Σήμερα το Yaohai είναι τόσο ενθουσιαστικό να μοιραστεί το πρωτόκολλο εξωσωματικής μεταφοράς του για μεγάλα RNA. Είναι μια αποτελεσματική στρατηγική που οι επιστήμονες χρησιμοποιούν συχνά για να παράγουν RNA στο εργαστήριο. Με αυτόν τον τρόπο, οι ερευνητές μπορούν να παράγουν σημαντικά μεγάλο αριθμό μεγάλων RNA – κάτι που είναι απαραίτητο για τη μελέτη σε διάφορα βιολογικά πεδία. Εδώ, παρέχουμε ένα βήμα-προς-βήμα οδηγό για την παρασκευή μεγάλων RNA μέσω εξωσωματικής μεταφοράς. Θα μιλήσουμε επίσης για το πώς μπορούμε να βελτιώσουμε την διαδικασία και να προσπαθήσουμε να αντιμετωπίσουμε μερικά από τα προβλήματα που αντιμετωπίζετε κατά τη σύνθεση μεγάλων RNA.
Απαιτούνται πολλά ουσιώδη στοιχεία για την εξωσωματική μεταφορά, ειδικά για μεγάλα RNA. Πρέπει να παρέχετε ένα ζυμωτικό που ονομάζεται RNA πολυμεράζα, γραφικό υλικό σε μορφή νουκλεοτιδικών τριφοσφάτων (NTPs), ένα φυσικό για να υποστηρίξει την αντιδρασία, και κάποιο DNA πρότυπο. Πώς να το κάνετε βήμα-προς-βήμα, μπορείτε να βρείτε ένα λεπτομερή οδηγό εδώ:
Αρκετοί παράγοντες είναι πολύ σημαντικοί για την καλή λειτουργία της σύνθεσης του RNA. Ο πιο εμφανής, η ποσότητα ιόντων μαγνησίου στο φάρμακο ίδιο είναι σημαντική. Η RNA πολυμεράσα απαιτεί μεγάλο όγκο Μαγνησίου για να υποστηρίξει την κατάλληλη αλληλεπίδραση με το DNA πρότυπο και την επόμενη συμβολή του RNA. Ένας δεύτερος σημαντικός παράγοντας που πρέπει να ληφθεί υπόψη είναι η συγκέντρωση του DNA προτύπου. Συγκεκριμένα, πρέπει να έχετε αρκετά DNA πρότυπα στην αντίδραση για να πάρετε καλά αποδόσεις RNA.
Το μεγάλο RNA, φυσικά, θα φέρει μαζί του μια σειρά ζητήματων. Αυτά τα προβλήματα μπορούν να σχετίζονται με τη λύση του RNA, να επηρεάζουν το πώς το RNA χτίζεται και να δημιουργούν δομές που μπορεί να αντικατοπτρίζουν τη σύνθεση του RNA. Μια τρόπος να αντιμετωπιστούν αυτές οι εκδηλώσεις είναι με την προσαρμογή του φυσικού που χρησιμοποιείτε. Για μια πιο εξονυχιστική δομή του RNA, οι ερευνητές μπορούν να προσθέσουν διάφορα ειδικά χημικά όπως DTT και p-mercaptoethanol για να βοηθήσουν το RNA να χτιστεί σωστά και να το προστατεύσουν από τη συμπήξη ή τη συσσωρευτική.
Επιπλέον, όχι όλα τα μεγάλα RNA είναι ίδια και κάποια μπορεί να απαιτούν εναλλακτικές μεθόδους σύνθεσης. Υπάρχουν ειδικές προδιαγραφές που οι ερευνητές μπορεί να θέλουν να προσθέσουν στο RNA, όπως η προσθήκη ενός 5' cap ή μιας Poly-A άκρας. Αν αυτό είναι απαραίτητο (όπως εξηγείται αργότερα), τότε οι ερευνητές θα πρέπει να περιλάβουν άλλες ένζυμες όπως τη Guanylyltransferase και τη Poly(A) Polymerase. Πρέπει επίσης να επιλεγεί ένα κατάλληλο ζυμητικό RNA polymerase που φυσικά επιτρέπει την παραγωγή περισσότερου RNA. Μόλις χρειαστεί να συνταχθεί μεγάλο RNA, θα πρέπει να εντοπίσουμε τις καλύτερες συνθήκες.
Οι μεγάλοι RNA εξωτερικά μεταφόρτωμα έχουν αρκετές κλειδικές χρήσεις στο πρωτόκολλο μεταφοράς μεγάλων RNA εξωτερικά σε διάφορους τομείς έρευνας, δοκιμών και θεραπευτικών προσπαθειών. Βοηθάει τους επιστήμονες να κατανοήσουν τη δομή του RNA, τον τρόπο λειτουργίας του και τον τρόπο με τον οποίο μπορούν να τροποποιήσουν γονίδια με σύγχρονες τεχνολογίες. Η ανακάλυψη νέων ασθενειών και των αντίστοιχων θεραπειών, όπως οι πολύ σύγχρονες θεραπείες με RNA, μας επιτρέπει να κατανοήσουμε πόσο χρήσιμη μπορεί να είναι αυτή η τεχνολογία για την ιατρική.
Υπάρχουν πολλά προβλέπειν από τη χρήση αυτού του πρωτοκόλλου. Μια μέθοδος με βάση την ελεκτροφόρηση είναι γενικά η πιο αποτελεσματική και οικονομικά αποδοτική τρόπος να παράγετε μεγάλες ποσότητες μεγάλου RNA. Εκτός από την ποιότητα του RNA, και ένα καλό απόδοση είναι επίσης σημαντικός παράγοντας για τους ερευνητές για να τους βοηθήσουν στην έρευνά τους, ειδικά αν χρειάζονται μεγάλες ποσότητες RNA για πειράματα λόγω υψηλού αριθμού εισόδου υλικών από την αρχή. Επιπλέον, η εξωπεριβλημένη μεταγραφή για μεγάλο RNA είναι συνήθως πιο ακριβής και αναπαράγωντας από τη χημική σύνθεση ή την κυτταρική σύνθεση του RNA.
Το Yaohai BioPharma είναι μια δέκατη κορυφαία Μικροβιολογική CDMO που ενσωμάτωσε το Πρωτόκολλο In vitro Transcript για Μεγάλο RNA καθώς και υποθέσεις ρύθμισης. Διαθέτουμε ένα σύστημα διαχείρισης ποιότητας που είναι σύμφωνο με τις τρέχουσες πρότυπες GMP καθώς και με τις παγκόσμιες ρυθμίσεις. Το ομάδα μας από ειδικούς στις ρυθμιστικές υποθέσεις είναι εξειδικευμένη στα παγκόσμια ρυθμιστικά πλαίσια για να επιταχύνει τις βιολογικές εκκινήσεις. Ασφαλίζονται αναδιωκτέες διαδικασίες παραγωγής, ποιότητα προϊόντων, καθώς και συμμόρφωση με τις κανονιστικές διατάξεις της US FDA και της EU EMA. Η Australia TGA και η China NMPA είναι επίσης ικανοποιημένες. Το Yaohai BioPharma έχει επιτυχώς περάσει την επιτήρηση στην ίδια την τοποθεσία από τον Ευρωπαϊκό Ένοπλο Πρόσωπο (QP) για το σύστημα ποιότητας GMP μας καθώς και την εγκατάσταση παραγωγής μας. Επιπλέον, έχουμε περάσει τις πρώτες πιστοποιητικές επιθεωρήσεις του Συστήματος Διαχείρισης Ποιότητας ISO9001, του Συστήματος Διαχείρισης Περιβάλλοντος ISO14001 και του Συστήματος Διαχείρισης Υγείας και Ασφάλειας στην Εργασία ISO45001.
Το Yaohai Bio-Pharma, ένας από τους δέκα κορυφαίους παραγωγούς βιολογικών προϊόντων, ειδικεύεται στη μικροβιακή φθορά. Έχουμε δημιουργήσει μια προηγμένη εγκατάσταση που εξοπλίζεται με σύγχρονες εγκαταστάσεις και ισχυρές δυνατότητες παραγωγής RD. Διαθέτουμε πέντε γραμμές παραγωγής φαρμακευτικών ουσιών που συμμορφώνονται με τα GMP κριτήρια για μικροβιακή φθορά και καθαρισμό, καθώς και δύο αυτοματικές γραμμές γεμισμού για καρτριτζ, φιάλες και προεγγεισμένα συριγμού. Οι διαθέσιμες κλίμακες φθοράς κυμαίνονται από 100L έως 500L, 1000L και 2000L. Τα πρωτόκολλα in vitro Transcript για μεγάλα RNA για φιάλες είναι 1ml έως 25ml, ενώ οι προεγγεισμένες κατανομές συριγμού και καρτριτζ καλύπτουν 1-3ml. Η εργοστασιακή μας μονάδα παραγωγής είναι συμμορφή με τα κριτήρια cGMP και εγγυάται σταθερή παροχή κλινικών δειγμάτων και εμπορικών προϊόντων. Η εγκατάστασή μας παράγει μεγάλα μόρια που αποστέλλονται σε όλο τον κόσμο.
Η Yaohai Bio-Pharma έχει εμπειρία στην παραγωγή βιολογικών που δημιουργούνται από μικροοργανισμούς. Προσφέρουμε προσαρμοσμένες λύσεις RD καθώς και υπηρεσίες παραγωγής ενώ ελαχιστοποιούμε τα πιθανά κινδύνια. Έχουμε εργαστεί με διάφορες τεχνικές, όπως αναδιπλασιαστικά κυτταρικά υπομέρη, εμβολία (συμπεριλαμβανομένων των πεπτιδίων), μεγαλύτερα παράγοντες, ormones και το Πρωτόκολλο Μεταφοράς in vitro για μακρά RNA. Είμαστε ειδικοί σε πολλούς μικροοργανισμούς όπως μεριστική και εσωτερική κυτταρική κρεμαστή κατάθλιψη με μάιτσα (απόδοση μέχρι και 15g/L) και βακτηριακή εσωτερική λύση και σώματα περιclusão (απόδοση μέχρι και 10g/L). Έχουμε επίσης αναπτύξει μια πλατφόρμα φθοράς BSL-2 για να δημιουργήσουμε βακτηριακά εμβολία. Έχουμε ιστορικό βελτίωσης των διαδικασιών παραγωγής, με αποτέλεσμα την αύξηση των αποδόσεων και τη μείωση των κόστων. Διαθέτουμε μια εξαιρετικά αποδοτική τεχνολογική ομάδα για να εξασφαλίσουμε ενδεδεικτική και υψηλής ποιότητας παράδοση των έργων. Αυτό μας βοηθά να φέρουμε τα ειδικά σας προϊόντα γρηγορότερα στην αγορά.
Το Yaohai Bio-Pharma είναι ηγέτης στον τομέα του In vitro Transcript Protocol για μεγάλα RNA CDMO. Η κύρια μας επιστήμη έχει επικεντρωθεί στην παραγωγή μικροβιακών εμβολίων και θεραπευτικών για την αναγνώριση και την θεραπεία των ζώων, της ανθρώπινης υγείας και της κτηνιατρικής. Διαθέτουμε προηγμένες τεχνολογικές πλατφόρμες R&D και παραγωγής που καλύπτουν την ολοκληρωμένη διαδικασία παραγωγής, από τη μηχανική των μικροβιακών φυλών, μέχρι την επεξεργασία των κυτταρικών τραπεζών και τη σχεδίαση μεθόδων για την κοινωνική και εμπορική παραγωγή, εξασφαλίζοντας ότι μπορούμε να εξασφαλίσουμε την επιτυχή παράδοση των πιο προηγμένων λύσεων. Έχουμε συγκεντρώσει μια μεγάλη ποσότητα γνώσεων στον τομέα της μικροβιακής βιοεπεξεργασίας. Πάνω από 200 έργα έχουν ολοκληρωθεί με επιτυχία και βοηθούμε τους πελάτες μας να συμμορφώνονται με τις κανονιστικές απαιτήσεις όπως αυτές της US FDA και της EU EMA. Βοηθούμε επίσης τους να αντιμετωπίσουν την Australia TGA και την China NMPA. Είμαστε σε θέση να απαντήσουμε γρήγορα στις απαιτήσεις της αγοράς και να προσφέρουμε προσαρμοσμένες υπηρεσίες CDMO λόγω της εμπειρίας και της ειδικότητάς μας.