квалитет и применето на рекомбинантни белки

Контролата на квалитетот на рекомбинантните протеини е од суштинско значење за надежноста и воспроизводивоста на експерименталните податоци. Секој чекор, од дизајнирањето на проект до производствениот процес, бара строги стратегии за контрола на квалитетот.

Стратегии за Контрола на Квалитет

Индустријата следи строги стандардни оперативни процедури, додека академската заедница треба да го зголеми професионалниот знаење за да ја подобри воспроизводивоста на податоците. Протеините со специфични биолошки апликации или биохемски карактеристики бараат прилагодени стратегии за контрола на квалитет (QC).

Примери со Изазови и Решенија

Yaohai Bio-Pharma се похвали со широка искуство во производството и очиштувањето на рекомбинантни протеини, како и со тим од експерти, што осигурува дека вашето производство на протеини ќе се заврши со високата чистота. Со нашето искуство од стотици проекти, Yaohai лако резумира како да се оптимизира очиштувањето на протеините.

Протеини кои се поврзани со нуклеински ациди: Стапките за премахнување на нуклеини ациди, како што се нуклеази или ПЕИ прашевитие, се неопходни. Односот А260нм/А280нм се надгледува за да се засече контаминација од нуклеини ациди.

Мишов Феритин Тешка Ланца 1 за крио-ЕМ: Стапките за чистење мора да бидат оптимизирани, и мора да се додадат нуклеази за да се намали односот А260нм/А280нм и за да се осигура чистота на протеинот.

Хибридни Протеини Човечки dsRBEC: Лизирањето на ќелијата користи бафер кој содржи уреа, следен од рефолдинга на колоната за да се добијат функционално активни протеини.

Протеини Кои Се Биндуваат со Дивалентни Катиони: Постојат специфични дивалентни катиони кои мора да се додадат во време на експресија и чистење, и треба да се избегнуваат хелатни агенти.

Железо-Сулфур Протеини: Имидазолот треба да се избегнува за да се спречи разбијањето на [2Fe ± 2S] кластерот, осигуривајќи правилна фолding и функција на протеинот.

Разтворлив Фрагмент на LLT1: Дизајнот на мутант го оптимизира формирањето на ди суфидни врски и фолдиранјето на протеин, што резултира со стабилни и протеини со висока добивка.

Кристализација на Киназа CLK1: Со-експресијата со λ-фосфатаза ја премахува фосфатот од фосфилираните места, а хроматографијата со размерна ексклузија (SEC) и аналионска хроматографија се користат за да се добие хомоген CLK1 без нехомогена фосфилирација.

Протеини за употреба како антиген: Оценката на чистота е неопходна за да се избегне контаминација со высоки имуногени протеини. За структурни епитопски антитела, трешеродимензионалната конформација на антигена мора да биде задржана.

Протеини склони кон агрегација: Стратегии како што се тестирање на различни страни и намалување на температурата на култивација се користат за ограничување на проблемите со агрегација, а брзи стратегии за чистење се дизајнирани.

Премахнување на ендотоксини: Методите како што се позитивно наелектрирана хроматографија и афинитетна хроматографија со поликацион лиганд премахнуваат ендотоксини, осигурвувајќи дека нивните на ЛПС се под применувачките граници.

Протеински комплекси: Подединиците се изразуваат посебно и се монтираат in vitro или се ко-изразуваат за формирање на функционални комплекси. Интегритетот на комплексот се оценува според хомогеноста и моларната маса.

Заклучок

Производството на протеин почнува со стратегски дизајн, земајќи предвид биохемските карактеристики и апликациите. Во текот на изразувањето, чистењето и КЧ, условите и методите се оптимизирани за стабилност, без агрегација и природен стан. Чистени протеини служат за различни последни употреби, како што е биофизичката karakterizacija.

Yaohai Bio-Pharma исто така активно ги бара светските партнерски институции или индивидуални партнери и нуди најконкурентното вознаграждување во индустријата. Ако имате било кои прашања, слободно ни kontaktirajte: [email protected]