Exploiter les IB bactériens pour la production de protéines recombinantes

Les corps d'inclusion bactériens (IB) utilisés dans la production de protéines recombinantes offrent une facilité de séparation, une stabilité, une expression élevée et une résistance à la dégradation, et peuvent exprimer des protéines toxiques ayant une activité biologique. Les progrès dans la compréhension des IB ouvrent de nouvelles voies de traitement, avec des défis et des solutions identifiés pour les recherches futures.

Yaohai Bio-Pharma a plus de 10 ans d'expérience dans la production de protéines recombinantes à l'aide de systèmes de fermentation microbienne. Notre équipe d'experts solide et professionnelle garantit que la protéine repliée purifiée peut atteindre 1.5 g/L.

Stratégies de traitement et défis des IB

Séparation des IB Les méthodes de séparation des IB dépendent de la structure et de la fonction des protéines ainsi que des besoins d'application. Les méthodes physiques perturbent les cellules mais peuvent nuire à la qualité des protéines. Les méthodes enzymatiques améliorent la pureté mais sont coûteuses. Les détergents doux fonctionnent pour les IB classiques, mais pas pour les non-classiques. Le contrôle du pH est crucial pour la solubilité. Le dépôt par électrophorèse est simple mais non évolutif pour les protéines biologiquement actives.

Solubilisation des IB La solubilisation des IB est cruciale pour récupérer les protéines actives. Les dénaturants puissants endommagent la structure native, tandis que les non-dénaturants ne conviennent pas aux IB classiques. Les solubilisants doux peuvent dissoudre les IB tout en protégeant la structure des protéines, mais pas toutes les protéines. Les travaux futurs nécessitent de meilleurs algorithmes pour sélectionner les solubilisants.

Stratégies de renaturation La renaturation des protéines est essentielle à la fonctionnalité. La renaturation in vitro est confrontée à des défis. Le choix du solubilisant, la concentration en protéines, les conditions et les méthodes affectent le résultat. Les solubilisants doux protègent la structure native et améliorent la qualité. Des concentrations modérées et des conditions optimisées réduisent l'agrégation. Les méthodes basées sur des colonnes avec des matrices monolithiques offrent une pureté et un rendement supérieurs.

Purification des protéines renaturées Une purification plus poussée permet de séparer les protéines mal repliées des protéines correctement repliées. La chromatographie traditionnelle rencontre des difficultés avec des protéines similaires. D'autres méthodes offrent des avantages, mais nécessitent une sélection spécifique de la protéine cible. Le développement d'une méthode de purification universelle reste un défi.

Pour aller plus loin

Les IB présentent des avantages dans la production de protéines recombinantes, mais posent des problèmes de traitement. Grâce à une meilleure compréhension de la structure et de la fonction des protéines au sein des IB et aux progrès réalisés en matière de séparation, de solubilisation, de renaturation et de purification, la récupération à haut débit de protéines actives pourrait bientôt être atteinte. Cela réduira les coûts et accélérera la R&D biopharmaceutique, stimulant ainsi la croissance du secteur.

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