ייצור חלבונים רקורסנטיים: אצילי E. coli מעוצבים

Escherichia coli (E. coli) שיחק תפקיד משמעותי מכריע בהפקת חלבונים רקורסנטיים בתעשיית הביופרמצב, והיה לוקטור הביטוי הראשון להכנת תרופות ביולוגיות. ל-E. coli יש יתרונות כמו צמיחה מהירה, מניפולציה גנטית קלה וסינתזה מהירה של חלבונים רקורסנטיים. שינויים נרחבים הפכו את E. coli לבחרה אידיאלית להבעת חלבונים, מה שהוביל לעיצוב מגוון סטראינים מוגנים של E. coli.

Yaohai Bio-Pharma מתמחה בהספקת שירותים של Outsourcing מלא לפיתוח תהליכי התזוזה, טיהור, ופורמולציה והפקה של סדרה של תרופות ביולוגיות באמצעות מערכות ביטוי של E. coli. בהתייחס לחוויה הרחבה של Yaohai, סיכמנו שאף על פי כן ארבעה סטראינים נפוצים של E. coli משמשים לייצור חלבונים רקורסנטיים ואת התכונות שלהם.

הסוכן BL 21

נגזר מהקו B של E. coli, הסוגה BL21 חסרת פפטידאז לון והפפטידאז הממברנה החיצונית OmpT. פפטידאז לון מפרק בעיקר חלבונים זרים, בעוד ש-OmpT מפרק בעיקר חלבונים של המטריצה החצונית. חוסר הפפטידאזות העיקריות הללו יכול למנוע בצורה יעילה את התפרקות החלבונים הרכיביים.

סוגה Origami

הסוגה Origami, נגזרת של E. coli K-12, מחזיקה ב MUTATIONS בתאוריוקסין רדוקטאז וגלוטאתיון רדוקטאז, אשר מסייעות בהיווצרותן של חלבונים מקוונים באופן תקין המכילים קשרים דיסולפידיים ומעלות את פתיחיות החלבונים. הסוגה Origami, כולל את Origami, Origami 2 ו-Origami B, מתאימות לביטוי חלבונים פעילים המכילים קשרים דיסולפידיים.

סוגה SHuffle

השכבה SHuffle בוחנת באופן קבוע את האיזומראזת קשרי הסולפיד DsbC בציטופלזמה, מה שמשפר את ייצור הקשרים הנכונים של קשרי הסולפיד בחלבונים חמצניים. היא גם משמשת כמלווה מולקולרי להרכבת חלבונים, עוזרת בהצגת הצורה הנכונה.

השכבה Rosetta

השכבה Rosetta משלימה את E. coli עם tRNA המתאימים לקדונים נדירים, במטרה לשפר את רמת ההבעה של גנים חיצוניים, במיוחד גנים אוקריוטיים, במערכות פרוקריוטיות. נגזרת מ-BL21 ומחזיקה בפלסמיד pRARE העמיד בחלוראמפניקול, שמשלים שש tRNA מתאימים לקדונים נדירים (AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, ו-GGA) שאינם קיימים מקודם ב-E. coli, מספקת "הבעה כוללת" יותר של חלבונים.

מסקנות

ה三個 הגורמים העיקריرئيسיים ליצירת מוצלחת של חלבונים רקורסיביים הם המארח, וקטור והתנאים התרבותיים. על סמך הבנה של התכונות הפיזיקו-כימיות של החלבון הרקורסיבי, יתרונותיו הייחודיים של כל אסטרין והתדרים הספציפיים של הניסוי, יש לבחור את המארח המתאים ביותר. בנוסף, יש לשפר גורמים כמו וקטורים פלסמידים, טמפרטורה ומגבירים כדי להעלות את ביטוי החלבון.

יאוהאי ביופרמה מחפשת גם כן שותפים גלובליים, מוסדיים או אישיים, ומציעה את התשלום הקומפטיטיבי ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא/Setezesist ליצור איתנו קשר: [email protected]