מגינים על שיטות מודיפיקציה של RNA דוחה

כשOOSE איזה שיטה של תיקון mRNA דוחה מועדפת, אין תשובה סופית כיוון שכל שיטה וגן דוחה יש להן יתרונות משלהן וסצנריוטים מתאימים. הנה כמה שיטות נפוצות לתיקון mRNA וגנים דוחים, יחד עם התכונות והתאמה שלהם.

שיטות תיקון mRNA

מתילציה:

1. m6A : קשורה ליציבות mRNA, חיתוך, תרגום, ועיבוד miRNA. אתגרי זיהוי כוללים בחירת אנטיבד ולקיחת מיקום.
2. 5' Cap Nm : מגבירה יציבות, חיתוך, פוליאדיניליון, וייצוא גרעיני. עוזרת להבדיל בין RNA עצמי ל-RNA זר.
3. פסודוורידינלציה : משנה קודונים, מגבירה יציבות, ומשתתפת בתגובה לסגנון. מוקטלה על ידי סינתזות פסודוורידין.

הוספת נוקלאוטידים לא טבעיים:

1. נכנס במהלך הטרנסקריפציה באמצעות אסטרטגיה של שינוע כימי כפול. זה מגדיל את יציבותו, האפקטיביות והבעת חלבונים.

גניםנין דיווח

1. גן חלבון פלורסנטי ירוק (GFP) : יתרונות: קל לאיתור, תכונות פלורסנטיות יציבות, אינו רעיל לתאים, מתאים לצילום תאים חיים. חסרונות: עוצמת פלורסנציה מוגבלת.
2. חלבון פלורסנטי ירוק מופעל (eGFP) : יתרונות: מאיר יותר ב-6 פעמים מאשר GFP בר קיימא, מה שמאיר אותו מתאים יותר כגן דיווח למחקר ביטוי גנים, תקינה, השכבה של תאים ועיבוד ומיקום חלבונים בתוך אורגניזמים.
3. חלבונים פלורסנטיים אדומים (לדוגמה, mCherry) : יתרונות: אורך גל להלם ופלורסנציה ארוכים יותר, מה שגורם להקטנת הרקע במהלך צילום תוך תאי, בהירות פלורסנציה מצוינת ויציבות פוטו גבוהה, ורעלות תאית נמוכה יותר. חסרונות: עשוי להיות פחות בשימוש מאשר GFP בתנאים מסוימים של ניסוי.
4. לוקיפראז של שרף : יתרונות: בהימצאות ATP, יונים של מגנזיום ואוקסיגן, הוא יכול להניע את חמצון הלוציפרין לאוקסלוציפרין, תוך שחרור ביולומינסנציה. הוא מתאים לשימוש כשליטה כדי ללמוד על יעילות התרגום של גנים מטריים בתאים מאנושיים, תקינות התאים, ובדיקות צילום חי.

מסקנות

כשOOSE איזה שיטה של תיקוני mRNA דיווח היא מועדפת, זה תלוי באובייקטים ניסויים ספציפיים, רקע מחקר ותנאים ניסויים. למשל, אם נדרש רגישות גבוהה, eGFP עשוי להיות בחירה טובה יותר. אם נדרש צילום בגלים ארוכים יותר כדי להפחית섭ך רקע, חלבונים פלואורסנטיים אדומים כמו mCherry עשויים להיות מתאימים יותר. בנוסף, בהתבסס על הצרכים הספציפיים לתיקון mRNA (למשל, העלה יציבות, שיפור יעילות תרגום), ניתן לבחור בשיטת תיקון המתאימה.

כחברת ה-CRDMO הראשונה והגדולה ביותר לביולוגיים מיקרוביאליים בסין הגדולה, Yaohai Bio-Pharma מציעה פתרונות מותאמים לכל תהליך, או שירותים נפרדים, המהווים טווח של פעילויות החל מסינתזה של RNA, הנדסת ובניית זנים, פיתוח תהליכים עליונים ותחתונים, דרך ייצור חומר פעיל לפי תקן GMP או לא-GMP, ועד שרותי מלאי ומלאי עבור מגוון רחב של מודלים, כמו mRNA, circRNA, plasmid RNA, חלבונים רקורסיביים, פפטידים, אנזימים, חסימות תחום יחיד ו-VLPs לשימוש באדם ובבעלי חיים.

יאוהאי ביופרמה מחפשת גם כן שותפים גלובליים, מוסדיים או אישיים, ומציעה את התשלום הקומפטיטיבי ביותר בתעשייה. אם יש לכם שאלות כלשהן, אנא לא/Setezesist ליצור איתנו קשר: [email protected]