Plazmīds: mazs apļains DNS molekuls ar lielu potenciālu

Plazmidu, mazas apļveida DNS molekulas, izmanto kā būtiskus vektorus DNS rekombinācijai molekulu bioloģijas pētījumos un gēnu terapijā. Plazmidu raža un kvalitāte ir būtiskas, ar diviem nozīmīgiem faktoriem, kas ietekmē plazmidu kvalitāti, būdami superlīstības proporcija un endotoksīnu saturs.

Plazmīdu apakštipsi

No Escherichia coli (E. coli) izgatavotie plazmidi eksistē dažādos apakštipos: superlīstība (SC), atvērta apļveida (OC) un lineāra (L) forma (Attēls 1). No tiem superlīstīgie plazmidi parāda lielisku stabilitāti, antigēnisko darbību un augstu transfekcijas un izpausmes efektivitāti.

Attēls 1. Parastu plazmīdu apakštipu shēmas

Plazmīdu DNS agarosa želelektrofoze šķīdināšanas ātruma secība ir superlīstības DNS, lineāras DNS un atvērtas apļveida DNS (Attēls 2).

Attēls 2. Dažādu plazmīdu apakštipu agarosa želelektrofozes šķīdināšanās modelis

Yaohai Bio-Pharma nepārtraukti uzlabo savus procesus un tehnoloģijas, lai nodrošinātu, ka transfekcijas kvalitātes plazmidu superkrēto proporcija ir ≥85% un pētnieciskās kvalitātes plazmidu superkrēto proporcija ir ≥50%. Zemāk redzam piemēra demonstrāciju (Figūra 3), kur agarosa želelektrofoze tiek kombinēta ar Gel-Pro Analyzer programmatūru, lai noteiktu superkrēto proporciju.

Figūra 3. Plazmida superkrēto proporcijas kvalitātes pārbaudes rezultāti

Endotoxīni

Endotoksiņš, kas ir sastāvdaļa no Gram-negatīvo baktēriju šūnu sienas, galvenokārt sastāv no lipopolisaharīda A (LPS-A) kā no tās toksiskās daļas. Plazmīdu izņemšanas laikā endotoksiņš tiek atbrīvots lizēšanas risinājumā, smagi ietekmējot plazmīdu transfekcijas efektivitāti šūnās. Turklāt tas var aktivizēt nespecifiskas imūnreakcijas šūnās, kas var izraisīt falsifikācijas eksperimentos.

Yaohai Bio-Pharma izmanto "neieredzēto" un "augstu noņemšanas" metodi, strikti kontrollējot reaģentu un materiālu izmantošanu, kas satur endotoksinus, visā šķīdināšanas procesā. Uzņēmums ir arī izstrādājis efektīvu endotoksīnu noņemšanas metodi, piedāvājot trīs endotoksīna saturs līmeņus: ≤0,1 EU/µg, ≤0,01 EU/µg un ≤0,005 EU/µg.

Yaohai Bio-Pharma ir augstas caurumības plazmidu izcirtšanas pakalpojumu līnija, kas spēj piegādāt 1 mg izcirtušo plazmidu jau vienu nedēļu. Pēc noklusējuma tā veic vairāk nekā septiņas kvalitātes kontroles (QC) pārbaudes, lai nodrošinātu augstas kvalitātes un standarta plazmidu piegādi no dažādiem aspektiem.

Mēs aktīvi meklējam globālus partnerus, gan iestāžu, gan personīgu līmenī. Mēs piedāvājam nozīmē spēcīgāko atalgojumu. Ja jums ir jebkādas jautājumi, lūdzu, nerozdomājiet mūs sazināties: [email protected]