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プラスミド:小さな円形のDNA分子でありながら大きな可能性を持つ

Feb 14, 2025

プラスミドは、小さな円形のDNA分子であり、分子生物学研究や遺伝子治療におけるDNA再組合せのための重要なベクターとして機能します。プラスミドの収量と品質は非常に重要で、スーパーコイル比率とエンドトキシン含有量がプラスミドの品質に影響を与える2つの主要な要因です。

プラスミドのサブタイプ

エシェリヒア・コリ(E. coli)から抽出されたプラスミドは、さまざまなサブタイプとして存在します:スーパーコイル型(SC)、開いた円形型(OC)、および線状型(L)形式(図1)。その中でも、スーパーコイル型のプラスミドは優れた安定性、抗原性、高い転染効率および発現効率を持っています。

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図1. 一般的なプラスミドサブタイプの模式図

プラズミドDNAのアガロースゲル電気泳動では、移動速度の順序はスーパーコイルDNA、線状DNA、開いた円形DNAとなります(図2)。

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図2. 異なるプラズミドサブタイプのアガロースゲル電気泳動移動パターン

ヤオハイ バイオファーマは、プロセスと技術を継続的に改善し、トランスフェクショングレードのプラスミドにおける超螺旋構造の割合が≥85%、研究用グレードのものが≥50%であることを確実にしています。以下はケースデモンストレーション(図3)であり、アガロースゲル電気泳動とGel-Pro Analyzerソフトウェアを組み合わせて超螺旋構造の割合を検出しています。

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図3. プラスミドの超螺旋構造の品質検査結果

エンドトキシン

エンドトキシンは、グラム陰性菌の細胞壁の成分であり、その毒性成分は主にリポ多糖A(LPS-A)で構成されています。プラスミド抽出中にエンドトキシンが溶解液に放出され、細胞へのプラスミドトランスフェクション効率に深刻な影響を与えます。さらに、それは細胞内の非特異的な免疫応答を活性化し、実験において偽陽性を引き起こす可能性があります。

ヤオハイ・バイオファーマは「導入せず」「高除去」のアプローチを採用し、精製プロセス全体でエンドトキシンを含む試薬や材料の使用を厳密に管理しています。また、効率的なエンドトキシン除去法を開発し、3段階のエンドトキシン含有量を提供しています:≤0.1 EU/µg、≤0.01 EU/µg、および ≤0.005 EU/µg。

ヤオハイ・バイオファーマは高スループットのプラミド抽出サービスラインを保有しており、最短1週間で1 mgの抽出プラミドを提供可能です。デフォルトでは、複数の観点から高品質で高标准のプラミドを確実に届けるため、7つ以上の品質管理(QC)テストを実施しています。

また、グローバルな機関や個人のパートナーを求めています。私たちは業界で最も競争力のある報酬を提供しています。質問がある場合は、お気軽にお問い合わせください: [email protected]