היום יאוחאי מתרגש להדגיש את פרוטוקול הטרנסקריפציה החיצונית שלו עבור RNA ארוך. זו אסטרטגיה יעילה שמדענים משתמשים בה לעתים קרובות כדי לייצר RNA במעבדה. בדרך זו חוקרים יכולים לייצר מספר גדול מאוד של RNA ארוך - משהו חיוני למחקר בתחומים ביולוגיים שונים. כאן אנו מספקים הדרכה צעד אחר צעד להכנת RNA ארוכים באמצעות טרנסקריפציה חיצונית. נדבר גם על איך ניתן לשפר את התהליך ולנסות לפתור חלק מהבעיות שאיתן אתם נתקלים בהרכבת RNA ארוך.
יש צורך במספר רכיבים עיקריים עבור טרנסקריפציה חיצונית, במיוחד עבור RNA ארוך. תצטרכו לספק אנזים בשם פולימראז RNA, "חומר כתיבה" בצורת טריפוספטידים נוקלאוטידיים (NTPs),緩ף לחזק את התגובה, ותבנית DNA כלשהי. כיצד לעשות זאת צעד אחר צעד, תוכלו למצוא הדרכה מפורטת כאן:
מספר גורמים הם חשובים מאוד לתפקוד המושלם של סינתזה של RNA. בולט שבהם הוא כמות האיונים של מגנזיום בתוך הבוור作者本人 חשובה. פולימראז RNA דורשת כמות גדולה של מגנזיום כדי לתמוך בהדבקה מתאימה לדגמי DNA והתקפלות של RNA. גורם נוסף שחשוב לקחת בחשבון הוא ריכוז דגמי DNA. באופן ספציפי, עליך להavin מספיק תבנית DNA תגובה כדי לקבל תוצאות טובות של RNA.
RNA ארוך, כמובן, יגיע עם קבוצת בעיות משלו. שהבעיות האלה יכולות להתייחס לפירוק של RNA, להשפיע על אופן שבו RNA נתקלף, ולבנות מבנים שעשויים להפריע לסינתזה של RNA. דרך אחת להתמודד עם אתגרים אלה היא לשנות את המאגר你说 תקח. עבור מבנה יותר כולל של RNA, חוקרים יכולים להוסיף כימיקלים מיוחדים שונים כמו DTT ו-p-mercaptoethanol כדי לעזור ל-RNA להתכופף נכון ולמנוע ממנו להדבק יחד או להצטבר.
בנוסף, לא כל סוגי ה-RNA הארוך דומים זה לזה וחלקם עשויים לדרוש שיטות סינתזה חלופיות. יש תכונות מיוחדות שחוקרים עשויים להזדקק להוסיף ל-RNA, כמו הוספת כובע 5' או זנב Poly-A. אם זה נדרש (כפי שיוסבר בהמשך), אז חוקרים צריכים לכלול אנזימים נוספים כמו Guanylyltransferase ו-Poly(A) Polymerase. גם עלינו לבחור באנזים RNA polymerase מתאים שמאפשר באופן טבעי לייצר יותר RNA. כיון שה-RNA הארוך צריך לסונתז, נצטרך לזהות את התנאים הטובים ביותר.
TRANSCRIPT של RNA ארוך בתנאים חלופיים יש מספר שימושים מובילים לפרוטוקול TRANSCRIPT של RNA ארוך בתנאים חלופיים במספר תחומים של מחקר, בדיקה ותרפיות. זה עוזר למדענים להבין את מבנה ה-RNA, הדרך בה הוא פועל ואיך הם יכולים לשנות גנים עם טכנולוגיות מודרניות. יום אחר יום התגלה שהרבה מחלות והתרפיות שלהן, כמו תרפיות RNA חדשות מאוד, מראות לנו כמה שימושית יכולה להיות טכנולוגיה זו לרפואה.
יש הרבה יתרונות בשימוש בפרוטוקול זה. שיטה מבוססת אלקטרופורזה היא בדרך כלל הדרך המהירה והכלכלית ביותר לייצר כמויות גדולות של RNA ארוך. בנוסף לאיכותלטת RNA, גודל תוצר גם הוא מרכיב חשוב עבור חוקרים כדי לעזור להם במחקר שלהם, במיוחד אם הם זקוקים לכמויות גדולות של RNA לניסויים בשל הצורך בהזנה התחלתית גבוהה. כמו כן, הרכבה חיצונית של RNA ארוך היא בדרך כלל מדוייקת וניתנת לשחזור יותר מאשר סינתזה כימית או סינתזה תאית של RNA.
Yaohai BioPharma היא אחת מ-10 המובילות ב-CDMO המיקרוביאלי שמשלבת פרוטוקול התרחיש תחתן עבור RNA ארוך וכן ענייני רגולציה. יש לנו מערכת ניהול איכות שמתאימה לסטנדרטים של GMP הנוכחיים והלائح העולמיות. צוות המומחים שלנו בתחום הרגולציה מיומן בהבנה של מסגרות רגולטוריות גלובליות כדי להאיץ את השיחורים הביולוגיים. אנו מבטיחים תהליכי ייצור מעקבים, מוצרים באיכות גבוהה, כמו גם התאמה לכללי ה-US FDA וה-EU EMA. אוסטרליה TGA וסין NMPA גם מרוצים. Yaohai BioPharma עברה בהצלחה את ביקורת האתר של האיש המוסמך (QP) של האיחוד האירופי למערכת איכות GMP שלנו ולמתקן הייצור שלנו.ßerdem, עברנו בהצלחה את הביקורות הראשונות של תקן ISO9001 לניהול איכות, ISO14001 לניהול סביבתי ו-ISO45001 לניהול בריאות ובטיחות בעבודה.
Yaohai Bio-Pharma, אחד המפיקים הגדולים ביותר של תכשירים ביולוגיים, הוא מומחה לפירוקת מיקרוביאלית. הקמנו מתקן מתקדם שמשולב בתקני מודרניים ויכולות חזקות לייצור RD. יש לנו חמישה קווי ייצור חומרים פעילים שמתאימים לדרישות GMP עבור פירוקת מיקרוביאלית וטהרה, ושני קווי מלאי אוטומטיים עבור קרטרים, בקבוקי זכוכית וסyringes מוכנים מראש. סקאלת הפירוקת הזמינה משתנה בין 100L ל-500L, 1000L ו-2000L. פרוטוקול התרחיש החיצוני לתוך RNA ארוך הוא 1 מ"ל עד 25 מ"ל, בעוד שהמגבלות המלאי של הסyringes מוכנים מראש והקרטרים הן 1-3 מ"ל. מפעל הייצור שלנו מתאים ל-norms cGMP ומבטיח מספק יציב של דגימות קליניות ופריטים מסחריים. המפעל שלנו מייצר מולקולות גדולות שמופרות ברחבי העולם.
ל-Yaohai Bio-Pharma יש נסיון בייצור תרופות ביולוגיות שמיוצרות ממקורות מיקרוביאליים. אנו מציעים פתרונות מותאמים של מחקר ופיתוח וכן שירותים לייצור תוך מינימיזציה של הסיכונים הפוטנציאלים. עבדנו עם טכניקות מגוונות, כמו תת-יחידות תאיות רקורסנטיות, חיסונים (כולל פפטידים), גורמי צמיחה, הורמונים, והפרוטוקול של הטרנסקריפציה In vitro ל-RNA ארוך. אנו מומחים במספר מיקרואורגניזמים כמו סكرת יין - מזכיבים ובנימי תאיים (迄 15g/L) ובקטריה - פתיל מסולבל לתוך התא ובנימי הגוף (迄 10g/L). nós גם פיתחנו את פלטפורמת התסיסה BSL-2 לבניית חיסוני בקטריה. יש לנו תיעוד של שיפור תהליכי הייצור, מה שמגדיל את התפוקה ומעריך עלויות. יש לנו צוות טכנולוגי יעיל במיוחד כדי להבטיח אספקה בזמן ובאיכות גבוהה של הפרויקטים. זה עוזר לנו להביא את המוצרים הייחודיים שלך לשוק מהר יותר.
Yaohai Bio-Pharma היא מובילה בפרוטוקול הטרנסקריפציה החיצונית ל-RNA ארוך ב-CDMO. התמקדותנו העיקרית הייתה בייצור חיסונים ותרפיות מיקרוביולוגיות לטיפול בחיות מחמד, אדם ובוטרינרי. אנו מחזיקים בפלטפורמות טכנולוגיות מתקדמות של R&D וייצור שמכסות את כל תהליך הייצור, מההנדסה של אצילי מיקרובים, דרך עיבוד מאגרי תאים ועיצוב שיטות עד לייצור קליני ומסחרי, כדי לוודא שאנו יכולים להבטיח את מסירת הפתרונות המתקדמים ביותר בהצלחה. צברנו כמות גדולה של ידע בתחום עיבוד המיקרובים הביולוגי. יותר מ-200 פרויקטים הושלמו בהצלחה, ואנחנו עוזרים ללקוחות שלנו להיאחז בתקנות כמו אלו של FDA האמריקאי וכן EMA האירופי. אנו גם עוזרים להם לנווט את TGA האוסטרלי וה-NMPA הסיני. בזכות החוויה והמומחה